Summary
ويصف هذا البروتوكول طريقة بسيطة لتسجيل متزامنة شارك المترجمة المخ (EEG) ومتعدد الصفحي الميدانية المحلية المحتملة في الفئران أنيسثيتيزيد. ويرد لدغ ثقب حفر في الجمجمة بإدراج ميكروليكترودي لإنتاج التشويه لا تذكر من إشارة EEG.
Abstract
على الرغم من أن المخ (EEG) يستخدم على نطاق واسع كأسلوب غير الغازية لتسجيل الأنشطة العصبية للدماغ، أن فهمنا للخلايا EEG ما زال محدودا جداً. يمكن أن توفر الإمكانات الميدانية المحلية (لفبس) سجلت عن طريق ميكروليكترودي متعدد الصفحي عرضاً أكثر تفصيلاً للنشاط العصبي متزامنة عبر مختلف الطبقات القشرية في اللحاء الجديد، ولكن هذه التقنية الغازية. الجمع بين القياسات EEG وطابعات الحجم الكبير في نموذج ما قبل سريرية يمكن إلى حد كبير تعزيز فهم الآليات العصبية التي تشارك في توليد إشارات EEG، وتيسير اشتقاق نموذج رياضي أكثر واقعية ودقيقة بيولوجيا للتخطيط الدماغي. ويرد هنا إجراء بسيط للحصول على التخطيط الدماغي المتزامنة وشارك المترجمة ومتعدد الصفحي إشارات طابعات الحجم الكبير في مكافحة القوارض أنيسثيتيزيد. نحن التحقيق أيضا في ما إذا كانت إشارات EEG كانت تأثرا كبيرا لدغ ثقب حفر في الجمجمة للإدراج من ميكروليكترودي. نتائجنا تشير إلى أن ثقب لدغ له تأثير ضئيل على تسجيلات التخطيط الدماغي.
Introduction
من المقبول عموما أن لفبس سجلت عن طريق ميكرويليكتروديس في المقام الأول يعكس المجموع المرجح لأنشطة السكان المحليين العصبية الهرمية1،،من23 متشابك متزامنة ضادات والمثبطة , 4-أن البحوث التي أجريت مؤخرا أثبتت أنه يمكن فصل التشكيل الجانبي للإشارة طابعات الحجم الكبير إلى عناصر الإثارة وتثبيط5،6. ومع ذلك، كما طابعات الحجم الكبير يقاس عادة عن طريق إجراء جائر، هو لا يناسب لمعظم الدراسات للدماغ البشري.
من ناحية أخرى، التخطيط الدماغي أسلوب غير الغازية لقياس النشاط الكهربائي للمخ. ويستخدم على نطاق واسع كأداة تشخيصية لأنواع معينة من الأمراض العصبية مثل الصرع، وكأداة لبحث في الدراسات المعرفية البشرية. على الرغم من شعبيتها، قيداً رئيسيا من التخطيط الدماغي هو عدم القدرة على تفسير ما الملامح الزمنية تحديداً من حيث الكامنة وراء الإشارات العصبية7،،من89.
متزايدة، يتم وضع النماذج الرياضية للتخطيط الدماغي لتعزيز فهم الدماغ الدالة10،11،12،13،،من1415. معظم النماذج EEG القائمة هي وضعت استناداً إلى تركيب التردد المجال خصائص النموذج تنبأ الإخراج إلى نطاق بيانات التخطيط الدماغي أثناء النشاط العفوي، ونماذج التخطيط الدماغي قليلة جداً يمكن أن تولد إمكانات مقولة حسية واقعية. وفي هذا السياق، ستوفر المتزامنة تسجيلات التخطيط الدماغي وطابعات الحجم الكبير فكرة هامة والقيود لتطوير نماذج حسابية أكثر دقة من التخطيط الدماغي.
لمعالجة هذه الحاجة للتسجيلات المتزامنة لمواصلة استكشاف أصل العصبية EEG، قمنا بتطوير منهجية لتسجيل EEG ومتعدد الصفحي طابعات الحجم الكبير إشارات في وقت واحد في اللحاء الجديد الفئران أنيسثيتيزيد. يشبه الإعداد لدراسات التخطيط الدماغي/طابعات الحجم الكبير المتزامنة السابقة التي أجريت في الرئيسات16،17. نحن مزيدا من التحقيق أثر حفرة لدغ حفرت في الجمجمة في تسجيلات التخطيط الدماغي المحيطة بالحفرة، بمقارنة ثنائية تسجيلات التخطيط الدماغي (أي، واحد نصف الكرة الأرضية مع وجود ثقب لدغ، الكرة أخرى سليمة) في غياب الحسية التحفيز. وتبين النتائج التي توصلنا إليها أن المتزامنة تسجيلات التخطيط الدماغي/طابعات الحجم الكبير يمكن أن يجري ببساطة وفعالية، مع تشويه إشارة EEG قليلاً من لدغ ثقب في الجمجمة.
Protocol
جميع التجارب التي كانت تنفذ وفقا للنظام الأساسي "وزارة الداخلية البريطانية" (قانون الحيوانات (إجراءات علمية)، لعام 1986) وأقرته "لجنة أخلاقيات البحوث" في جامعة ريدينغ، المملكة المتحدة.
1-إعداد الحيوان
ملاحظة: استخدمت الفئران الإناث "يستر مقنعين" لجميع التجارب. هذا إجراء غير البقاء على قيد الحياة.
- تسجيل الوزن في الفئران على نطاق مختبر.
- تخدير الفئران في غرفة مع إيسوفلوراني 5% ومعدل تدفق الأوكسجين 1 لتر في الدقيقة.
- ضع الفئران على حامل ستيريوتاكسيك مع منشفة ورقية تحت الجسم والأسنان الراحة عن طريق الشريط لدغة... منشفة ورقية سوف تجعل من السهل إدراج لوحة الحرارة (راجع الخطوة 2، 3) والتقاط أي البراز من الفئران خلال التجربة.
- إدارة إيسوفلوراني باستمرار عن طريق مخروط الآنف الصلب والبلاستيك التي شنت على المشبك الآنف لمحول الفئران بتركيز 3% بمعدل 0.5 لتر/دقيقة الاتصال المخروط إلى نظام مخدر isoflurane حيوانات صغيرة تدفق الأوكسجين.
