Method Article

نموذج الماوس هايبراندروجينيك لدراسة متلازمة تكيس المبيض

DOI:

10.3791/58379

⸱

October 2nd, 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics, Johns Hopkins University School of Medicine, 2Department of Health, Beijing Military General Hospital, 3Southern Medical University, 4Department of Molecular and Cellular Physiology, Johns Hopkins University School of Medicine, 5Department of Gynecology and Obstetrics, Johns Hopkins University School of Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف لنا تطوير نموذج الماوس مثل متلازمة تكيس المبايض العجاف مع بيليه ديهدروتستوسترون لدراسة الفسيولوجيا المرضية لمتلازمة تكيس المبايض والذرية من هذه السدود مثل متلازمة تكيس المبايض.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هايبراندروجينيميا يلعب دوراً حاسما في الوظيفة الإنجابية والايض لدى الإناث، وهي السمة المميزة لمتلازمة تكيس المبيض. وضع نموذج ماوس مثل متلازمة تكيس المبايض الهزيل الذي يحاكي النساء مع متلازمة تكيس المبايض مجدية سريرياً. في هذا البروتوكول، يصف لنا نموذج من هذا القبيل. عن طريق إدراج بطول 4 ملم من دهت (ديهدروتستوسترون) كريستال مسحوق بيليه (الطول الكلي لبيليه 8 ملم)، واستبدال شهريا، نحن قادرون على إنتاج نموذج ماوس مثل متلازمة تكيس المبايض مع المصل دهت مستويات 2 إضعاف أعلى من الفئران غير مزروع مع دهت (لا-DHT). لاحظنا الخلل في الصحة الإنجابية والتمثيل الغذائي دون تغيير وزن الجسم وتكوين الجسم. وفي حين نستعرض بدرجة عالية من العقم، مجموعة فرعية صغيرة من هذه الفئران الإناث مثل متلازمة تكيس المبايض يمكن الحصول على الحوامل وذريتهم إظهار تأخر سن البلوغ وزيادة التستوستيرون كبالغين. هذا النموذج مثل متلازمة تكيس المبايض العجاف الماوس أداة مفيدة لدراسة الفسيولوجيا المرضية لمتلازمة تكيس المبايض والذرية من هذه السدود مثل متلازمة تكيس المبايض.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هايبراندروجينيسم هو السمة المميزة لمتلازمة تكيس المبيض (بكس) وفقا لمعايير المعهد الوطني للصحة والاندروجين الزائد والمجتمع بكس (AE-متلازمة تكيس المبايض). المرأة مع متلازمة تكيس المبايض يجدون صعوبة في الحصول على الحوامل، وزادت من خطر مضاعفات الحمل1. حتى لو أنها تحصل على الحوامل، قد ذريتهم الإناث نتائج ضارة بصحة2،3. وقد وضعت نماذج حيوانية باستخدام مختلف استراتيجيات4،5،،من67،،من89،

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

نقدم هنا، بروتوكولات مفصلة دهت بيليه إعداد والإدراج، والصحة الإنجابية والايض اختبار. الفئران المستخدمة في هذه الدراسة كانت خلفية مختلطة (C57/B6، CD1، 129Sv)، وتواصلت مع الغذاء والمياه libitum الإعلانية في دائرة ضوء/الظلام ح 14/10 في 24 درجة مئوية في برودواي البحوث بناء منشأة الحيوان في كلية جامعة جونز هوبكنز الطب. وافق جميع الإجراءات لجنة الاستخدام ورعاية الحيوان جامعة جونز هوبكنز.

1-إنشاء نموذج الماوس مثل متلازمة تكيس المبايض

  1. إعداد بيليه دهت
    1. أنابيب سيلاستيك اﻷوتوكﻻف لتعقيم. قطع أنابيب سيلاستيك بطول 15 ملم مع شفرة حلاقة؛
    2. ختم جانب واحد عن طريق حقن سيليكون لاصقة طبية في الأنبوب بإبرة ي....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

