Summary
우리는 복 부 지방 조직 생 검 국 소 마 취 아래 수행 비 투 열 방법을 사용 하 여 표준화. 세 가지 경우의 과도 한 후 115 작업 (2.61%)에서 출혈 발생 했습니다. 우리는 복 부 지방 조직 수술 생 검 투 비 열 방법을 사용 하 여 적용할 수 있는 안전 하 게 건강 한 사람에 게 결론.
Abstract
지방 조직 생 검 조직 샘플을 분석, 시 대사 및 질병 메커니즘의 통찰력이 개요를 제공할 수 있습니다 제공 합니다. 복 부 지역에 피하 지방 조직 생 검, 연구자와 의사는 수술 또는 바늘 기반 기술을 사용 합니다. 그러나, 수술 피하 지방 biopsies 백색 지방 조직에 생물학적 지표의 복합성의 더 포괄적인 개요를 제공할 수 있는 조직 샘플을 제공할 수 있습니다. 일반적으로, 수술 지방 조직 생 검 투 열 치료 cauterizing 혈관 과도 한 출혈을 방지 하기 위해 포함 되어 있습니다. 그럼에도 불구 하 고, 플래시 화재와 조직, 피부 장애 등의 부작용 투 열 후 보고 되었습니다. 따라서, 우리는 표준화 비 투 열 방법을 사용 하 여 로컬 마 취 아래 수행 수술 복 부 지방 조직 생 검 목적입니다. 우리는 건강 한 남성 비 투 열 복 부 수술 생 검 메서드를 사용 하 여 115 피하 지방 조직 생 검 실시. 우리의 결과 115 작업 (2.61%)에서 출혈 과도 한 사후 작업의 세 가지 경우를 보여주었다. 결론적으로, 우리의 표준된 피하 복 부 지방 조직 수술 생 검 투 비 열 방법을 사용 하 여 최소한의 부작용으로 머리 맡에 건강 한 사람에 게 안전 하 게 적용할 수 있습니다.
Introduction
지방 조직 생 검 조직 샘플을 분석, 시 대사 및 질병 메커니즘의 통찰력이 개요를 제공할 수 있습니다 제공 합니다. 예를 들어, 그들은 유 방 암 종양 식별1, 지방산 조성 시험2및 중요 한 대사와 호르몬 질병 경로3에 대 한 연구에 사용 됩니다. 복 부 지역에 피하 지방 조직 생 검, 연구자와 의사는 수술 또는 바늘 기반 기술을 사용 합니다. 그러나, 수술 피하 지방 생 검 조직 샘플 [예를 들어, 메신저 ribonucleic 산 (mRNA) 식, 조직학 분석, 등] 복잡 한 생물 학적 메커니즘의 포괄적인 개요를 제공할 수 있습니다 제공할 수 있는4 . 그들은 건강 한 성인4 에서 이전에 사용 하 고 침대5에서 안전 하 게 수행할 수 있습니다.
생 검 바늘 기반 기술 조직의 무결성을 파괴 수 있습니다 강렬한 지방 흡입 필요 하 고 일반적으로 적은 양의 조직 (100-500mg)6을 검색 합니다. 이러한 조직 샘플 복잡 한 조사 연구에 적합 하지 않을 수 있습니다. 또한, 바늘 기반 기술에 비해, 수술 피하 지방 biopsies 제공할 수 있습니다 (예를 들어, B와 T 세포 신호); 여러 염증 성 지표의 더 완전 한 그림을 그릴 수 있습니다 조직 샘플 골격 규정; 세포질 통로; 지질, 탄수화물, 아미노산;의 대사 경로 그리고 산화 인 산화 통로4. 바늘-기반 기술 조직4,7,8 거리 영역에 대 한 약간의 정보를 제공 하면서 수술 한4, 보다 혈액 세포 오염에 대 한 높은 위험을 포함 하는 또한, .