2-الجراحة
- إدراج وسادة تدفئة ترموستاتي تحتها منشفة ورقية هو يستريح عليها الفئران وتأمين الرأس في الفئران مع اثنين من قضبان الإذن ورصد درجة حرارة الجسم باستخدام مقياس حرارة المستقيم.
- حلق الجزء العلوي من الرأس للفئران.
- تطبيق مرهم العيون إلى العيون لمنع تجفيف القرنية.
- قبل تعريض الجمجمة، ضع قطرات ليدوكائين لفروة الرأس وتدليك ذلك بلطف في الجلد.
- جعل شق خط الوسط لحوالي 2-3 سم في فروة الرأس باستخدام مشرط لفضح سطح الجمجمة.
- عناية منفصلة في temporalis العضلات كونترا الجانبية للوحة الخط الطولي لحفز من الجمجمة باستخدام قشارة جاكقويتي وزوج من ملقط تشريح مسنن ومنحني. تنظيف الجمجمة مع مسحات القطن كلما اقتضى الأمر ذلك.
- استخدام حرير مزين، خياطة غير الامتصاص، ربط العضلات المنفصلة لفروة الرأس مع عقده ضيقة والتعادل ثم خياطة بشكل أمن إلى الإطار ستيريوتاكسيك18.
- استخدام الإحداثيات ستيريوتاكسيك لتحديد موقع قشرة البرميل، والذيلية إلى بريجما 2.5 مم و 6 مم الأفقي لخط الوسط19. رسم نقطة في الموقع لقشرة سوماتوسينسوري باستخدام قلم رصاص أو علامة.
-
حفر حفرة لدغ في الموقع ملحوظة باستخدام حفر أسنان. للحيلولة دون ارتفاع درجة الحرارة أثناء الحفر الجمجمة، تطبيق عقيمة المالحة (كلوريد الصوديوم 0.9%) إلى مساحة العمل كل 10-15 ثانية. عملية الحفر يتضمن الخطوات الثلاث التالية:
- حفر حفرة قطرها < 2 مم في الجمجمة استخدام بت حفر #4 (0.055 في القطر). الحرص على عدم حفر في بلده دوراً.
- رقيقة أسفل حفرة للشفافية باستخدام مثقاب #1/4 (0,019 في القطر).
- استخدام إبرة ز 27 إلى بيرس دوراً للسماح بإدراج ميكروليكترودي.
- نقل الفئران، المضمونة في إطار ستيريوتاكسيك، وإلى قفص فاراداي محمولة على رأس محطة عزل الاهتزازات.
- إرفاق المشبك استشعار التاكسج متصل بوحدة تحكم التاكسج إلى مخلب في الفئران هند مراقبة باستمرار من المعلمات الفسيولوجية التالية: معدل ضربات القلب ومعدل التنفس، وتشبع الأكسجين الشرياني، انتفاخ النبض والتنفس انتفاخ. تم عرض هذه المعلمات بشكل مستمر على شاشة كمبيوتر، مما يعكس الحالة الفسيولوجية وعمق التخدير من الفئران.
- استبدال مخروط الآنف الصلب والبلاستيك لإدارة إيسوفلوراني والمشبك الآنف لمحول الفئران مع استراحة ميكروفليكس مزودة بمخروط الآنف ناعمة شفافة وتعديل (الشكل 1A) للسماح بتنشيط الخط الطولي سهلة إلى جانب واحد الخط الطولي لوحة دون المساس بالإدارة إيسوفلوراني.
- إدراج قطبين حفز الفولاذ المقاوم للصدأ إلى لوحة الخط الطولي في كشفها بواسطة الخفض التدريجي على مخروط الآنف.
- قم بتوصيل أقطاب كهربائية محفزة مشجعا الحالية معزولة.
- رفع الجلد من خط الوسط للرقبة بالملقط وجعل من 1 ~ شق 2 سم مع مقص جاهزة لوضع أقطاب المرجعية. الحرص على عدم قطع أنسجة العضلات.
3-شارك المترجمة EEG/طابعات الحجم الكبير الإعداد
- نظيفة وجافة الجمجمة المحيطة بحفرة لدغ استخدام مسحه القطن.
- بدقة مكان لصق التخطيط الدماغي موصلة على أحد جانبي مسطحة القطب العنكبوت EEG. ترك حفرة صغيرة واضحة للصق التخطيط الدماغي على مسرى العنكبوت للسماح لمن ميكروليكترودي متعددة الصفحي لتمرير من خلال الثقب دون الاتصال اللصق ومسرى العنكبوت. وهذا ما يمنع الاتصال الكهربائية بين التخطيط الدماغي الكهربائي وميكروليكترودي.
- محاذاة مسرى العنكبوت للدغ ثقب في الجمجمة، مع لصق التخطيط الدماغي يواجه الجمجمة.
- اضغط مسرى العنكبوت على الجمجمة، مما يجعل الاتصال الثابت مع الجمجمة عن طريق لصق التخطيط الدماغي بعناية. قم بإزالة أي لصق التعتيم لدغ حفرة باستخدام إبرة في المحاقن.
- إزالة لصق التخطيط الدماغي المفرط خارج محيط القطب العنكبوت حيث أن الاتصال بين مسرى العنكبوت والجمجمة مكانياً مقيدة بحجم القطب (الشكل 1B).
رقم 1: الإعداد العام لتسجيل EEG/طابعات الحجم الكبير المتزامنة. (أ) الإعداد يتكون من مخروط الآنف معدلة تيسيرا لتنشيط لوحة الخط الطولي تحت التخدير إيسوفلوراني، قطبين تحفيز إدراج الخط الطولي لوح، مسرى عنكبوت المتمركزة في الجمجمة أعلاه البرميل اللحاء كونترا الجانبية ل أقطاب كهربائية محفزة، ميكروليكترودي متعدد القنوات إدراجها في قشرة البرميل عبر القطب العنكبوت، واقطاب المرجعية توضع داخل شق في الجزء الخلفي من الرقبة للفئران. (ب) عرض عن طريق المجهر القطب العنكبوت المتمركزة بشكل أمن على الجمجمة بلصق التخطيط الدماغي. يتم إدراج ميكروليكترودي في حفرة لدغ حفرت في الجمجمة تحت مسرى العنكبوت. ويقام فروة الرأس مرة أخرى بالخيط الجراحي (خياطة) مرتبطة بالإطار ستيريوتاكسيك. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
- تشويه لصق التخطيط الدماغي على مسرى مرجع للتخطيط الدماغي ووضعه بشكل أمن داخل الشق في الجزء الخلفي من الرقبة للفئران.
