Summary
Her presenterer vi en modifisert electrospinning metode for å dikte PCL vaskulær graftene med tykk fibre og store porer, og beskriver en protokoll for å evaluere ytelsen i vivo i en rotte modell av abdominal aorta erstatning.
Abstract
Her presenterer vi en protokoll for å dikte macroporous PCL vaskulær pode og beskrive en evaluering-protokollen ved hjelp av en rotte modell av abdominal aorta erstatning. Electrospun vaskulære graftene har ofte relativt små porer, som begrenser celle infiltrasjon i graftene og hindrer fornyelse og ombygging av neo-arteriene. I denne studien ble PCL vaskulær graftene med tykkere fiber (5-6 µm) og større porene (~ 30 µm) laget ved hjelp av en modifisert behandling teknikk. Langsiktig ytelse av graftet ble evaluert av implantasjon i en rotte abdominal aorta modell. Ultralyd analyse viste at graftene forble patent uten aneurisme eller stenose oppstår selv etter 12 måneder av implantasjon. Macroporous forbedret celle ingrowth og dermed fremmes vev regenereres på 3 måneder. Enda viktigere, var det ingen tegn med negative remodeling, som forkalkninger i pode veggen etter 12 måneder. Derfor har electrospun PCL vaskulær graftene med endrede macroporous behandling potensial til å være en arterie erstatning for langsiktig implantasjon.
Introduction
Vaskulær grafts laget av syntetiske polymerer benyttes mye i klinikken for behandling av hjerte-og karsykdommer (karsykdommer). Dessverre, i liten diameter vaskulær grafts (D < 6 mm) det er ingen vellykket produkter tilgjengelig på grunn av den lave patency utløst av redusert blod flyten hastighet, som ofte fører til blodpropp, intimal hyperplasia og andre komplikasjoner1.
Tissue engineering gir en alternativ strategi for å realisere langsiktige patency og homeostase basert på stillaset-guidede vaskulær regenerasjon og gjenoppbygging. I detalj, vaskulære graftet, som en tredimensjonal mal kunne gi mekanisk støtte og strukturelle veiledning under fornyelse av vaskulær vev og innflytelse cellulære funksjoner, inkludert celle vedheft, migrasjon, spredning, og utskillelsen av ekstracellulær matrix2. Inntil nå, har ulike syntetiske polymerer vært vurdert for programmer i vaskulær tissue engineering. Blant disse polymerer, har poly(ε-caprolactone) (PCL) vært intenst undersøkt god celle kompatibilitet og langsomme nedbrytning mellom flere måneder til to år3. I en rotte aorta modell4,5,6, PCL vaskulær grafts behandles av electrospinning utstilt utmerket konstruksjonssikkerhet og patency, så vel som kontinuerlig økt celle invasjon og neovascularization i den pode veggen for inntil 6 måneder. Imidlertid ugunstig vev remodeling, inkludert regresjon av celler og kapillærer og forkalkninger, ble også observert på lengre timepoints, opp til 18 måneder.
Cellularization av vaskulær graftet er en nøkkelfaktor bestemme vev gjenfødelse og remolding7. Electrospinning, har som en allsidig teknikk, vært viden ansatt for utarbeidelse av vaskulær graftene med nano-fibrøs struktur8. Dessverre, relativt liten pore strukturen fører ofte til utilstrekkelig celle infiltrasjon i electrospun vaskulære graftet, som begrenser den påfølgende vev gjenfødelse. Du kan løse dette problemet ved forsøkt ulike teknikker å øke porestørrelse og generelle porøsitet, inkludert salt/polymer utvasking9,10, endring av samler apparater, etter behandling av laserstråling11 , etc. Faktisk er strukturen av electrospun grafts (inkludert fiber diameter og porestørrelse porøsitet) nært knyttet til behandling forhold12,13. Under electrospinning, kan fiber diameteren lett kontrolleres ved å endre parametrene som konsentrasjonen av polymer løsning, flyt, spenning, etc. 14 , 15, og derfor porestørrelse og porøsitet er forbedret tilsvarende.
