Summary
Мы стандартизированных биопсии брюшной жировой ткани, с помощью метода non диатермия выполняются под местной анестезией. Три случаи чрезмерного послеоперационного кровотечения из 115 операций (2,61%). В заключение мы безопасно для здоровых людей может применяться Хирургическая биопсия брюшной жировой ткани, с помощью метода non диатермия.
Abstract
Жировая ткань биопсии предлагают образцы тканей, которые, после анализа, могут обеспечить глубокие обзоры механизмов, касающихся обмена веществ и болезней. Для получения биопсии подкожной жировой ткани в области живота, исследователи и врачи использовать хирургические или технику на основе иглы. Однако хирургические подкожного жира биопсия может предложить образцов тканей, которые могут обеспечить более всесторонний обзор сложных биологических показателей в белой жировой ткани. Обычно биопсия хирургической жировой ткани включает диатермия лечения для прижигания кровеносных сосудов для предотвращения чрезмерного кровотечения. Тем не менее побочные эффекты, такие как флэш-пожары и поражения кожи в ткани, были зарегистрированы после диатермия. Таким образом мы стремились стандартизировать хирургическая абдоминальная жировой ткани биопсия проводится под местной анестезией с помощью метода non диатермия. Мы провели 115 биопсий подкожной жировой клетчатки в здоровых мужчин с помощью метода non диатермия брюшной Хирургическая биопсия. Наши результаты показали три случая чрезмерного послеоперационного кровотечения из 115 операций (2,61%). В заключение наши стандартизированные подкожной жировой ткани брюшной Хирургическая биопсия, с помощью метода non диатермия может безопасно применяться к здоровых мужчин в постели, с минимальными побочными эффектами.
Introduction
Жировая ткань биопсии предлагают образцы тканей, которые, после анализа, могут обеспечить глубокий обзор механизмов, касающихся обмена веществ и болезней. Например они используются для молочной железы опухоль идентификации1, жирнокислотный состав экзамен2и исследований на важных метаболических и гормональных заболеваний пути3. Для получения биопсии подкожной жировой ткани в области живота, исследователи и врачи использовать хирургические или технику на основе иглы. Однако, хирургические подкожного жира биопсия может предложить образцов тканей, которые могут обеспечить более всесторонний обзор сложных биологических механизмов [например, посланник рибонуклеиновой кислоты (мРНК) выражение, гистологический анализ и т.д.]4 . Они ранее были использованы в здоровых взрослых4 и может быть безопасно выполнена в постели5.
Техника на базе иглы биопсии требует интенсивной липосакции, который может разрушить целостность ткани, и он обычно получает небольшое количество ткани (100-500 мг)6. Эти образцы тканей может не подходить для сложных научных исследований. Кроме того по сравнению с техникой на основе иглы, хирургические подкожного жира биопсия может предложить образцов тканей, которые могут нарисовать более полную картину несколько воспалительных индексов (например, B - и Т-клеток сигнализации); Цитоскелет регулирования; Сотовый путей; метаболические пути, липидов, углеводов и аминокислот; и окислительного фосфорилирования пути4. Кроме того на основе иглы техника включает в себя более высокий риск для заражения клеток крови чем хирургические один4, обеспечивая мало информации о регионах фиброзных тканей4,7,8 .
Обычно биопсия хирургической жировой ткани включает диатермия лечения прижигание кровеносные сосуды, чтобы предотвратить чрезмерное кровотечение9. Диатермия также используется для записи и уничтожить тканей, пострадавших от новообразований и бородавки или ткани, которые заражены болезнью9. Эта техника особенно применимо в нейрохирургии и глаз хирургии9.