- قم بتوصيل أقطاب EEG المضخم عبر مقسم إشارة سلبية لإشارات معاوقة منخفضة (الشكل 2). تأكد من وجود مقاومة القطب العنكبوت أدناه 5 kΩ. إذا لم يكن كذلك، تحقق أن لصق التخطيط الدماغي في اتصال جيدة مع الجمجمة ومسرى بقوة ضغط للصق التخطيط الدماغي. إضافة مزيد من لصق التخطيط الدماغي إذا لزم الأمر.
- جبل ذراع ميكرومانيبولاتور على الإطار ستيريوتاكسيك. الاتصال ميكروليكترودي 16-قناة خطية (100 ميكرومتر التباعد، المجال لكل موقع ميكرومتر 1772) هيدستاجي حادة 16-قناة قص بشكل أمن على الذراع ميكرومانيبولاتور.
- EEG اللطاخة لصقها على أقطاب مرجعية للتخطيط الدماغي وميكروليكترودي، ثم وضعها بشكل أمن داخل الشق (الشكل 1A).
- ضبط زاوية الذراع ميكرومانيبولاتور حيث ميكروليكترودي عمودي على السطح القشرية. هذه الزاوية عادة بين 25-35 درجة مئوية.
- تخفيض ميكروليكترودي تحت مجهر بتحول المقابض ميكرومانيبولاتور حيث أن غيض ميكروليكترودي تهدف إلى فتح صغيرة في الجزء السفلي من الحفرة لدغ حتى القطب العلوي فقط تخترق سطح القشرية. ويجب الحرص على تجنب فرض ميكروليكترودي على السطح لدورا كهذا من شأنه كسر مسرى.
- زوجين ميكروليكترودي 16-قناة المضخم متصل بوحدة اقتناء بيانات عبر كابل ألياف بصرية (الشكل 2).
- قم بتشغيل المضخم ووحدة اقتناء البيانات والكمبيوتر متصل إلى الوحدة. تشغيل مربع مشجعا.
- إدراج ميكرويليكترودي عادة إلى السطح القشرية ببطء تحول محور ع مقبض الباب من ميكرومانيبولاتور إلى عمق 1,500 مكم20.
- الصغير-ضبط العمق تطبيق قطار للتحفيز على لوحة الخط الطولي ومراقبة طابعات مقولة الحجم الكبير 16-قناة على جهاز كمبيوتر باستخدام البرمجيات لوحدة اقتناء البيانات المثبتة على جهاز الكمبيوتر. عناية أدر محور ع على ميكرومانيبولاتور حتى يحدث السعة أعلى من طابعات الحجم الكبير أحدثت حول قناة 7 (كما يتفق ذلك مع الطبقة الرابعة في القشرة).
ملاحظة: التخطيط الدماغي الجانبية علوم القطب الإعداد: لبعض التجارب، ووضعت مسرى عنكبوت ثاني الجانب إشارتكم الجانبية للجمجمة سليمة أعلاه قشرة البرميل. يسمح هذا الإعداد الثنائية EEG تسجيل خلال الدولة يستريح للتحقيق في تأثير لدغ حفرة على إشارة EEG.
ملاحظة: العملية الجراحية لإعداد التخطيط الدماغي الكهربائي مماثلة لتلك المذكورة أعلاه، فيما عدا أنه خلال الخطوة 2.6، والعضلات تيمبوراليس على كل جانب من الرأس بعناية فصلها من الجمجمة وخياطة مرة أخرى ومرتبطة بشكل أمن إلى الجانب المقابل من الإطار ستيريوتاكسيك.
ملاحظة: إعداد التخطيط الدماغي/طابعات الحجم الكبير المتزامنة أيضا مماثلة لتلك المذكورة أعلاه، مع خطوة إضافية أن قطب عنكبوت ثانية محملة بلصق التخطيط الدماغي، ثم ضغط بشدة في الجمجمة فوق قشرة إشارتكم الجانبية للبرميل.
رقم 2. رسم تخطيطي لتدفق إشارات. ويوضع داخل قفص فاراداي الفئران. أقطاب كهربائية محفزة تتلقى أوامر من مربع مشجعا يسيطر عليها "الوحدة الحصول على البيانات" من خلال البرامج الخاصة به المثبتة على جهاز كمبيوتر. ويحال إلى ما قبل مكبر للصوت داخل قفص فاراداي إشارة العصبية التي سجلتها في ميكروليكترودي. الإشارات العصبية سجلتها المسبار EEG يحال إلى ما قبل مكبر للصوت من خلال تقسيم إشارة. مكبر للصوت قبل متصل "وحدة اقتناء البيانات" خارج قفص فاراداي عبر كابلات ألياف بصرية. ثم يتم تخزين البيانات العصبية على محرك أقراص محلي على جهاز الكمبيوتر، بينما يمكن أيضا عرضها على شاشة كمبيوتر. وتدير نظام المحمول isoflurane حيوانات صغيرة إيسوفلوراني من خارج قفص فاراداي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
4-الكهربائية التحفيز وتسجيلات العصبية
ملاحظة: هو تكرار أخذ العينات لجميع البيانات العصبية 24.41 كيلو هرتز مع القرار 16 بت. محاكمة يتكون من حفز كهربائي واحد في البداية المحاكمة. كل المحاكمات تدوم 10 ق، الذي هو أيضا من الفاصل الزمني بين التحفيز (ISI). كل الحافز نبضة مربعة الحالية 1.2 mA دائم السيدة 0.3 للتجارب الثنائية لدراسة تأثير لدغ حفرة، المستمر يستريح الدولة من 250 s يتم تسجيلها أيضا.
- فتح برنامج التسجيل على الكمبيوتر قيد الاستخدام.
- تحميل الدائرة الصحيحة للتجربة عن طريق تحديد '"تحميل المشروع"...' من القائمة المنسدلة من 'أوبينبروجيكت'. سوف تظهر نافذة جديدة (منضدة) (الشكل 3).