Vi har nylig rapportert en modifisert PCL electrospun pode med macroporous struktur (fiber med diameter på 5-7 µm og porene i 30-40 µm). I vivo implantasjon av erstatter rotte abdominal aorta viste høy rate av patency, i tillegg til god endothelialization og glatt muskel fornyelse på 3 måneder etter operasjonen16. Enda viktigere, kunne ingen ugunstig vev ombygging inkludert forkalkninger og celle regresjon observeres selv etter ett års implantasjon.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Bruk av forsøksdyr ble godkjent av dyr eksperimenter etiske komiteen av Nankai University og utført i samsvar med veiledningen for omsorg og bruk av forsøksdyr.
1. fabrikasjon av Electrospun PCL Grafts
Merk: Her, en electrospinning teknikk ble benyttet for å dikte vaskulær grafts.
- Forberede PCL løsninger av 25 wt % til 10% av wt smelte PCL i en blanding av metanol og kloroform, henholdsvis (1:5 volumkontrollen), ved romtemperatur (RT) for 12 h.
- Legg PCL løsningen i en 10-mL glass sprøyte.
- Plass sprøyten med en 21-G nål.
- Plass rustfritt stål mandrel (2 mm i diameter, 25 cm i lengde) på samling instrumentet.
- Tykkere-fiber grafter, bruker PCL løsning av 25 wt %, arbeidsavstand 17 cm fra pinne-spissen til samleren, flow rate på 8 mL/t, og spenning på 11 kV som electrospinning-parametere. Tynnere-fiber grafts, bruke PCL løsning av 10 wt %, arbeidsavstand av 20 cm fra pinne-spissen til samleren, en strømningshastighet på 2 mL/t, og spenning på 18 kV som electrospinning-parametere.
- Kontroller at innhentet graftene plasseres i vakuum over natten for å fjerne gjenværende løsemiddelet. Sterilisere alle instrumenter før prosedyren og vedlikeholde steril teknikk hele.
- Før implantasjon, Desinfiser graftene fordyper seg i 10 mL av 75% etanol i 30 min og deretter utsette dem for UV-lys over natten.
- Fiber og pore størrelse mål: beregne gjennomsnittlig fiber diameter med ImageJ programvare basert på skanning elektronmikroskop (SEM) bilder.
- Mekanisk testing av stillaser:
- Kuttet rørformede stillasene i 3 mm deler i lengde med et barberblad. Måle tykkelsen på stillaser bruker en mikrometer.
- Plass rørformede stillasene på en strekk-testing maskin med en lastekapasitet på 100 N.
- Klemme stillasene 1 mm mellom klemme avstand og dra langs med en hastighet på 10 mm/min til brudd. Mål strekkfasthet og ultimate forlengelse på pause. Beregne Youngs modul fra den første lineære regionen (opptil 5% belastning) av stress-belastning kurven.
2. rotte Abdominal Aorta implantasjon modell
Merk: Alle materialer og instrumenter kirurgi er sterile. Under operasjonen, må du kontrollere at operatøren bærer en gasbind maske og sterile hansker for å unngå infeksjoner. Sikre romtemperaturen holdes på 27-30 ° C å opprettholde dyr kroppstemperaturen. Følg lokale IACUC retningslinjer for analgesi.
- Bruk Sprague Dawley-hannrotter som veier 240-270 g som mottakere av vaskulær graft. Sikre rotta har fastet 24 timer før operasjonen. Målet med faste rotter 24 h er å tom avføring i tarmkanalen tilstrekkelig, og dermed utvide operatørens horisonten.
- Forstå rottas nakken og holde hodet nedover, springe nålen inn i bukhulen i nedre del av magen. Indusere rotta for anestesi med chloral hydrat (330 mg/kg) av en intraperitoneal injeksjon.
- Bekreft tilstrekkelig anesthetization ved å sikre at rottene har slappet muskler og jevn puste. Sett rotta under drift mikroskopet i supine posisjon.
- Bruke petrolatum ophthalmica vet salve på øynene for å hindre tørrhet under anestesi. Administrere anticoagulation (100 UI/kg) med heparinized fysiologisk saltløsning (50 UI/mL) ved halen blodåre injeksjon før operasjonen.
- Barbere av pelsen i fremre bukveggen med et barberblad, og rense huden med joden løsning og medisinsk alkohol-løsning.
- Utføre en midtlinjen laparotomy snitt med kirurgisk saks og sikre at snittet er ca 4-5 cm lang, og dermed eksponere bukhulen.