مصل مستويات DHT واختبار تحمل الجلوكوز

قيست مستويات DHT من مصل الدم التي جمعت كلا أليسا، ومرض التصلب العصبي المتعدد-LC وفقا للبروتوكول 1.24 – 1.25، و 2.9 من 3.0. القيم المطلقة دهت تختلف بين الطيف الكتلي وإليزا، مع ذلك، حظيرة النسبي (نحو إضعاف) مقابل دهت الإدراج لا دهت مماثل من فحوصات على حد سواء، وعبر تجارب15،،من2324 ( .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هايبراندروجينيسم من سمات رئيسية لمتلازمة تكيس المبايض. مستويات DHT المصل (اثنان إضعاف أعلى في الفئران دهت من الفئران لا دهت) المستخدمة في هذا البروتوكول هي أقل من تلك التي أبلغ عنها بغيرها من المحققين في الدراسات السابقة وهي محسوبة تناسبياً تقليد النساء مع متلازمة تكيس المبايض5،19، ،من 2021. على عكس النماذج الأخرى، لا يغير من هذا الطراز دهت إضعاف وزن الجسم وتكوين الجسم كله مقارنة مع الفئران لا .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لا شيء الكشف عنها.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هذا العمل كان يدعمها المعاهد الوطنية للصحة (منح HD068130 R00 إلى جنوب غرب) ومركز أبحاث مرض السكري بالتيمور: الطيارين وجدوى منحة (جنوب غرب).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

مسحوق لاصق خطوط

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
بلوري 5 & alpha ؛ -DHTSigma-AldrichA8380-1G
داو كورنينج أنابيب سيلاستيكفيشر العلمية11-189-15D0.04 بوصة / 1 مم القطر الداخلي x0.085 بوصة / 2.15 مم القطر الخارجي
سيليكون طبيعامل II ، InC.نظارات واقية من A-100
ومعاطف المختبر والقفازات والأقنعة.
10 وميكرو ؛ L أطراف ماصة بدون مرشحالولايات المتحدة الأمريكية 11113700
المجهر العلمي شريحة لتشويهفيشر Scientific12-550-003
Diff Quik لتلوين الخلايافيشر NC9979740
لانسيتفيشر ScientificNC9416572
3 مل حقنةبيكتون ، ديكنسون وشركاه (BD) ،30985
إبرة متصلة: 20 جمديناربحريني 305176
المسطرة: أي طول يزيد عن 10 سم بمقياس ملليمتر.
XylazineVet one AnnSeA LA ، MWI ، BoiseNDC13985-704-10100 مجم / مل
الكيتامين هيدروكلوريدHospira، IncNDC 0409-2051-05100 مجم / مل
دبابةجراحية AutoClip & reg ؛ النظام ، أداة العلومالدقيقة 12020-00
حقنة الأنسولينBD3294611/2 CC ، جرعة منخفضة من حقنة الأنسولين U-100
مبزلأبحاث مبتكرة في أمريكاMP-182
مجهركارل زايس بريموستار 415500-0010-001ألمانيا
لكمة الأذنفيشر Scientific13-812-201
التستوستيرون الفئران / الفأر إليزا مجموعةIBLB79174
DHT ELISA kitAlpha Diagnostic International1940
بلمسة واحدة فائقة لمقياس السكرLife Scan، Inc.
اختبار فائقة بلمسة واحدةLife Scan، Inc.
أنبوب Eppendorfفيشر Scientific05-402-18
شفرة الحلاقةفيشر Scientific12-640
ClidoxFisher ScientificNC0089321
الوسادة السفلية الجراحيةFisher Scientific50587953الشركة المصنعة: Andwin Scientific 56616018
Betadine Antipurtic SolutionWalgreens
3M Vetbond (n-butyl cyanoacrylate)3M Science. تطبق على الحياة

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Palomba, S., de Wilde, M. A., Falbo, A., Koster, M. P., La Sala, G. B., Fauser, B. C. Pregnancy complications in women with polycystic ovary syndrome. Hum. Reprod. Update. 21 (5), 575-592 (2015).
  2. Doherty, D. A., Newnham, J. P., Bower, C., Hart, R. Implicati....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

DHT Pellet PreparationPolycystic Ovary Syndrome ModelHyperandrogenic Mouse ModelDHT Serum LevelsEstrous Cyclicity AnalysisGlucose Tolerance TestSubmandibular Vein BleedingVaginal Opening AssessmentAno Genital Distance MeasurementOffspring Puberty Assessment

Related Articles