الشكل 3. عرض للبرنامج واجهة المستخدم الرسومية ل Unit. اقتناء البيانات أنها تسمح الدائرة المناسبة تحميلها وتحفيز المعلمات تعيين البيانات المسجلة وتصور. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
-
إنشاء دليل جديد (يسمى 'خزان' بالبرنامج) لتخزين التسجيلات العصبية.
- انقر فوق 'ملف' من الجزء العلوي من الإطار، ثم حدد '"إدارة البيانات المهمة"'. سوف تظهر نافذة جديدة ('"إدارة خزان"').
- في إطار '"إدارة خزان"'، اضغط على الزر الأيمن للماوس لعرض قائمة. حدد 'إنشاء خزان جديد'. سوف تظهر نافذة جديدة أخرى ('"إنشاء البيانات دبابة"').
- في إطار '"إنشاء خزان البيانات"'، حدد المسار حيث كنت تخطط لإنشاء دليل بيانات جديدة، وقم بإدخال اسم الدليل الجديد. ثم اضغط 'موافق'. وسوف تختفي هذه النافذة.
- الدليل الجديد سوف تظهر في نافذة '"إدارة خزان"' ولكن باللون الرمادي. تسجيل هذا الدليل عن طريق النقر بالزر الأيمن على ذلك، وحدد '"سجل دبابة"' من القائمة المنسدلة. ستظهر نجمة حمراء وسهم أخضر على يمين اسم الدليل الجديد الذي الآن في الأسود (الشكل 4).
- إلغاء تسجيل أي الدلائل السابقة ليس في استخدام بزر الماوس الأيمن في الإطار '"إدارة خزان"' وتحديد 'تحديث' "دبابة قائمة" في القائمة المنسدلة.
- انقر فوق 'موافق' للخروج من الإطار '"إدارة خزان"'.
الشكل 4: عرض للبرنامج واجهة المستخدم الرسومية عرض دليل بيانات مسجلة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
-
سجل الدليل الجديد في 'النطاق' لعرض الإشارات العصبية من خلال التجربة.
- انقر فوق الرمز 'النطاق' في إطار 'أوبينبروجيكت'. سوف تظهر نافذة جديدة ('النطاق').
- الحق فوق الماوس في نافذة 'النطاق' وحدد 'تحديث' "دبابة قائمة" في القائمة المنسدلة. سوف يظهر اسم الدليل الجديد في الرمادي.
- انقر فوق الدليل الجديد. ستظهر نجمة حمراء وسهم أخضر على يمين اسم الدليل الجديد الذي الآن في الأسود.
- إعداد المعلمات التجريبية للحصول على البيانات في إطار 'منضدة' عن طريق النقر على 'الإعداد' من الجزء العلوي من النافذة. سوف تظهر نافذة جديدة. حدد 'اكتساح حلقة'، قم بتعيين طول المحاكمة وعدد المحاكمات التي سيتم تسجيلها.
- تحقق من أن يتم تشغيل "مربع مشجعا".
- اضغط على زر 'تسجيل' في إطار 'طاولة العمل'. سوف تظهر نافذة جديدة. قم بإدخال اسم ملف البيانات تريد حفظ للتجريبية تشغيل ولكن لا تضغط على زر العودة في هذه المرحلة، كمعلمات ضرورة إعداد تسجيل EEG.
-
قم بإعداد المعلمات تسجيل EEG باستخدام واجهة المستخدم الرسومية (GUI) في مرحلة ما قبل مكبر للصوت. لمس الشاشة (في أي مكان) من المضخم تستيقظ الشاشة. حدد 'إلغاء' لفتح شاشة العرض (الشكل 5).
- اضغط على أيقونة اليسار في 2: التخطيط الدماغي ' الفريق. سوف تظهر شاشة جديدة.
- اضغط 'اقتران' وتحديد 'التدقيق'.
- اضغط على '"وضع المرجع"' وتحديد 'المحلية'.
- اضغط '"معدل عصيدة"' وحدد 25 كيلو هرتز '.
- اضغط 'موافق' للعودة إلى العرض الأصلي.
رقم 5: "واجهة المستخدم الرسومية" في مكبر للصوت قبل. وهو يسمح EEG تسجيل المعلمات (مثلاً، تردد أخذ العينات وتفضيل المراجع) تعيين. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
- فحص المقاومة EEG probe(s) بالضغط على الرمز الأوسط 2: التخطيط الدماغي ' الفريق. إذا كانت مرتفعة للغاية، إضافة أكثر من لصق التخطيط الدماغي للتحقيق. اضغط 'موافق' للعودة إلى العرض الأصلي.
- الانتظار 20 ثانية لتجنب تسجيل تقلب الأولى من تسجيلات التخطيط الدماغي.
- العودة إلى شاشة الكمبيوتر (بعد الانتظار 20 ثانية) واضغط المفتاح 'إرجاع' على لوحة المفاتيح. وسيتم تسجيل إشارات طابعات الحجم الكبير وفي التخطيط الدماغي.
5-بيانات التحليل
-
قبل عملية الإشارات طابعات الحجم الكبير والتخطيط الدماغي مقولة على أساس المحاكمة قبل المحاكمة باستخدام الخطوات التالية.
- التحول مرة أخرى البيانات العصبية في الوقت المناسب قبل 20 عينات (ما يعادل 0.82 ms). وهذا التأخير التي تنتجها الدارة المستخدمة لجمع البيانات العصبية في TDT نفسها. بتحويل البيانات، يتم محاذاة نقطة الساعة الصفر لبدء التحفيز.
- إزالة قطعة أثرية التحفيز باستبدال البيانات العصبية من 0 إلى 1 مللي ثانية مع خط مستقيم يربط بين البيانات نقطة مللي مع نقطة البيانات في 1 مللي ثانية.
- الصفر يعني كل محاكمة بطرح متوسط قيمة الإشارة العصبية 200 مللي ثانية قبل بداية التحفيز.
- تصفية المنخفضة تمرير البيانات أدناه 800 هرتز باستخدام أمرال 4 أي أي آر بتروورث نوع عامل التصفية في كلا الاتجاهين لتجنب إدخال أي تحول الزمانية في البيانات.