Чрезмерное использование диатермии может привести к формированию некротических тканей, вызывая инфекции и задержки исцеления процесса10. Действительно побочные эффекты, такие как флэш-пожары и поражения кожи в ткани были зарегистрированы после диатермия9. Кроме того высказывалась о токсичности хирургические дыма, выпущенное диатермия в хирургии среду, которая может быть вдыхании участник/пациента и оперативных сотрудников9. Действительно использование диатермии может привести к токсичности воздуха в операционной комнате равным, производимый некурящих шесть сигареты11 , и, хотя операционных залов, как правило, имеют хорошие вентиляционных систем, загрязнение может длиться в течение по крайней мере 20 минут12 . Однако в проведение тонзиллэктомии хирургии пациентов, диатермия метод показал меньше, но несущественного, послеоперационные боли13 и14 кровотечения чем метод гемостаз классический перевязки. В целом существуют доказательства относительно различий в послеоперационной боли и кровотечение ставки после биопсии жировой ткани в здоровых людей едва. Учитывая отсутствие доказательств и побочные эффекты диатермия, стандартизация метода non диатермия для биопсии жировой ткани является оправданным. Таким образом целью данного исследования было стандартизировать хирургической техники для биопсии брюшной подкожной жировой клетчатки, проводится под местной анестезией с помощью метода non диатермия в здоровых мужчин. Кроме того мы приводим процедур сбора ткани определить выражение mRNA и концентрацией белка и гистологический анализ.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
исследования соответствовали стандартам, установленным в Хельсинкской декларации и был одобрен Βiοethics Университета Фессалии, Департамент упражнения науки, Комитет.
1. Подготовка операции оборудования и расходных материалов
- позиция вылеченных операционного поля на стенде 4 колеса хирургические Майо.
- Позиции следующие материалы и хирургическое оборудование на 4-х колесный хирургические Майо стенд:
Одна пара прямой операционной ножницы (15 см)
один скальпель (№ 11)
один скальпель ручка
одной пары изогнутые ножницы (14 см)
один комар щипцами
одна пара пинцеты Kocher
один хирургический пинцет
повидон йод (на стерильный марля)
одним швом (4.0)
одну пару прямые ножницы (11 см)
один иглодержатель (15 см)
пять сетки стерильные
один клей стерильные марлевые
один 10-мл шприц с иглой вылеченных
10 мл 2% xylocaine (не адреналин)
один вылеченный хирургические перчатки - позиции следующие материалы на отдельном стенде:
2 пробки microcentrifuge
одна трубка, содержащая 5 мл формалина 10%
один небольшой контейнер, содержащий 50-100 мл жидкого азота-190 ° c.
2. Подготовка участников
- у участников следить за 8 ч 15 быстро до процедура биопсии.
- У участников воздерживаться от физических упражнений, чрезмерный стресс, алкоголя и активного и пассивного курения 72 ч до 16 , биопсия 17.
3. Выполнение биопсии подкожной жировой ткани
- позиция участника на хирургические кровати в лежачем положении.
- Лечить региона разрез, используя повидон йод.
- Придать 10 мл 2% xylocaine (не адреналин), медленно и неуклонно 18 в выбранной области в качестве местной анестезии.
- Позиция стерильные хирургические поле над районом для покрытия тела участника, за исключением региона разреза.
- По крайней мере 3-5 мин после, применить давление с парой пинцетов области местной анестезии и попросите участника, если он чувствует себя любой боли 19 для обеспечения что местной анестезии был достигнут.
- Прикрепить скальпель № 11 к дескриптору скальпель.
- Создать разрез длиной 2-2,5 см, 3-5 см слева или справа от пупка.
- Удаления подкожной клетчатки с парой прямых 15 см, операционной ножницы.
- После того, как раскрывается в жировой ткани, захватить его с парой пинцетом и изогнутые 14 см ножницами.
- Вырезать и удаление жировой ткани примерно 1 г.
- После удаления ткани, сетки стерильные наведите разрез для достижения гемостаза.
- Когда подтверждается гемостаз, захватить 4.0 шовный материал с иглой 14 см и кожи в с парой хирургического пинцета до подкожной клетчатки видна.
- Вставить шов иглу в кожу, направлении подкожной клетчатки, в то время как тесно связаны кожи и подкожной.
- Иглой шов, следовать за методом непрерывной Зиг заг в подкожной клетчатке пока внешне отогнали кожи. Продолжать до тех пор, пока Кожный разрез закрыт.
- Внешне галстук шов.
- Чистота области разреза с соленой и накрыть клей стерильные марлевые.
4. Осаждения ткани
- отдельные собранные жировой ткани на три части: 150, 350 и 500 mg.