일반적으로, 수술 지방 조직 생 검 투 열 치료9과도 한 출혈 방지 하기 위해 혈관을 cauterizing에 대 한 포함 되어 있습니다. 투 열 또한 구울 조직 신생 및 사마귀 질환9에 의해 감염 되는 조직에 의해 영향을 파괴 하는 데 사용 됩니다. 이 기술은 특히 신경외과 눈 수술9에 적용 됩니다.
투 열 요법의 과도 한 사용은 괴 사 성 조직, 감염을 일으키는 원인이 되 고 치유 과정10지연의 형성으로 이어질 수 있습니다. 실제로, 플래시 화재 등 조직 병 변 피부 부작용 투 열9를 다음 보고 되었습니다. 또한, 우려 참가자/환자와 운영 직원9에 의해 흡입 수 있습니다 수술 환경에 투 열에 의해 발표 외과 연기의 독성에 대해 제기 되고있다. 실제로, 투 열 요법의 사용 흡연 6 담배11 에 의해 생산에 동일 수술 실에서 어 독성을 일으킬 수 있습니다 그리고 비록 수술 일반적으로 좋은 환기 시스템, 오염 수 마지막 적어도 20 분12 . 그러나, 환자는 편도 선 수술 수술 사업, 투 열 메서드는 표시13 비-중요 한, 수술 후 통증 및 출혈14 클래식 결 찰 hemostasis 방법 보다 덜. 전반적으로, 수술 후 통증에 차이 및 건강 한 개인에서 지방 조직 생 검 후 요금을 거의 출혈 증거 존재 합니다. 투 열 요법의 부작용 및 증거의 부족을 감안할 때, 지방 조직 생 검에 대 한 비 투 열 방법의 표준화가 보증 된다. 따라서,이 연구의 목표는 복 부 피하 지방 조직 생 검, 건강 한 남자의 비 투 열 메서드를 사용 하는 국 소 마 취 아래 수행에 대 한 수술 기법을 표준화 했다. 또한, 우리는 조직 컬렉션 mRNA 표정 및 단백질 농도 결정 하 고 조직학 분석을 수행 하는 절차를 설명 합니다.
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Protocol
연구 헬싱키의 선언에 의해 설정 된 표준 규격에 맞 췄 고 티 살 리의 대학, 운동 과학, Βiοethics 위원회에 의해 승인 되었다.
1. 수술 장비 및 소모품의 준비
- 4 륜 수술 메이 요 서에 소독된 수술 필드 위치.
- 4 륜 수술 메이 요 서에는 다음 소모품 및 수술 장비 위치:
바로 운영가 위 (15 cm)의 한 쌍
한 메스 (번호 11)
한 메스 핸들
곡선된가 위 (14 cm)의 한 쌍
한 모기 겸 자
Kocher 핀셋 한 켤레
한 외과 족집게
Povidone-요오드 (에 대 한 살 균 거 즈)
한 봉합 (4.0)
직선 위 (11 cm)의 한 쌍
한 바늘 홀더 (15 cm)
5 살 균 gauzes
한 접착제 멸 균 거 즈
소독된 바늘으로 한 10 mL 주사기
2 %xylocaine (아드레날린)의 10 mL
하나 소독된 외과 장갑의 쌍 - 별도 벤치에 다음 자료 위치:
두 microcentrifuge 튜브
10% 포 르 말린의 5 mL를 포함 하는 1 개의 관
-190 ° c.에 액체 질소의 50-100 mL를 포함 하는 하나의 작은 컨테이너
2. 참가자의 준비
- 참가자 따라 생 검 절차 전에는 8 h 빠른 15.
- 있고 참가자 자제 운동, 과도 한 스트레스, 알코올, 그리고 액티브 간접 흡연 72 h 이전 생 16 , 17.
3. 피하 지방 조직 생 검을 수행
- 부정사 위치에 수술 침대에 참가자를 위치.
- 절 개 povidone-요오드를 사용 하 여 영역을 소독.
- 천천히 그리고 꾸준히 2 %xylocaine (아드레날린)의 10 mL를 주사 취 역할을 선택한 지역에 18.