- محاذاة البيانات متعددة الصفحي عبر الحيوانات. لطابعات الحجم الكبير البيانات كل الحيوانات، تطبيق معكوس "الكثافة المصدر الحالية" (المركز الشريحة، مصدر دائرة نصف قطرها R = 0.5 مم) تحليل21 مع عامل تصفية ضبابي (λ = 50 ميكرومتر) بالوعة الرابع لتحديد موقع الطبقة1، التي يرد بها أكبر ذروة السلبية التي تحدث في القشرية العمق تحت السطح بيل خلال أول 15 مللي ثانية لظهور حافز. لجنة التنمية المستدامة، وطابعات الحجم الكبير المقابلة، ثم محاذاة البيانات وفقا لمواقعها بالوعة عبر الحيوانات. يقع الحوض الشائعة في الطبقة الرابعة، ~ 600 ميكرون تحت السطح بيل.
- بعد المحاذاة، استخدام قنوات 2 و 7 و 12 من طابعات الحجم الكبير إعادة تنظيم كممثلين للاستجابات العصبية من سوبراجرانولار، الحبيبية، وطبقات إينفراجرانولار، على التوالي في القشرة للبرميل.
- حساب يعني أثارت طابعات الحجم الكبير والتخطيط الدماغي بحساب متوسط البيانات المجهزة مسبقاً على مدى 100 المحاكمات.
- للتحقيق في تأثير لدغ حفرة على التخطيط الدماغي، أسفل--نموذج التخطيط الدماغي إشارات إلى 1,000 هرتز، وحساب كثافة الطاقة الطيفية (PSD) كونترا الجانبية (مع وجود ثقب في الجمجمة) وعلوم الجانبية (الجمجمة سليمة) العنكبوت القطب التسجيلات على مدى فترة s 250 ليستريح الدولة. مديرية الأمن العام يتم حسابها من 0.1-100 هرتز في Matlab باستخدام الدالة 'بمتم' التي ترتكز على أسلوب مولتيتابير22.
- تقسيم نطاق التردد إلى نطاقات الترددات المعروفة التالية: دلتا (δ): 0.1-4 هرتز، (ثيتا): 4-8 هرتز، ألفا (α): 8-13 هرتز، بيتا (β): 13-31 هرتز، غاما (γ): 31-100 هرتز-حساب متوسط مديرية الأمن العام داخل كل نطاق.
- داخل كل نطاق التردد، حساب الفرق تم تسويتها في مديرية الأمن العام، فيخطئ، بين كونترا-والتخطيط الدماغي إشارتكم الجانبية باستخدام المعادلة:
أين هي فج وفأنا متوسط مديرية الأمن العام من كونترا وعلوم-الجانبي EEG، على التوالي في نطاق التردد للفائدة. - داخل كل نطاق التردد، إجراء اختبار t واحد--نموذج لاختبار الفرضية القائلة بأن هناك أي فرق معتد به (في مستوى الأهمية 0.05) بين مديرية الأمن العام إشارة EEG مسجل من نصفي.
Representative Results
كان متوسط البيانات من الفئران 4 للحصول على سلسلة زمنية يعني عند الاقتضاء. السعة لاستجابة التخطيط الدماغي مقولة، يعرف أيضا باسم الحدث المتصلة بإمكانات (ERP)، عادة أقل بكثير من طابعات الحجم الكبير. ويبين الشكل 6 متوسط نظام تخطيط موارد المؤسسات، وطابعات الحجم الكبير في سوبراجرانولار، الحبيبية، وطبقات إينفراجرانولار من القشرة للبرميل، على التوالي. الفرقة خطأ في كل الأرض هو الخطأ القياسي المطابق. يمكن أن ينظر إلى أن نظام تخطيط موارد المؤسسات حوالي 10 مرات أصغر من مقولة طابعات الحجم الكبير.
رقم 6: يعني (n = 4) الإشارات العصبية لتخطيط موارد المؤسسات، سوبراجرانولار، الحبيبية، وطابعات الحجم الكبير إينفراجرانولار. ويشير الظل إلى الخطأ القياسي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
وترد مقارنات لديناميات الزمانية لتخطيط موارد المؤسسات وطابعات الحجم الكبير في الشكل 7. تراكب مباشرة من نظام تخطيط موارد المؤسسات وسوبراجرانولار طابعات الحجم الكبير في الشكل 7A يوضح ترتيب السعة الاختلافات بين هذين النوعين من الإشارات العصبية. لمقارنة ديناميات الزمانية، يتم تطبيع نظام تخطيط موارد المؤسسات وطابعات الحجم الكبير فيما يتعلق السعة الذروة السلبية. الشكل 7 باء و جيم 7 إظهار فرضه ERP تطبيع مع سوبراجرانولار تطبيع طابعات الحجم الكبير وتطبيع طابعات الحجم الكبير الحبيبية، على التوالي.
فإنه يتبين من الشكل 7B أن قمم P1 و N1 لتخطيط موارد المؤسسات تأخر أكثر من قمم المقابلة من طابعات الحجم الكبير في طبقة سوبراجرانولار. ولكن الملامح الزمنية لهذه الإشارات العصبية اثنين متشابهة، مع P1 السابقة N1. من ناحية أخرى، الشخصية الزمانية لتخطيط موارد المؤسسات تختلف اختلافاً عن أن الحبيبية (الطبقة الرابعة من قشرة البرميل) طابعات الحجم الكبير (الشكل 7). الأهم من ذلك أنها ليست صور مرآة لبعضها البعض، مع طابعات الحجم الكبير الحبيبية تهيمن ذروة سلبي واحد (تعكس بالوعة رئيسية في الطبقة القشرية الرابع)، بينما نظام تخطيط موارد المؤسسات يتكون أساسا من اثنين من قمم مع الأقطاب المتقابلة.
رقم 7: مقارنة بين ديناميات الزمانية لتخطيط موارد المؤسسات وطابعات الحجم الكبير- (أ) نظام تخطيط موارد المؤسسات (خط متصل) فرضه مع سوبراجرانولار طابعات الحجم الكبير (خط متقطع). ويشير الظل إلى الخطأ القياسي. (ب) "تطبيع نظام تخطيط موارد المؤسسات" (خط متصل) فرضه مع تطبيع سوبراجرانولار طابعات الحجم الكبير (خط متقطع). (ج) "تطبيع نظام تخطيط موارد المؤسسات" (خط متصل) فرضه مع طابعات الحجم الكبير الحبيبية تطبيع (خط متقطع). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
وتم قياس إشارة نظام تخطيط موارد المؤسسات عبر قطب عنكبوت وضعها في الجمجمة مع وجود ثقب لدغ حفرت في ذلك. للتحقيق في أثر الحفرة على تسجيلات التخطيط الدماغي، وضعت آخر العنكبوت القطب في الجمجمة سليمة أعلاه قشرة إشارتكم الجانبية للبرميل. وكان الحرص على ضمان أن ممانعات أقطاب العنكبوت اثنين تماثل في حجمها عن طريق ضبط مقدار لصق التخطيط الدماغي المستخدمة. بيانات من الفئران الأربعة (التي كانت لا الفئران نفس المستخدم أعلاه) وترد هنا.