- Положение 150 и 350 мг части образца ткани в пробирках microcentrifuge.
- Трубы microcentrifuge погрузиться два в небольшой контейнер с жидким азотом в-190 ° C до окончательного осаждения в морозильник на -80 ° C.
Примечание: заранее, используйте стерильные иглы в пункционная небольшое отверстие в microcentrifuge трубы, чтобы избежать неудачи Кубок во время погружения microcentrifuge трубок в жидком азоте в -190 ° с. - Погружать 500 мг кусок образца ткани-использоваться для гистологического анализа-в пробирку, содержащую 5 мл 10% формалина.
Примечание: Используйте корнцанг комаров только в случаях кровотечение во время операции. В таких случаях захвата судна с щипцами комаров перевязать и закрыть до достижения гемостаза.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Характеристики участников приводятся в таблице 1. Швы в области разреза упал в течение 8-12 дней. Мы завершили в общей сложности 115 биопсий подкожной жировой ткани, с помощью метода non диатермия брюшной хирургической биопсии у здоровых взрослых мужчин (возраст: 35.2 ± 6,9 лет; индекс массы тела: 27.3 ± 4,4; и процентное содержание жира: 27,0 ± 9,0%). После биопсии чрезмерное кровотечение было отмечено в трех случаях (распространенность: 2.61%) через два дня после операции. Трех лиц, которые испытывали чрезмерного кровотечения были старше, чем их коллеги, которые испытали никаких побочных эффектов [t(113)=-2.115, p = 0,037], и без других различий (например, массы индекс и тела процентное содержание жира) были замечены (p > 0,05) между двумя группами. Наконец через три месяца после каждой операции, ни один из наших участников сообщили побочных эффектов (включая раны кожи).
Таблица 1: Характеристики участников.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Целью данного исследования было стандартизировать хирургической техники для биопсии брюшной подкожной жировой клетчатки, выполняется под местной анестезией с не диатермия методом в здоровых мужчин. Диатермия обычно используется в операционной комнате; Однако возможные побочные эффекты (например, флэш-пожары и токсичности для окружающей среды)9 и задержки исцеления10 может произойти. Эти нежелательные эффекты диатермия может создавать риски для здоровья для обслуживающего персонала и пациентов/участников. Таким образом гарантируется хирургический метод не диатермия для биопсии подкожной жировой клетчатки.
Мы наблюдали чрезмерное кровотечение в трех наших участников через два дня после операции. Эти три лица сообщили боли в области разреза. Для лечения таких случаях области Кожный разрез был открыт, любой избыток крови был удален, и район был очищен с физиологическим и закрытые, используя ту же технику, описанных выше. Осложнений не были зарегистрированы после этого, и нормальный исцеление наблюдалось в последующие дни. Наши результаты показали минимальные побочные эффекты после метода non диатермия: три случая чрезмерного послеоперационного кровотечения из 115 операций (2,61%). Предыдущие показания биопсия иглы основе жировой ткани показали незначительные кровотечения в один из 10 участников 12 h после хирургии15, а не значительное кровотечение произошло в здоровых ожирением лица после биопсии жировой ткани стороне резки Игла техника6. Основываясь на наших результатах, мы ожидаем, что метод биопсии не диатермия хирургические жировой ткани может устранить риск поражения кожи, Flash-пожары и токсичности, выпущенный в операционной среде, которые вызваны диатермия во время хирургических жировой ткани Биопсия.
Предыдущие доклады показали, что старение положительно связаны с аномалиями в гемостаза20. Интересно, что трех лиц, которые испытали чрезмерное кровотечение в текущем исследовании были значительно старше (на восемь лет, в среднем) чем те, которые не испытывают никаких побочных эффектов. Таким образом следует отметить, что пожилые люди имеют более высокий риск побочных эффектов при применении метода биопсии не диатермия хирургические жировой ткани. Однако мы считаем, что распространенность таких побочных эффектов является слишком низким (т.е. 2,61%) вызывать каких-либо значительных проблем. Следует отметить, что наши участники заранее заполнены медицинской истории вопросник для определения состояния их здоровья. Не предыдущие условия хронической болезни поступили от участников, в том числе трех участников, которые проявили чрезмерное кровотечение после операции. Аналогичным образом не предыдущих хронических медикаментозное лечение было сообщено как участников, которые показали, и тех, кто не показывают каких-либо чрезмерное кровотечение. Таким образом, после операции чрезмерное кровотечение которые мы наблюдали в рамках нынешнего исследования нельзя отнести условия предыдущей хронических заболеваний и/или предыдущих хронических медикаментозное лечение. В этом свете распространенность этого побочного эффекта может отличаться, если техника применяется для клинического населения.