- 절 개 영역을 제외한 참가자의 시체를 충당 하기 위해 지역 무 균 수술 필드 위치.
- 적어도 3-5 분 나중에, 로컬 마 취의 영역에 핀셋의 쌍을 가진 압력을 적용 하 고 그 느낌 그 취를 달성을 보장 하기 위해 모든 고통을 19 참가자에 게 물어.
- 11 호 메스 메스 핸들 연결.
- 배꼽의 오른쪽 또는 왼쪽에 3-5 cm, 길이 2-2.5 cm의 절 개를 만듭니다.
- 스트레이트 15 cm가 위를 운영 한 켤레와 피하 조직을 제거.
- 지방 조직 밝혀 일단 한 쌍의 족집게와 곡선된 14 cm가 포착.
- 잘라 약 1g의 지방 조직 제거.
- 조직 제거, 다음 놓고 살 균 gauzes hemostasis 달성 하기 위해 절 개.
- Hemostasis 확인 될 때 캡처 14 cm 바늘 4.0 봉합 및 피부 외과 핀셋의 쌍을 가진 피하 조직 표시 될 때까지.
- 피하 조직으로 이동 하는 피부 및 피하는 밀접 하 게 정렬 하는 동안 피부에 봉합 바늘을 삽입.
- 봉합 바늘, 피하 조직까지 피부 외부 구동으로 연속 지그재그 기법을 따라. 피부 절 개를 닫힐 때까지 계속.
- 외부 봉합 넥타이.
- 절 개 식 염 수의 영역을 청소 하 고 접착제 메 마른 거 즈로 그것을 커버.
4. 조직의
- 3 개의 조각으로 수집 된 지방 조직을 구분: 150, 350, 및 500 mg.
- Microcentrifuge 튜브 샘플 조직 150와 350 mg 조각 위치.
- -80에서 냉장고에 최종 증 착까지-190 ° C에 액체 질소로 작은 용기에 담가 두 microcentrifuge 튜브 ° C.
참고: 사전에 사용 하 여 무 균 바늘-190에서 액체 질소에 microcentrifuge 튜브의 침수 동안 컵 오류를 방지 하려면 microcentrifuge 튜브에 작은 구멍을 찌를 ° c. - 담가 샘플 조직 500mg 조각-조직학 분석을 위해 사용 될-10% 포 르 말린의 5 mL를 포함 하는 튜브에.
주: 수술 중 과도 한 출혈의 경우에만 모기 겸 자 사용. 이러한 경우 하 선 고 hemostasis 달성 될 때까지 닫습니다 모기 집게와 선박 포착.
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Representative Results
참가자의 특성은 표 1에 제공 됩니다. 스티치 절 개의 영역에서 다음 8-12 일 이내 떨어졌다. 우리는 건강 한 성인 남성 비 투 열 복 부 수술 생 검 방법을 사용 하 여 115 피하 지방 조직 biopsies의 총 완료 (나이: 35.2 ± 6.9 년; 신체 질량 지 수: 27.3 ± 4.4; 및 체 지방 비율: 27.0 ± 9.0%). 세 가지 경우에서 관찰 되었다 과도 한 출혈 후 생 검 (보급: 2.61%)는 수술 후 2 일. 3 개인 과도 한 출혈을 경험 했다 아무 부작용 경험 들 보다 더 오래 된 [t(113)=-2.115, p = 0.037], 그리고 다른 차이 (즉, 몸 대량 색인 및 신체 지방 비율) (p를 관찰 했다 > 0.05) 두 그룹 사이의. 마지막으로, 각 작업 후 3 개월 우리의 참가자의 아무도 어떤 부작용 (를 포함 하 여 피부 상처) 보고.
표 1: 참가자의 특성입니다.