يبين الشكل 8 تسجيلات التخطيط الدماغي الدولة يستريح المتزامنة من أقطاب كلا من فأر واحد، مع 100 s البيانات المعروضة في الشكل 8 أ، والبيانات في إطار مستطيل (20 ق) يتم توسيع في الشكل 8B. إشارات EEG هما إلى حد كبير شارك تختلف داخل مجموعة مماثلة من السعة. ويبين الشكل 9 مديرية الأمن العام الفئران الأربعة، مع الصف العلوي باستخدام مقياس خطي على محور التردد، والصف السفلي باستخدام مقياس لوغاريتمي على المحور التردد إلى تقديم عرض موسع في نطاق التردد أقل. من الرقم 9، هناك لا يبدو أن التحيز متسقة في مديرية الأمن العام عبر المواضيع. وهذا ما أكده إجراء واحد--نموذج تي-الاختبارات على اختلافات طبيعية في مديرية الأمن العام متوسط في نطاقات التردد الخمسة، هو مبين في الشكل 10. أيا من الاختلافات مديرية الأمن العام تم تسويتها في نطاقات التردد هذه لا تختلف كثيرا عن الصفر (p = 0.32 0.46، 0.85، 0.69 و 0.97، على التوالي).
الشكل 8: تسجيلات "التخطيط الدماغي الثنائي". (أ) الجمجمة EEG تسجيل أثناء استراحة الدولة مع لدغ ثقب في الجمجمة (أسود) وتسجيل EEG متزامنة في نصف الكرة الآخر مع الجمجمة سليمة (رمادي). (ب) توسيع نطاق أعرض من الطول الموجي داخل إطار مستطيل في (A). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 9: قوة الكثافة الطيفية (PSD) كونترا-(أزرق) والتخطيط الدماغي إشارتكم الجانبية (أحمر)- يعرض كل عمود مديرية الأمن العام لأحد الفئران. استخدام لوحات أعلى مقياس التردد الخطي، بينما تستخدم لوحات أسفل مقياس لوغاريتمي التردد للسماح لمديرية الأمن العام في نطاق الترددات الدنيا تصور. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
رقم 10: تحليل المجموعات. تطبيع الفرق بين كونترا-ومديرية الأمن العام إشارتكم الجانبي مع نطاقات التردد خمسة: دلتا، ثيتا، ألفا وبيتا وغاما. كل شريط يظهر فروق طبيعية ضمن نطاق التردد، مع الخطأ القياسي تظهر كشريط خطأ. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Discussion
لقد قمنا بوصف إجراء تجريبي لتسجيل متزامنة شارك مترجمة إشارات EEG وطابعات الحجم الكبير من هو الجرذ أنيسثيتيزيد إيسوفلوراني استجابة لتنشيط لوحة الخط الطولي. تم إدراجه ميكرويليكترودي في اللحاء الجديد من خلال فتحه في التخطيط الدماغي الكهربائي العنكبوت الذي يتماشى مع وجود ثقب لدغ حفرت في الجمجمة. مسرى مضموناً للجمجمة موصل ولصقه لاصقة EEG23. تم تعديل مخروط الآنف المستخدمة لإدارة إيسوفلوراني حيث أن تحفيز كهربائي يمكن إدراجها في لوحة الخط الطولي بسهولة.
قم بلصق التخطيط الدماغي كان فعالاً في تصاعد مسرى العنكبوت بشكل أمن إلى الجمجمة، بينما توفر ممتازة الموصلية الكهربائية طوال اليوم التجريبية دون الحاجة لتطبيقات إضافية للصق. وحل محل استخدام الغراء لإصلاح محيط القطب العنكبوت في الجمجمة، كما الغراء غير موصل ويمكن زيادة مقاومة القطب إذا كان يعمل بين الجمجمة ومسرى غير مرغوب فيها. لصق التخطيط الدماغي يحتوي على عدد من المزايا على جل EEG، التي من الصعب حول حفرة لدغ الشكل ويمكن أن تجف خلال التجربة، أدى إلى سوء التخطيط الدماغي الإشارات.
كما وضعت الفئران داخل قفص فاراداي، كان يخفف الضوضاء الكهربائية بسبب البيئة إلى حد كبير. ومع ذلك، في بعض الأحيان الإشارة العصبية لا تزال صاخبة جداً. في معظم الحالات، وهذا ناجم عن مسرى مرجع لا أمن المتمركزة و ولذلك يلزم إعادة تعديلها أو التخطيط الدماغي أكثر لصق المستخدمة. مشكلة شائعة أخرى أن طابعات الحجم الكبير مقولة صغيرة في السعة. يمكن أن يكون هذا بسبب ميكروليكترودي غير المتمركزة في وسط المنطقة القشرية تنشيطه بواسطة أقطاب كهربائية محفزة. بدلاً من إعادة إدراج ميكروليكترودي، الذي يمكن أن يسبب المزيد من الضرر للخلايا العصبية المحلية، ونحن عادة تعديل وضع أقطاب كهربائية محفزة في لوحة الخط الطولي حتى سعة معقولة من طابعات الحجم الكبير (> 3 mV) يمكن ملاحظة.
أحد أوجه قصور الأسلوب الذي هو القرار المكانية الفقيرة القطب العنكبوت، التي قد يبلغ قطرها 6 مم. هذا كبير بالمقارنة مع حجم الجمجمة في الفئران. ولسوء الحظ، مسرى العنكبوت المستخدمة هنا هي أصغر متاحة للشراء. أنه سوف يكون من المستصوب لتقليل قطر مسرى العنكبوت إلى 2-4 مم، مما يزيد من خصوصية تسجيلات التخطيط الدماغي، مما يجعل المقارنة بين إشارة EEG وسوبراجرانولار المكانية طابعات الحجم الكبير إشارة أقل غموضاً.