Важнейшим шагом при биопсии предлагаемого хирургические жировой ткани является обеспечение местной анестезии перед разрез, который предотвращает любой боли и дискомфорт в участника. Кроме того необходимо сделать предварительный отбор аллергических истории для анестезии для профилактики аллергических осложнений во время анестезии инъекции. Кроме того важно обеспечить гемостаз, прежде чем разрез закрыт для предотвращения послеоперационного кровотечения, хотя важно держать в контакте с участниками в течение нескольких дней после того, как процедура выполняется до полного заживления достигается обнаружить любые потенциальные нарушения и для предотвращения инфекции и/или случаев послеоперационного кровотечения.
Ограничения метода предлагаемого биопсии включают в себя дискомфорт, что области разреза может привести к участникам, особенно касающиеся их способность спокойно сесть и принять душ, вплоть до полного заживления. Участникам следует поручить избежать мытье области разреза по предотвращению инфекции, а также заменить клей стерильные марлевые над районом разрез каждый день вплоть до полного заживления. Эта ежедневная процедура может вызвать дискомфорт. Наконец важно отметить, что наша цель состояла в том, для внедрения и стандартизировать новую технику. В этом свете мы не использовали управления группы обязательство на основе иглы подкожного жира биопсии с целью количественного определения различий между этот метод и метод non диатермия недавно представил.
Как ранее предложил4,7,8предлагаемый Хирургическая биопсия технику могут предлагать образцы тканей с высоким целостности, чем метод на основе иглы. Действительно используя эту технику, мы были в состоянии выполнять мРНК и анализы белка на полученные ткани и, Кроме того, в форме парафин кубов для использования в гистологический анализ. Кроме того мы предлагаем, избегая диатермия в хирургической подкожной жировой клетчатки биопсий, учитывая, что гемостаза и нормальный исцеление может быть достигнуто с нашей техникой.
В заключение наши стандартизированные подкожной жировой ткани брюшной Хирургическая биопсия, с помощью метода non диатермия может безопасно выполняться в здоровых мужчин в постели, с минимальными побочными эффектами.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы заявляют, что они не имеют никаких финансовых интересов.
Acknowledgments
Эта работа получила финансирование от Европейского союза Horizon 2020 (Грант соглашение № 645710) и 7-й Рамочной программы (Грант соглашений № 612547 и 319010). Авторы хотели бы поблагодарить д -ра Fotini Sourli-Chasioti за помощь с процедура биопсии. Также Авторы благодарят г-н Yiorgos Paterakis за его ценную помощь в подготовке видео.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Disinfected surgical field | Hartmann | 23516-00 | |
| Stainless Steel Instrument Stands (surgical Mayo) | Medical Device Depot Inc. | 32000 | |
| Operating Scissors straight 15 cm | Karl Storz | 791903 | |
| Scalpel No 11 | Swann-Morton | 203 | Bipolar, catalog number 429011 |
| Scarpel handle No 3 | Karl Storz | 488090 | |
| Scissors curved 14 cm | Karl Storz | 511514, 752918 | |
| Mosquito forceps | Karl Storz | 535012 | |
| Tweezers Kocher | Karl Storz | 530416 | Bipolar, catalog number 830316 |
| Surgical tweezers | Karl Storz | 793216 | Bipolar, catalog number 831016 |
| Povidone-iodine | Various | Not applicable | |
| Suture 4.0 Vicryl | Johnsons | V4970H | |
| Scissors straight 11 cm | Karl Storz | 512511 DS | |
| Needle holder 15 cm | Karl Storz | 515515 | Bipolar, catalog number 213015 |
| Sterile gauzes | Hartmann | 3021 | |
| Αdhesive sterile gauze | Digas medical equipment | 2889 | |
| 10 mL syringe with disinfected needle | Alpha medical solutions | 10310-55-0010 | |
| 2%-xylocaine (no adrenaline) | Various | Not applicable | |
| Sterile surgical gloves | Sempermed | 10001 | |
| Eppendorf tubes | Kartell | 16283 | |
| 10% formalin | Alpha medical solutions | 11016-30-2909 | |
| Tubes 120 mL | Digas medical equipment | 9025 | |
| Liquid nitrogen at -190°C | Revival | Not applicable |
References
- Bruening, W., et al. Systematic review: comparative effectiveness of core-needle and open surgical biopsy to diagnose breast lesions. Ann Intern Med. 152, 238-246 (2010).