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Discussion
이 연구의 목적은 복 부 피하 지방 조직 생 검, 건강 한 남성에서 비 투 열 방법으로 국 소 마 취 아래 수행에 대 한 수술 기법을 표준화 했다. 투 열은 일반적으로 수술 실;에 사용 그러나, 가능한 부작용 (즉, 플래시 화재 및 환경 독성)9 와10 치유 지연이 발생할 수 있습니다. 투 열 요법의 이러한 원치 않는 효과 운영 직원과 환자/참가자에 대 한 건강 위험을 생성할 수 있습니다. 따라서, 피하 지방 조직 생 검에 대 한 수술 비 투 열 방법 보증 된다.
우리 참가자 중 3 2 일 수술 후 출혈 과도 한 관찰 합니다. 이 세 개인 보고 절 개의 지역에 통증. 이러한 경우 치료에 피부 절 개의 지역 재개 했다, 어떤 과잉 혈액 제거 및 식 염 수와 위에서 설명한 동일한 기술을 사용 하 여 닫힌 지역의 청소 했다. 아니 합병증, 그 후 보고 되었다 그리고 연속적인 일에 관찰 했다 정상적인 치유. 우리의 결과 비 투 열 방법 후 최소한의 부작용을 보여주었다: 115 작업 (2.61%)에서 출혈 과도 한 사후 작업의 세 가지 경우. 바늘-기반 지방 조직 생 검에서 이전 증거 보여 건강 한 비만 개인에 사이드 커팅 지방 조직 생 검 후 발생 한 아무 중요 한 출혈 하는 동안 수술15일 후 한 10 참가자 12 h에에서 출혈 부 바늘 기술6. 우리는 투 열 비 수술 지방 조직 생 검 방법 수술 지방 조직 중 투 열에 의해 발생 하는 피부 병 변, 플래시 화재와 운영 환경에서 발표 독성에 대 한 위험을 제거할 수 있습니다 기대 하 고 우리의 결과에 따라, 생 검입니다.
이전 보고서는 노화는 hemostasis20에 이상이와 긍정적으로 관련 된 지적 했다. 흥미롭게도, 3 개인 현재 연구에서 과도 한 출혈을 경험 했다 (평균 8 년)에 의해 크게 더 오래 된 어떤 부작용을 경험 하지 않은 사람들 보다. 따라서, 그것은 투 열 비 수술 지방 조직 생 검 방법은 적용 됩니다 때 이전 개인 부작용에 대 한 높은 위험을가지고 그 지적 수 있습니다. 그러나, 우리가 그러한 부작용의 보급은 너무 낮은 생각 (즉, 2.61%) 어떤 중요 한 관심사를 일으키는 원인이 되기 위하여. 그것은 우리의 참가자 사전에 자신의 건강 상태를 확인 하기 위해 병력 질문 지 가득 주목 한다. 이전 만성 질환 조건이 누가 과도 한 후 작업 출혈 보여주 세 참가자를 포함 하 여 참가자에 의해 보고 되었다. 마찬가지로, 이전 만성 약물 치료는 보여 참가자와 과도 한 출혈이 나타나지 않았다 하는 사람들에 의해 보고 되었다. 따라서, 작업 후 과도 한 출혈 현재 연구에서 관찰 이전 만성 질병 상태 또는 이전 만성 약물 치료로 표시 될 수 없습니다. 이러한 관점에서이 부작용의 보급 기술은 임상 인구에 적용 되는 경우 달라질 수 있습니다.
제안 된 외과 지방 조직 생 검 동안 중요 한 단계는 절 개, 통증 및 참가자에 불편을 방지 하기 전에 취입니다. 또한, 마 취 주입 동안 알레르기 합병증을 방지 하기 위해 마 취에 알레르기 역사의 사전 심사를 수행 합니다. 또한, 그것은 절 개 후 작업 출혈 발견 달성은 완전 치유 될 때까지 절차를 수행한 후 몇 일 동안 참가자와 접촉을 유지 하는 것이 중요 하다 하는 동안 방지 하기 위해 닫힐 전에 hemostasis 되도록 중요 어떤 잠재적인 이상이 감염 또는 사후 작업이 출혈의 경우를 방지 하 고.