العديد من الخطوات الهامة في البروتوكول بحاجة إلى اهتمام خاص. الأول هو إدراج ميكروليكترودي من خلال ثقب لدغ. كما دوراً غير سليمة، من المهم دقة الإدراج. عادة ما يعني مقاومة طفيفة على طرف القطب الكهربائي لا يتم وضع بشكل صحيح. يجب أن تثار، موضع تعديل، وإعادة إدراجها. والثاني هو موقف مخروط الآنف في الفئران. يجب إلا تكون فضفاضة جداً، كما إيسوفلوراني وسوف الهروب من المخروط. كما يجب إلا تكون ضيقة جداً، وهذا يمكن أن يعرقل الخياشيم الفئران ويسبب صعوبة في التنفس. ومطلوب أيضا اهتماما خاصا لضمان أن السعة لتسجيل EEG أصغر بكثير (عادة 5 إلى 10 مرات أصغر) من تسجيل أعلى قناة طابعات الحجم الكبير. إذا كانت متشابهة، أنها إشارة إلى أن المسبار EEG قد حان في الاتصال المباشر أو غير المباشر مع ميكروليكترودي. جهة اتصال غير مباشر هو عادة عن طريق السائل الدماغي النخاعي (CSF) التي تملأ أحياناً الثقب حفر في الجمجمة. الموصلية من السائل الدماغي النخاعي هي عادة 100 مرة24،الجمجمة25. وهكذا، إذا كان مستوى الخدمات القطرية داخل الحفرة لدغ مرتفع بما فيه الكفاية، يمكن أن تجعل الاتصال مع مسرى العنكبوت. لتجنب هذا، يجب تنظيف الحفرة كثيرا مع الأسفنج السوبر ماصة القطن مثل سبيرز الاستيعاب.
أثر حفرة لدغ (قطر < 2 مم) في الجمجمة في التخطيط الدماغي درس تسجيل المحيطة بالحفرة بوضع آخر العنكبوت القطب في الجمجمة سليمة فوق قشرة إشارتكم الجانبية للبرميل حيث أنه يمكن مقارنة ثنائية EEG التسجيلات. توحي النتائج هو موضح في الشكل 9 و الرقم 10، أثر أن يكون ضئيلا في من مستوى الأهمية 0.05. وتشمل العوامل الأخرى التي تؤثر على السعة للتخطيط الدماغي جيدا كيف تم لصق التخطيط الدماغي على اتصال بالجمجمة، وكيف شركة تم الضغط الكهربائي اللصق، ومدى المكانية للصق التخطيط الدماغي في الجمجمة.
كما أنها جديرة بالاهتمام ملاحظة أن البروتوكول هو موضح هنا سجلت EEG الجمجمة، وتختلف عن فروة الرأس EEG المستخدمة في الدراسات الإنسانية في التخطيط الدماغي. أعمال فروة الرأس مثل مقاوم أو مرشح تمرير المنخفضة، مما سيقلل من نسبة الإشارة إلى الضوضاء EEG تسجيل المزيد.
وأخيراً، نقترح مقارنة ديناميات الزمانية لتخطيط موارد المؤسسات ومن طابعات الحجم الكبير أحدثت عبر الطبقات القشرية أن إمكانات مقولة somatosensory يعكس على نحو أفضل طابعات الحجم الكبير في طبقة سوبراجرانولار من القشرة من ذلك في الحبيبية وطبقات إينفراجرانولار. وهذا ما يتفق مع لدينا سابقة أعمال6، مما يدل على أن الجزء الأول (P1) لتخطيط موارد المؤسسات تتعلق العودة الحالية الناجمة عن تدفق ضادات متشابك الحالية التي تحدث في الطبقة الحبيبية، في حين ينخفض بعد ذلك ( N1) في نظام تخطيط موارد المؤسسات قد تكون مرتبطة بتأخر وصول إشارات طبقات الزبائ إلى القشرية ثالاميك الثاني/الثالث و/أو فيدفوروارد من أعمق الطبقات القشرية. وفي الختام، يمكن تعزيز فهم نشأة التخطيط الدماغي العصبية المتزامنة تسجيلات التخطيط الدماغي/طابعات الحجم الكبير، وتيسير النمذجة الرياضية للتخطيط الدماغي من حيث الإشارات العصبية عبر الطبقات القشرية.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
نود أن نشكر كريبس أندرو ووحدة بيوريسورسي في جامعة ريدينغ. ومولت هذا البحث بسرك (منح عدد: BB/K010123/1). تتوفر البيانات المقترنة بهذا العمل بحرية من Y.Z. (ying.zheng@reading.ac.uk).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Female Lister Hood rats | Charles Rivers | ||
| Spider electrode | Unimed Electrode Supplies Ltd | SCS24-426 | |
| EEG paste: Ten20 | Unimed Electrode Supplies Ltd | 10-20-S | |
| Stereotaxic holder with dual micromanipulator arms: Dual Manipulator Stereotaxic Frame with 18° Ear Bars | WPI (World Precision Instruments) | 502603 | |
| Isoflurane | National Vet Services Limited | 50878 | |
| Hard plastic nose cone: Anasthesia Gas Mask for Rat | WPI | 502054 | |
| Small animal isoflurane anaesthetic system | WPI | EZ-B800A | |
| Thermostatic heating pad: Rat Blanket System 230V | Harvard Apparatus UK | 50-7221-F | |
| Ophthalmic ointment: Optixcare eye lube | Viovet | 203865 | |
| Lidocaine Hydrochloride (Injection 2%) | Larkmead Vets | ||
| Jacquette Scaler #1SSE, 18cm, Hollow | WPI | 503421 | |
| Serrated and curved dissecting forceps | WPI | 15915 | |
| Braided silk, non-absorbable suture: Mersilk Suture W502H | National Vet Services Limited | 153746 | |
| Dental drill: BONE MICRO DRILL SYST 230 VAC | Harvard Apparatus UK | 72-4860 | |
| Sterile Saline: Sodium chloride 0.9% | Animalcare Ltd | 14K26BT | |
| Drill bit #4 : Ball Mill, Carbide, #4 | Harvard Apparatus UK | 72-4958 | |
| Drill bit #4 : Ball Mill, Carbide, #1/4 | Harvard Apparatus UK | 72-4962 | |
| Faraday cage | Newport Corporation | VIS-FDC-3600 | |
| Vibration isolation workstation: Vision IsoStation | Newport Corporation | M-VIS3660-RG4-325A | |
| Oximeter Control Unit and sensor: MouseOxPlus, Starr Life Sciences Corp. | WPI | O15001 | |
| Transparent soft nose cone: Microflex Non-Rebreathing Unit with a Rat Nosecone | WPI | EZ-103A | |
| Stainless steel stimulating electrodes | PlasticsOne | E363/1/SPC | |
| Isolated current stimulator | Made in House | ||
| 16-channel micro-electrode, 100 μm spacing, area of each site 177 μm2 | NeuroNexus | A1x16-10mm-100-177-A16 | |
| 16-channel acute headstage | Tucker David Technologies Inc., TDT | RA16AC-Z | |
| Pre-Amplifier: Z-Series 64-Channel Neuro-Digitizing Preamp | TDT | PZ5-64 | |
| Passive signal splitter: 32-Channel Splitter Box for PZ5 | TDT | S-BOX_PZ5 | |
| Data acquisition unit: RZ2 BioAmp Processor. Z-Series 4-DSP ultra high performance processor | TDT | RZ2-4 | |
| Software for Neurophysiology: OpenEX | TDT | ||
| Matlab | MathWorks | ||
| Absorption spears | Fine Sicence Tools | 18105-01 |
References
- Mitzdorf, U. Current source-density method and application in cat cerebral cortex: investigation of evoked potentials and EEG phenomena. Physiol Rev. 65 (1), 37-100 (1985).