- Trekke og bryte tarmen med gasbind fuktet med saltvann fortrinnsvis.
- Dissekere abdominal aorta nøye.
- Identifisere og ligate alle små grener med 9-0 monofilament nylon sømmer.
- Klemme den isolerte delen (opp til 1 cm i lengde) av aorta ved hjelp av to vaskulær klemmer. Aorta kan være festet i 20-30 min.
- Mudderbunn abdominal aorta mellom to klemmer bruker micro-saks til å lage anastomotisk nettsteder.
- Tømme de to endene av aorta bruker heparinized saltløsning (50 UI/mL) for å fjerne gjenværende blodet.
- Løsner adventitia med mikro-saks.
- Anastomose graftet med 2 mm indre diameter og 1 cm i lengde til rottas abdominal aorta med en figur-til-åtte Sutur mønster med 9-0 monofilament nylon sømmer.
- Først lage fire forekomst i henhold til sekvensen av 9, 3, 12 og 6 o'clock stillinger i den proksimale siden, så anastomose kuttet kantene i 4 masker mellom to suturer. Når den proksimale Sutur, Sutur den distale siden på samme måte.
Merk: Hver maske er nødvendig for å sikre den opprinnelige siden er litt innebygd i graftet. - Fjern distale klemmen for å la blodet å strømme inn graftet og fjerne proksimale klemmen.
- Trykk Sutur endene for å stoppe blødningen bruker en steril bomull ball eller en liten gasbind svamp. Trykk i ca 3 min, til hemostasen.
- Tilbake tarmen i bukhulen.
- Tømme bukhulen med varm fysiologisk saltløsning gentamicin (320 U/mL).
- Sy opp bukveggen med en 3-0 Nylon Sutur i muskler og huden laget, henholdsvis.
- Plasser rotta i en ren og tørr bur og sette en varmeputen under byrået å opprettholde dyr kroppstemperatur; Vent til rotta å gjenopprette bedøvelsen. Ivareta dyret før det har gjenvunnet tilstrekkelig bevissthet for å opprettholde sternal recumbency.
- Etter det gjenvinner bevisstheten, putte rotta inne en enkelt bur med mat og vann. Bruk jod såret å hindre infeksjon etter operasjonen. Returner rotta til selskapet av annet dyrene før det fullt gjenoppretter.
- Euthanize rotter ifølge institusjonelle retningslinjer på forhåndsbestemte tidspunkt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
PCL graftene var explanted på 3 måneder og 12 måneder post-operatively og analyseres av histologiske standardmetoder for hematoxylin og eosin (H & E), Masson trichrome, Verhoeff-van Gieson (VVG), Von Kossa og immunofluorescence flekker for α-SMA, MYH, vWF og elastin. Histologiske bildene ble tatt med en oppreist mikroskop, og immunofluorescence bildene ble tatt med fluorescence mikroskop.
Alle data ble uttrykt som betyr ± SD. En tosidig sammen Student t-test ble brukt til å sammenligne forskjeller. Verdien p < 0,05 ble ansett å være statistisk signifikant.
Romanen electrospun PCL graftene med optimalisert struktur, dvs tykkere fibre og større porene, ble vellykket fabrikkert i denne studien. SEM bildene viste at gjennomsnitt fiber diameter var nesten 8 ganger tykkere i de endrede graftene (figur 1A) enn i den konvensjonelle en (figur 1B) (5.59 ± 0,67 versus 0,69 ± 0.54 µm). Som et resultat, gjennomsnitt porestørrelse ble markert økt, fra ~ 4.66 µm i tynnere-fiber pode å ~ 40.88 µm i tykkere-fiber en. Tverrsnitt viste homogen fiber distribusjon i veggen av rørformede graftene i både tykkere-fiber (figur 1 d-F) og tynnere-fiber grupper (figur 1G-jeg). Veggtykkelse var om 400-500 µm. De mekaniske egenskapene av grafts ble preget av strekk testing, og den typiske stress-belastning kurver ble vist i figur 1 c. De mekaniske egenskapene av to grafts var tydeligvis forskjellige med hensyn til forlengelse. Den tilsvarende verdien av tykkere-fiber grafts var ca 3 ganger høyere enn tynnere-fiber graftene, tyder forbedret seighet.
