Method Article

Эндотоксин деятельности Анализ для обнаружения эндотоксемии всей крови у критически больных пациентов

DOI:

10.3791/58507

June 24th, 2019

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Настоящим мы представляем протокол для измерения у постели эндотоксинной активности образцов крови человека. Эндотоксин активность анализ простой тест для выполнения и может быть полезным биомаркером в критически больных пациентов с сепсисом.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Липополисахарид, также известный как эндотоксин, является фундаментальным компонентом грамотрицательных бактерий и играет решающую роль в развитии сепсиса и септического шока. Раннее выявление инфекционного процесса, который быстро превращается в критическое заболевание, может привести к более быстрому и интенсивному лечению, что потенциально может привести к улучшению исходов для пациентов. Эндотоксинная активность (ЕА) можно использовать у постели в качестве надежного биомаркера системной эндотоксемии. Обнаружение повышенных уровней эндотоксинной активности неоднократно было показано, что связано с повышенной тяжести заболевания у пациентов с сепсисом и септическим шоком. Ассес быстро и легко выполнить. Кратко, после отбора проб, аликвот цельной крови смешивается с антиэндотоксином антитела и с добавлением LPS. Эндотоксинная активность измеряется как относительный окислительный всплеск загрунтованных нейтрофилов, обнаруженный хемиолюминесценцией. Выход асссея выражается по шкале от 0 (отсутствует) до 1 (максимальный) и классифицируется как "низкий" (0,4 единицы), "промежуточный" (0,4-0,59 единицы) или "высокий" (0,6 единицы). Подробная методология и обоснование реализации асссеа Е.А. представлены в данной рукописи.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Липополисахарид (LPS), также известный как эндотоксин, является ключевым компонентом мембранной структуры грамположительных (GN) бактерий. Он составляет около 10% клеточной стенки, будучи жизненно важным для внешней целостности мембраны и гомеостаза. Кроме того, это мощный активатор врожденнойиммунной системы хозяина 1,2.

В пробирке воздействие врожденных клеток иммунной системына LPS приводит к изменениям в экспрессии нескольких генов 3. Введение очень небольших количеств ЛПС у здоровых добровольцев человека вызывает каскад острого системного воспаления, в т....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Протокол проводится в соответствии с институциональными руководящими принципами, касающимися обработки биопроб человека и в соответствии с действующими стандартными оперативными процедурами нашей клинической лаборатории. Использование данных ЕА и клинической информации о пациентах, тестируемых в соответствии с руководящими принципами комитета по этике исследований человека нашего учреждения.

1. Лабораторное оборудование и содержимое набора ассса

  1. Храните комплект EA при 2-8 градусах по Цельсию, когда он не используется.
  2. Каждый тест EA состоит из 5 различных видов труб; использовать каждый из них для другой части ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

72-летний мужчина был госпитализирован в отделение неотложной помощи (ЭД) академической городской больницы. Несколькими днями ранее он представил своему лечащему врачу жалобу на жжение при мочеиспускании. Была рекомендована кратковременная терапия с оральным фосфомицином. Его история болезни включала гипертонию, неосложненный диабет 2 типа и доброкачественную гиперплазию предстательной железы. Его лекарства включали эналаприл, аторвастатин, тамсулозин и метформин.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Септический шок по-прежнему в настоящее время связано со смертностью выше, чем 40%, хотя этот показатель варьируется в соответствии с рассмотренными докладами16. Необходимость новых и лучших биомаркеров пропагандируется большинством экспертов в области, с тем чтобы помочь врачам в ранней диагностике, лучшее управление, и прогнозирование пациентов с септическим шоком6.

Выполнение теста EA не требует предыдущих технических знаний или сложного лабор.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Estor SpA покрыла расходы на публикацию и видеопродукцию журнала. Авторы не имеют конфликта интересов раскрыть.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Мы благодарим Паоло Брагане и Лизу Матиасен, доктор скую степень, за их обзор методологии протокола анализа. Дарио Уинтертон, MD, оказал существенную помощь в просмотре рукописи для владения английским языком.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Комплект EAASpectral Medical Inc.EAAST-20Пакет с 20 тестами + 1 контролем качества
Smart Line TLBertholdEAASLЛюминометр
Инкубатор ШейкерGRANTES-20Мини-инкубатор
шейкер VortexerVWR444-2790Вихревой прибор

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Akira, S., Takeda, K. Toll-like receptor signalling. Nature Reviews Immunology. 4 (7), 499-511 (2004).
  2. Takeda, K. Evolution and integration of innate immune recognition systems: the Toll-like receptors. Journal of Endotoxin Research. 11 (1....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Endotoxin Activity AssayEndotoxemia DetectionWhole Blood AnalysisChemiluminescence MeasurementNeutrophil Oxidative BurstSepsis BiomarkerSeptic Shock RiskLPS Antibody ComplexCritical Care TestingPoint of Care Diagnostics

Related Articles