Индукция и оценки инбридинга кресты с использованием Ant, Vollenhovia Emeryi

Краткое содержание

В этом протоколе описаны методы для проведения инбридинга кресты и для оценки успеха этих крестов, для муравей Vollenhovia emeryi. Эти протоколы являются важными для экспериментов, направленных на понимание генетическую основу системы определения пола в перепончатокрылые.

Аннотация

Генетические и молекулярные компоненты определения пола Каскад активно изучались в пчелы Apis mellifera, организм hymenopteran модель. Однако мало что известно о механизмах определения пола, в других-модель hymenopteran таксонов, как муравьи. Из-за сложного характера жизненные циклы, которые развивались в hymenopteran видов трудно поддерживать и проводить экспериментальные кресты между этими организмами в лаборатории. Здесь мы описываем методы для проведения инбридинга кресты и для оценки успеха этих кресты в муравей Vollenhovia emeryi. Вызывая инбридинга в лаборатории с использованием V. emeryi, является относительно простым из-за уникальной биологии видов. Конкретно этот вид производит андрогенетическое мужчины, и женский самцами экспонат крыло полиморфизма, который упрощает выявление фенотипы в генетических кресты. Кроме того оценки успеха инбридинга проста, как мужчины могут производиться непрерывно инбридинг кресты, в то время как самцы появляются только в четко определенных репродуктивного сезон в поле. Наш протокол допускает использование V. emeryi как модель для изучения генетические и молекулярные основы системы определения пола в муравьи.

Введение

Hymenopteran эусоциальных таксонам, как муравьи и пчелы, развивались системы определения пола haplodiploid, в котором люди, которые являются гетерозиготных на один или несколько дополнительных секс определение локусов (КУР) становятся женщины, в то время как те, которые являются гомо - или hemizygous стать мужчины (рис. 1A)¹.

Генетические и молекулярные компоненты, участвующие в секс решимость каскадных хорошо изучены в пчелы Apis mellifera,^3,2,hymenopteran модели организма^4<....

Протокол

1. полевой сбор и ведение V. Emeryi колоний в лаборатории

Примечание: Гнезда V. emeryi находятся в загнивание бревен и упал распадаясь дерево branchesin вторичных лесов по всей Японии. Этот вид показывает два вида колоний, т.е. (1) колонии производит только Лонг крылатый Королев и (2) колонии, главным образом производить короткие крылатый Королев в дополнение к небольшое количество Лонг крылатый Квинс^8,14. В этом протоколе мы собрали последний тип колоний в префектуре Исикава, Япония.

1. Соберите V. emeryi колонии в начале лета.
   Примечан....

Результаты

Результаты анализа микроспутник с использованием F₀ и поколения₁ F показал, что инбридинг кресты были произведены успешно (рис. 4)⁶. В результате инбридинга кресты, сочлененного queens были получены в течение одного месяца с момента создания экспериментальных пересечения колоний. Четверть (27,1% 8,91 SD ±) все потомство (F-₂) от инбридинга кресты был мужчина, в то время как остальная была девушки (рабоч.......

Обсуждение

Эта статья демонстрирует протоколы, которые могут использоваться для побудить инбридинга кресты и оценить появление инбридинга в муравьев V. emeryi. В экспериментах Генотипирование лиц, используемых для кроссов необходимо обеспечить, что инбридинг кресты были успешными. Однако эффективность этих тестов пересечения очевидна, как диплоидных мужчины могут быть произведены в течение года, в то время как гаплоидным мужчины могут производиться только осенью в полевых и лабораторных⁶. СИБ спарен.......

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Гипсовый порошок	Н/Д	Н/Д	Можно использовать любую марку
Древесный уголь, Активированный, Порошок	Wako	033-02117,037-02115
Стекло слайдового стекла	Н/Д	Н/Д	Можно использовать любую марку
Сухая диета для сверчков	Н/Д	Н/Д	Можно использовать любую марку
Коричневый шугер	Н/Д	Н/Д	Любая марка может быть использована
Стирол Квадратная форма Корпус	КАК ОДИН	Любой размер	Размер варьируется в зависимости от количества муравьев
Можно			использовать любую марку
Алюминиевая блочная ванна Сухая термоустановка DTU-1B	TAITEC	0014035-000
1,5 мл Гипер микротрубка, Прозрачное, Круглое дно	WATSON	131-715CS
Этанол (99,5)	Wako	054-07225
Стереоскопический микроскоп	Н/Д Н	/Д	Любая марка может быть использован
Forseps	DUMONT	0108-5-PO
Chelex 100 натриевая форма	SIGMA	11139-85-8
Фосфатный буфер физиологического раствора (PBS) таблетки, pH7.4	TaKaRa	T9181
Параформальдегид	Wako	162-16065
-Cellstain- DAPI solution	Dojindo Molecular Technologies	D523
ABI 3100xl Генетический анализатор	Прикладные биосистемы		Свяжитесь напрямую с конструктором для получения дополнительной информации.
Конфокальный лазерный сканирующий микроскоп Leica TCS SP8	Leica		Свяжитесь напрямую с конструктором для получения дополнительной информации.
HC PL APO CS2 20x/0.75 IMM	Leica		Для получения дополнительной информации обратитесь непосредственно к производителю.
HC PL APO CS2 63x/1.20 WATER	Leica		Для получения дополнительной информации свяжитесь с производителем напрямую.
Leica HyDTM	Leica		Для получения дополнительной информации обратитесь непосредственно к производителю.
Leica Application Suite X (LAS X)	Leica		Для получения дополнительной информации обратитесь непосредственно к производителю.