Forberedt vaskulær graftene (indre diameter 2.0 mm) og lengden på 1 cm (figur 2A) ble implantert for å erstatte et segment av innfødte abdominal aorta i rotte (figur 2B). På forhåndsbestemte tidspunktet poeng, ble patency av implantert graftene undersøkt av ultralyd. Resultatene viste at de fleste av graftene var patent (figur 2C). Videre var hastigheten av blodstrøm lignende mellom pode og tilstøtende native blod fartøy på 12 måneder. Explanted grafts beholdt god morfologi uten aneurisme (figur 2D), og ingen stenose eller thrombi kunne observeres på luminal overflaten (figur 2E).
Vev gjenfødelse og ECM sekresjon på 3 måneder ble ytterligere vurdert av histology analyser. H & E flekker viste at et lag av neo-vev ble dannet på lumen av graftet (Figur 3 g-H). Videre vWF flekker viser at luminal overflaten var fullstendig dekket av nydannede endotelet (figur 3A), som minner om den opprinnelige aortabuen (figur 3B). I mellomtiden ble flere lag av MYH-positive celler organisert omkrets retning, indikerer fornyelse av vaskulær media (Figur 3 c-D). Ekstracellulær matrix syntese ble observert av Masson og VVG flekker, henholdsvis. En betydelig mengde kollagen og elastin fibrøs kan observeres i graftet (figur 3I-J, K--L), som spiller en viktig rolle i vaskulær regenerasjon og remodeling. Immunofluorescence flekker videre viste strukturen av elastin ble justert circumferentially i et mønster som det i native arterien (figur 3E-F).
Videre Spartments vev inkludert endotelet og glatt muskel vedlikeholdt integrert og regress ikke etter 12 måneder av implantasjon (figur 4A-C). Enda viktigere, var det ingen tegn til forkalkninger innenfor pode veggen basert på Von Kossa flekker (Figur 4 d).
Figur 1 : Strukturen og mekanisk eiendom PCL graftet. SEM bilder av electrospun PCL matter med tykkere fiber (A) og tynnere fiber (B). Tverrsnitt av tykkere-fiber rørformede grafts (D-F) og tynnere-fiber grafts (G-jeg). Representant press-stress kurven vises i (C). Disse tallene har blitt endret fra Zhao, et al. 16 Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : Implantasjon av vaskulær grafts i en rotte abdominal aorta modell. Electrospun PCL vaskulær pode på 1 cm i lengde (A) var kirurgisk interposed abdominal aorta i rotte (B). Ultralyd bildet viste at graftet var patent i vivo på 1 år (C). Stereomicroscopic bilder viser at graftet var godt integrert med tilstøtende innfødt aorta uten aneurisme (D), og luminal overflaten er ren og blodpropp (E). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3 : Vev foryngelse og deponering av ECM i explanted graftene på 3 måneder med innfødt aorta. Tverrsnittsstudier bilder av gjenfødte grafts (A, Cog E) og innfødt arterie (B, D, og F) var immunostained å oppdage den endotelceller, glatte muskelcellene og elastin. H & E flekker viser vev gjenfødelse i explanted graftene (G) i forhold til opprinnelige aorta (H). Masson er flekker avslørt som tilstedeværelse av kollagen i explanted grafts (jeg) og innfødt aorta (J). VVG flekker viste tilstedeværelse av elastin i explanted grafts (K) og innfødt aorta (L). Disse tallene har blitt endret fra Zhao, et al. 16 Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4 : Histologiske analyse av explanted graftene på 12 måneder. (A) H & E flekker viste den vev gjenfødelse explanted graftene. (B) endotelet var immunostained av vWF antistoff. (C) glatt muskel var immunostained av α-SMA antistoff. (D) forkalkninger ble evaluert av Von Kossa flekker. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Cellen infiltrasjon er kritisk for regenerasjon og remodeling vaskulær pode i vivo16. Begrenset celle infiltrasjon er ofte knyttet til relativt liten porene av graftet som hindrer overføring av celler i pode veggen. For å løse dette problemet, utviklet vi en modifisert metode for å forberede electrospun PCL vaskulær graftene med store pore strukturen. I detalj, porestørrelse økt med økningen av fiber tykkelse som lett kan kontrolleres av parameterne behandling. Resultatene viste at verten cellene kan lett infiltrere inn i veggen av denne macroporous pode etter i vivo implantasjon og cellularity forble på et relativt høyt nivå uten åpenbare celle regresjon på 12 måneder etter operasjonen.
