L’évaluation précise de la réponse de la douleur chez un modèle animal neuropathique est critique pour étudier la physiopathologie des maladies de douleur et élaborer de nouveaux analgésiques. Nous présentons une méthode sensible et objective pour déterminer la fonction sensorielle du rongeur hind patte par un système d’analyse automatisée de démarche.
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Article de méthode
Analyse automatisée Gait chez la souris avec la blessure de Constriction chronique
Dans cet article
Résumé
Résumé
Le critère de von Frey est une méthode classique qui a été largement utilisée pour examiner la fonction sensorielle des animaux de la douleur neuropathique. Toutefois, il a quelques inconvénients tels que les données subjectives et l’exigence d’un expérimentateur habile et expérimenté. A ce jour, diverses modifications ont amélioré la méthode de von Frey, mais il a encore quelques limitations. Des rapports récents ont suggéré que l’analyse de la démarche produit des données plus précises et objectives des animaux neuropathiques. Ce protocole montre comment effectuer l’analyse automatisée de démarche pour déterminer le degré de la douleur neuropathique chez la souris. Après plusieurs jours d’acclimatation, les souris étaient autorisés à circuler librement sur le plancher de verre pour éclairer les empreintes. Puis, quantification de l’empreinte et la démarche ont été effectuées par le biais de clips vidéo avec analyse automatique des différents paramètres de marche, tels que la zone de temps patte pour l’impression, swing, angle de patte, etc.
L’objectif principal de cette étude est de décrire la méthodologie de l’analyse de la démarche automatisée et brièvement le comparer avec les données de l’essai sensoriel classique à l’aide de filaments de von Frey.
Introduction
Les changements pathologiques du système nerveux induite par un dysfonctionnement métabolique, inflammation, infection, traumatisme, ischémie, ou maladie auto-immune occasionnellement entraîner des douleurs neuropathiques, qui sont définie comme une douleur résultant en conséquence directe d’une lésion ou maladie affectant le système somatosensoriel1. La douleur neuropathique est souvent insupportable, et malheureusement, analgésiques classiques ne produisent généralement pas suffisamment la douleur soulagement2. Une caractéristique importante de la douleur neuropathique contient spontanées et induite par la stimulation ....
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Protocole
toutes les expériences ont été menées conformément à l’éthique professionnelle de l’Association internationale pour l’étude de la douleur et ont été approuvés par le Comité de l’emploi et d’animalier institutionnel à l’Université nationale de Chungnam ( Daejeon, Corée du Sud).
1. induction de la CCI sur le nerf sciatique
- maison ICR des souris mâles pesant 20-25 g sous un cycle lumière/obscurité de 12 h à température ambiante contrôlée (maintenue à 20-25 ° C) et humidité (40-60 %), avec libre accès à la nourriture et eau. Permettre une période d’acclimatation pour les souris dans la salle de soins aux animaux d’au moins 1....
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Résultats
Nous avons effectué le test de von Frey et automatisée d’analyse de la démarche chez les souris de la CCI jusqu'à 10 jours après l’intervention de la CCI. Pour l’analyse statistique, les mesures répétées des deux voies analyse de variance (ANOVA) détermine les effets globaux, et analyse post-hoc de Dunnett a été réalisée pour déterminer la valeur de p parmi les groupes expérimentaux.
Les résultats présentés dans la
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Discussion
Actuellement, mesure d’allodynie mécanique à l’aide de filaments de von Frey est le plus couramment méthode dans des modèles animaux de douleur pour démontrer une hypersensibilité tactile. Des modèles animaux pour les douleurs neuropathiques ont continué à être développé, la méthodologie d’évaluation de la fonction sensorielle a été également améliorée8,9,10,15. Dans ces rapports, il a été sugg.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Remerciements
Cette recherche a été financée par Chungnam National University, Corée Institut de la médecine orientale (KIOM) et une subvention de la Corée Health Technology R & D projet à travers la Corée santé Industrie développement Institut (KHIDI), financé par le ministère de la santé & Bien-être, République de Corée (numéro de licence : HI15C0007).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| 0,9 % Saline | JW Pharmaceutique | N/A | Véhicule pour médicaments |
| Seringue 1ml | BD Plastipak | 300013 | Dispositif d’injection |
| 2, 2, 2-tribromoéthanol (pureté de 97 %) | Sigma | T48402 | Anesthésique |
| 2-méthyl-2-buthanol (pureté de 99 %) | Sigma | 152463 | Solvant pour 2, 2, 2-tribromoéthanol |
| Catwalk Système automatisé d’analyse de la marche | Noldus | N/A | Logiciel d’analyse automatique de la démarche aniaml |
| Catgut chromique (épaisseur 4-0) | AILEE | C442 | Ligature pour faire une lésion de constriction chronique sur le nerf sciatique |
| Gabapentine | Sigma | Y0001280 | Analgeisc, Utilisé comme médicament de contrôle positif dans cette étude |
| Graefe Forceps | F.S.T | 11051-10 | Instrument chirurgical |
| Coussin chauffant | DAESHIN ELECTRONICS | M-303AT | Régulation de la température corporelle |
| ICR Souris | Samtaco | N/A | Animal de laboratoire |
| Mersilk (épaisseur 3-0) | ETHICON | W598H | Matériau de suture pour la fermeture chirurgicale de la peau |
| Micro-Mosquito | F.S.T | 13010-12 | Instrument chirurgical |
| Micro-ciseaux | F.S.T | 14090-09 | Chirurgical instrument |
| Porte-aiguille | F.S.T | 12002-12 | Instrument chirurgical |
| Povidone Iodine | Firson | N/A | Désinfectant pour prévenir les infections après une intervention chirurgicale |
| Lame de scalpel | F.S.T | 10010-00 (#10) | Instrument chirurgical pour faire une incision |
| Manche de scalpel | F.S.T | 10003-12 (#3) | Instrument chirurgical pour faire une incision |
| Filaments Von-Frey | North Coast | NC12775-99 | Appareil de mesure pour tester la fonction sensorielle pour la stimulation mécanique |
Références
- Loeser, J. D., Treede, R. D. The Kyoto protocol of IASP Basic Pain Terminology. Pain. 137 (3), 473-477 (2008).
- Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002(2017).
- Vranken, J. H. Mechanisms and treatment of neuro....
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Réimpressions et autorisations