제안 된 생 검 기술의 한계 절 개의 영역을 편안 하 게 앉아 샤워/목욕, 완전 한 치유를 얻을 때까지 그들의 능력에 특히 관련 된 참가자 들에 게 발생할 수 있습니다 불편을 포함 합니다. 참가자는 감염을 막기 위해, 또한 완전 한 치유를 얻을 때까지 매일 절 개 영역 접착제 멸 균 거 즈를 교체로 절 개의 영역을 세척 하지 않으려면 지시 한다. 매일 이렇게 불편을 일으킬 수 있습니다. 마지막으로, 그것은 우리의 목적을 소개 하 고 새로운 기술 표준화 않았습니다. 이러한 관점에서이 기술을 새로 도입 된 비 투 열 메서드 간의 차이 정량화 하기는 컨트롤 그룹 사업 바늘 기반 피하 지방 biopsies를 사용 하지 않았다.
이전 제안된4,7,8, 제안 된 외과 생 검 기술은 바늘 기반 기술 보다 더 높은 무결성과 조직 샘플을 제공할 수 있습니다. 실제로,이 기술을 사용 하 여, 우리 mRNA를 수행할 수 있었고 단백질 분석 얻은 조직에 및, 더하여, 양식 파라핀 큐브에 대 한 조직학 분석에 사용. 또한, 좋습니다 수술 피하 지방 조직 생 검, 투 열을 피하는 hemostasis과 정상적인 치유 우리의 기술로 달성 될 수 있다.
결론적으로, 우리의 표준된 피하 복 부 지방 조직 수술 생 검 투 비 열 방법을 사용 하 여 최소한의 부작용으로 머리 맡에 건강 한 남성에서 안전 하 게 수행할 수 있습니다.
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Disclosures
저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.
Acknowledgments
이 작품 (612547 및 319010 계약 번호 부여) 프로그램 유럽 연합의 지평선 2020 (부여 계약 번호 645710)와 7 프레임 워크에서 자금을 받았다. 저자 생 검 절차와 지원에 대 한 박사 경관을 Sourli-Chasioti 감사 하 고 싶습니다. 저자는 또한 비디오의 준비에서 그의 귀중 한 도움 씨 해당 Paterakis를 감사합니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Disinfected surgical field | Hartmann | 23516-00 | |
| Stainless Steel Instrument Stands (surgical Mayo) | Medical Device Depot Inc. | 32000 | |
| Operating Scissors straight 15 cm | Karl Storz | 791903 | |
| Scalpel No 11 | Swann-Morton | 203 | Bipolar, catalog number 429011 |
| Scarpel handle No 3 | Karl Storz | 488090 | |
| Scissors curved 14 cm | Karl Storz | 511514, 752918 | |
| Mosquito forceps | Karl Storz | 535012 | |
| Tweezers Kocher | Karl Storz | 530416 | Bipolar, catalog number 830316 |
| Surgical tweezers | Karl Storz | 793216 | Bipolar, catalog number 831016 |
| Povidone-iodine | Various | Not applicable | |
| Suture 4.0 Vicryl | Johnsons | V4970H | |
| Scissors straight 11 cm | Karl Storz | 512511 DS | |
| Needle holder 15 cm | Karl Storz | 515515 | Bipolar, catalog number 213015 |
| Sterile gauzes | Hartmann | 3021 | |
| Αdhesive sterile gauze | Digas medical equipment | 2889 | |
| 10 mL syringe with disinfected needle | Alpha medical solutions | 10310-55-0010 | |
| 2%-xylocaine (no adrenaline) | Various | Not applicable | |
| Sterile surgical gloves | Sempermed | 10001 | |
| Eppendorf tubes | Kartell | 16283 | |
| 10% formalin | Alpha medical solutions | 11016-30-2909 | |
| Tubes 120 mL | Digas medical equipment | 9025 | |
| Liquid nitrogen at -190°C | Revival | Not applicable |
References
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