Native arterien består hovedsakelig av tre lag, dvs endotelet, tunika media og adventitia. Endotelet, spiller som et anti-thrombogenic grensesnitt, en viktig rolle i å opprettholde den langsiktige patency blod fartøy. I vår studie, ble full endothelialization på graftet observert i 3 måneder. I tillegg er tunika media som består av flere lag av glatte muskelcellene svært viktige i regulering av blod fartøy funksjon og gir riktig mekaniske egenskaper av arterien. Studien viste at electrospun PCL graft med tykk-fiber og store pore markert forbedret fornyelse av funksjonelle tunika media. Dessuten er strukturen i Spartments glatt muskel lik som opprinnelig tunika media. Immunofluorescence flekker viste flere lag av MYH+ celler fordelt i elastin nettverk, reflekterer kontraktile fenotypen av glatte muskelcellene circumferentially. Mer viktigere, regenerert vev (endotelet og glatt muskel) beholdes, og det var ingen negative remodeling selv etter 12 måneder på grunn av ubalansen mellom ECM syntese og nedbrytning.
Forkalkninger er fortsatt et stort problem forbundet med hjerte implantater, spesielt i vaskulær graftet. Vaskulær glatt muskelceller (VSMCs) mister deres opprinnelige fenotypen og opplev trans-differensiering mot osteochondrogenic retning, ektopisk mineralisering under prosessen av vaskulær forkalkninger. Vår studie viste at det var ingen kalsium deponering forekommer i pode veggen selv etter 12 måneder av implantasjon. De viktigste årsakene til hemmet forkalkning i makro-porøse vaskulær graftet inkluderer: (1) strukturen på makro-porøse graftet fremmer stoffskiftet, som ion utveksling mellom celler og blod. (2) de fysiske signaler av graftet kan regulere eller hindre differensiering av VSMC inn i osteoblast1, (3) god celle infiltrasjon i de store porene fremmer utskillelsen av ECM og hemmer dens fornedrelse som vil utløse forkalkninger17, og (4) normal eller funksjonelle VSMCs har et potensial til å hindre kalsium deponering18.
I sammendraget gir langsiktig evalueringen av makro-porøse electrospun PCL vaskulær grafts i rotte abdominal aorta modellen viktig innsikt i potensielle utfordringer av nedbrytbart vaskulær grafts, som hjelper følgende forskning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen motstridende økonomiske interesser.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble økonomisk støttet av NSFC prosjekter (81522023, 81530059, 91639113, 81772000, 81371699 og 81401534).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Poly(ε-caprolactone) (PCL) pellets (Mn=80,000) | Sigma | 704067 | |
| Methanol | Tianjin Chemical Reagent Company | 1060 | |
| Alcohol | Tianjin Chemical Reagent Company | 1083 | |
| Chloroform | Tianjin Chemical Reagent Company | A1007 | |
| Sucrose | Tianjin Fengchuan Company | 2296 | |
| Triton X-100 | Alfa Aesar | A16046 | |
| Sprague Dawley rats | Laboratory Animal Center of the Academy of Military Medical Sciences | ||
| Normal saline | Hebei Tiancheng Pharmaceutical company | ||
| Chloral hydrate | Tianjin Ruijinte chemical company | 2223 | |
| Heparin sodium Injection | Tianjin Biochem Pharmaceutical company | ||
| Gentamycin Sulfate Injection | Jiangsu Lianshui Pharmaceutical company | ||
| Mouse anti-α-SMA primary antibody | Abcam | ab7817 | |
| Mouse anti-smooth MYH primary antibody | Abcam | ab683 | |
| Rabbit polyclonal anti-rat elastin antibody | Abcam | ab23748 | |
| Rabbit anti-von Willebrand factor primary antibody | Abcam | ab6994 | |
| Goat anti-mouse IgG (Alexa Fluor 488) | Invitrogen | ab150117 | |
| Goat anti-rabbit IgG (Alexa Fluor 488) | Invitrogen | ab150077 | |
| 5% normal goat serum | Zhongshan Golden bridge | ZLI9022 | |
| Hematoxylin and eosin (H&E) | Beijing leagene biotech | DH0006 | |
| Masson's trichrome | Beijing leagene biotech | DC0032 | |
| Verhoeff-van Gieson (VVG) | Beijing leagene biotech | DC0059 | |
| Von Kossa | Beijing leagene biotech | DS0003 | |
| Surgical sutures needles with thread,3-0 silk | Shanghai Jinhuan medical supplies company | G3002b | |
| Surgical sutures needles with thread,9-0 silk | Shanghai Jinhuan medical supplies company | H901 |
References
- Coombs, K. E., Leonard, A. T., Rush, M. N., Santistevan, D. A., Hedberg-Dirk, E. L. Isolated effect of material stiffness on valvular interstitial cell differentiation. J Biomed Mater Res A. 105 (1), 51-61 (2017).