- Logothetis, N. K. The Underpinnings of the BOLD Functional Magnetic Resonance Imaging Signal. J Neurosci. 23 (10), 3963-3971 (2003).
- Buzsáki, G., Anastassiou, C. A., Koch, C. The origin of extracellular fields and currents — EEG, ECoG, LFP and spikes. Nat Rev Neurosci. 13 (6), 407-420 (2012).
- Einevoll, G. T., Kayser, C., Logothetis, N. K., Panzeri, S. Modelling and analysis of local field potentials for studying the function of cortical circuits. Nat Rev Neurosci. 14 (11), 770-785 (2013).
- Zheng, Y., et al. Balanced excitation and inhibition: Model based analysis of local field potentials. Neuroimage. 63 (1), 81-94 (2012).
- Bruyns-Haylett, M., et al. The neurogenesis of P1 and N1: A concurrent EEG/LFP study. Neuroimage. 146, 575-588 (2017).
- Nunez, P. L. Electric Fields of the Brain: The Neurophysics of EEG. , Oxford University Press. (1981).
- Jackson, A. F., Bolger, D. J. The neurophysiological bases of EEG and EEG measurement: A review for the rest of us. Psychophysiology. 51 (11), 1061-1071 (2014).
- Cohen, M. X. Where Does EEG Come From and What Does It Mean? Trends Neurosci. 40 (4), 208-218 (2017).
- Bojak, I., Oostendorp, T., Reid, A., Kötter, R. Connecting Mean Field Models of Neural Activity to EEG and fMRI Data. Brain Topogr. 23 (2), 139-149 (2010).
- Coombes, S. Large-scale neural dynamics: Simple and complex. Neuroimage. 52 (3), 731-739 (2010).
- Deco, G., Jirsa, V. K., Robinson, P. A., Breakspear, M., Friston, K. J. The dynamic brain: from spiking neurons to neural-masses and cortical fields. PLoS Comput. Biol. 4 (8), e1000092 (2008).
- Pinotsis, D. A., Friston, K. J. Neural fields, spectral responses and lateral connections. Neuroimage. 55 (1), 39-48 (2011).
- Riera, J. J., et al. Pitfalls in the dipolar model for the neocortical EEG sources. J Neurophysiol. 108 (4), 956-975 (2012).
- Valdes, P. A., Jimenez, J. C., Riera, J., Biscay, R., Ozaki, T. Nonlinear EEG analysis based on a neural mass model. Biol Cybern. 81 (5), 415-424 (1999).
- Musall, S., von Pföstl, V., Rauch, A., Logothetis, N. K., Whittingstall, K. Effects of Neural Synchrony on Surface EEG. Cereb Cortex. 24 (4), 1045-1053 (2014).
- Snyder, A. C., Morais, M. J., Willis, C. M., Smith, M. A. Global network influences on local functional connectivity. Nat Neurosci. 18 (5), 736-743 (2015).
- Mayhew, J., et al. Spectroscopic analysis of neural activity in brain: Increased oxygen consumption following activation of barrel cortex. Neuroimage. 12 (6), 664-675 (2000).
- Paxinos, G., Watson, C. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates. , Elsevier Academic Press. (2005).
- Martindale, J., et al. The hemodynamic impulse response to a single neural event. J Cereb Blood Flow Metab. 23 (5), 546-555 (2003).
- Pettersen, K. H., Devor, A., Ulbert, I., Dale, A. M., Einevoll, G. T. Current-source density estimation based on inversion of electrostatic forward solution: Effects of finite extent of neuronal activity and conductivity discontinuities. J Neurosci Methods. 154 (1-2), 116-133 (2006).
- Thomson, D. J., et al. Multitaper analysis of nonstationary and nonlinear time series data. Nonlinear and Nonstationary Signal Processing. Fitzgerald, W. J., et al. , 317-394 (2000).
- Bae, J., Deshmukh, A., Song, Y., Riera, J. Brain Source Imaging in Preclinical Rat Models of Focal Epilepsy using High-Resolution EEG Recordings. Journal of Visualized Experiments : JoVE. (100), e52700 (2015).
- Baumann, S. B., Wozny, D. R., Kelly, S. K., Meno, F. M. The electrical conductivity of human cerebrospinal fluid at body temperature. IEEE Trans Biomed Eng. 44 (3), 220-223 (1997).
- Wendel, K., et al. The Influence of Age and Skull Conductivity on Surface and Subdermal Bipolar EEG Leads. Computational Intelligence and Neuroscience. 2010, (2010).
- Flemming, L., et al. Evaluation of the distortion of EEG signals caused by a hole in the skull mimicking the fontanel in the skull of human neonates. Clin Neurophysiol. 116 (5), 1141-1152 (2005).