- Beynen, A. C., Katan, M. B. Rapid sampling and long-term storage of subcutaneous adipose-tissue biopsies for determination of fatty acid composition. Am J Clin Nutr. 42, 317-322 (1985).
- Wang, Y., et al. Muscle and adipose tissue biopsy in older adults with type 2 diabetes . J Diabetes Mellitus. 1, 27-35 (2011).
- Mutch, D. M., et al. Needle and surgical biopsy techniques differentially affect adipose tissue gene expression profiles. Am J Clin Nutr. 89, 51-57 (2009).
- Ikeda, S., Sekijima, Y., Tojo, K., Koyama, J. Diagnostic value of abdominal wall fat pad biopsy in senile systemic amyloidosis. Amyloid. 18, 211-215 (2011).
- Alderete, T. L., et al. A novel biopsy method to increase yield of subcutaneous abdominal adipose tissue. Int J Obes. 39, 183-186 (2015).
- Padoin, A. V., et al. A comparison of wedge and needle hepatic biopsy in open bariatric surgery. Obes Surg. 16, 178-182 (2006).
- Kral, J. G., et al. Effects of surgical treatment of the metabolic syndrome on liver fibrosis and cirrhosis. Surgery. 135, 48-58 (2004).
- Fitzgerald, J. E., Malik, M., Ahmed, I. A single-blind controlled study of electrocautery and ultrasonic scalpel smoke plumes in laparoscopic surgery. Surg Endosc. 26, 337-342 (2012).
- Memon, M. Surgical Diathermy. Br J Hosp Med. 52, (1994).
- Tomita, Y., et al. Mutagenecity of smoke condensates induced by CO-laser irradiation and electrocauterization. Mutat Res. 89, 145-149 (1989).
- Brandon, H., Young, L. Characterisation and removal of electrosurgical smoke. Surg Serv Manag. 3, 14-16 (1997).
- Attner, P., Hemlin, C., Soderman, A. C. Ligasure versus diathermy scissors tonsillectomy: A controlled randomized study. Acta Otolaryngol. 130, 1180-1184 (2010).
- Ecker, T., Carvalho, A. L., Choe, J. H., Walosek, G., Preuss, K. J. Hemostasis in thyroid surgery: harmonic scalpel versus other techniques--a meta-analysis. Otolaryngol Head Neck Surg. 143, 17-25 (2010).
- Campbell, K. L., et al. A pilot study of sampling subcutaneous adipose tissue to examine biomarkers of cancer risk. Cancer Prev Res. 2, 37-42 (2009).
- Jamurtas, A. Z., et al. The effects of a single bout of exercise on resting energy expenditure and respiratory exchange ratio. Eur J Appl Physiol. 92, 393-398 (2004).
- Adriaens, P. E. M., Schoffelen, F. M. P., Westerterp, K. R. Intra-individual variation of basal metabolic rate and the influence of daily habitual physical activity before testing. Brit J Nutri. 90, 419-423 (2003).
- Latham, J. L., Martin, S. N. Infiltrative anesthesia in office practice. Am Fam Phys. 89, 956-962 (2014).
- Jurevic, R., et al. Plasma levels of 2% lidocaine with 1:100,000 epinephrine with young children undergoing dental procedures. Anesth Prog. 45, 87-90 (1998).
- Kale, S. S., Yende, S. Effects of Aging on Inflammation and Hemostasis through the Continuum of Critical Illness. Aging Dis. 2, 501-511 (2011).