- Zhang, L., et al. A sandwich tubular scaffold derived from chitosan for blood vessel tissue engineering. J Biomed Mater Res A. 77 (2), 277-284 (2006).
- Thottappillil, N., Nair, P. D. Scaffolds in vascular regeneration: current status. Vasc Health Risk Manag. 11, 79-91 (2015).
- Pektok, E., et al. Degradation and healing characteristics of small-diameter poly (e-caprolactone) vascular grafts in the rat systemic arterial circulation. Circulation. 118 (24), 2563-2570 (2008).
- Innocente, F., et al. Paclitaxel-eluting biodegradable synthetic vascular prostheses: a step towards reduction of neointima formation? Circulation. 120 (11 Suppl), S37-S45 (2009).
- de Valence, S., et al. Advantages of bilayered vascular grafts for surgical applicability and tissue regeneration. Acta Biomater. 8 (11), 3914-3920 (2012).
- Assmann, A., et al. Acceleration of autologous in vivo recellularization of decellularized aortic conduits by fibronectin surface coating. Biomaterials. 34 (25), 6015-6026 (2013).
- Hasan, A., et al. Electrospun scaffolds for tissue engineering of vascular grafts. Acta Biomater. 10 (1), 11-25 (2014).
- Baker, B. M., et al. The potential to improve cell infiltration in composite fiber-aligned electrospun scaffolds by the selective removal of sacrificial fibers. Biomaterials. 29 (15), 2348-2358 (2008).
- Wang, K., et al. Creation of macropores in electrospun silk fibroin scaffolds using sacrificial PEO-microparticles to enhance cellular infiltration. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 101 (12), 3474-3481 (2013).
- Lee, B. L. P., et al. Femtosecond laser ablation enhances cell infiltration into three-dimensional electrospun scaffolds. Acta Biomaterialia. 8 (7), 2648-2658 (2012).
- Rnjak-Kovacina, J., Weiss, A. S. Increasing the pore size of electrospun scaffolds. Tissue Eng Part B Rev. 17 (5), 365-372 (2011).
- Zhong, S., Zhang, Y., Lim, C. T. Fabrication of large pores in electrospun nanofibrous scaffolds for cellular infiltration: a review. Tissue Eng Part B Rev. 18 (2), 77-87 (2012).
- Pham, Q. P., Sharma, U., Mikos, A. G. Electrospun poly(epsilon-caprolactone) microfiber and multilayer nanofiber/microfiber scaffolds: characterization of scaffolds and measurement of cellular infiltration. Biomacromolecules. 7 (10), 2796-2805 (2006).
- Rnjak-Kovacina, J., et al. Tailoring the porosity and pore size of electrospun synthetic human elastin scaffolds for dermal tissue engineering. Biomaterials. 32 (28), 6729-6736 (2011).
- Wang, Z., et al. The effect of thick fibers and large pores of electrospun poly(epsilon-caprolactone) vascular grafts on macrophage polarization and arterial regeneration. Biomaterials. 35 (22), 5700-5710 (2014).
- Hutcheson, J. D., et al. Genesis and growth of extracellular-vesicle-derived microcalcification in atherosclerotic plaques. Nat Mater. 15 (3), 335-343 (2016).
- Tara, S., et al. Well-organized neointima of large-pore poly(L-lactic acid) vascular graft coated with poly(L-lactic-co-epsilon-caprolactone) prevents calcific deposition compared to small-pore electrospun poly(L-lactic acid) graft in a mouse aortic implantation model. Atherosclerosis. 237 (2), 684-691 (2014).
