Summary

비보에 태아 및 태 반 개발의 분석에 대 한 높은 주파수 초음파

Published: November 08, 2018
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Summary

여기는 vivo에서 쥐에 있는 태아의 분석에 대 한 높은 주파수 초음파의 기법에 설명합니다. 이 메서드는 태아의 속 행 및 placental 매개 변수 뿐만 아니라 임신에 걸쳐 임산부 및 태아 혈액 흐름의 분석을 수 있습니다.

Abstract

초음파 이미징 인간과 동물 조직에서 기관 예외 및 종양을 검출 하는 데 사용 하는 광범위 한 방법입니다. 방법은 비-침략 적, 무해 한, 그리고 고통, 그리고 응용 프로그램은 쉽게, 빠르고, 모바일 디바이스와도 어디서 나 할 수 있습니다. 임신 중 초음파 이미징 standardly 면밀히 모니터 하는 태아의 개발에 사용 됩니다. 이 기술은 자궁내 성장 금지 (IUGR), 단기 및 장기 건강 결과와 어머니와 태아 둘 다에 대 한 임신 합병증을 평가 하기 위해 중요 하다. IUGR의 과정을 이해 하는 것은 효과적인 치료 전략 개발을 위한 불가결입니다.

이 원고에 사용 되는 초음파 시스템 작은 동물의 분석에 대 한 생산 하는 초음파 장치 이며 임신 연구를 포함 한 다양 한 연구 분야에서 사용할 수 있습니다. 우리가 자연 킬러 (NK) 세포/돛대 세포 (MC)에서 태아의 비보에 분석을 위한 시스템의 사용을 설명 하는 여기-성장 제한 새끼를 낳을 결핍 어머니. 시스템의 준비를 포함 하는 프로토콜, 전에, 측정, 그리고 B 모드의 사용 중 쥐의 처리, 컬러 도플러 모드 및 펄스 파 도플러 모드. 태아 크기, placental 크기 및 태아에 게 혈액 공급이 분석 되었다. 우리는 감소 이식 크기와 작은 반응과 중간 임신 이후에서 NK/MC-불충분 한 쥐에서 발견. 또한, MC/NK-결핍 결 석 연관 되었다 고 태아 지 umbilicalis(우) 및 높은 저항 인덱스에서 끝 확장기 흐름 반전. 프로토콜에서 설명 하는 방법 관련 및 비-관련 연구 주제에 대 한 쉽게 사용할 수 있습니다.

Introduction

초음파는 이상 인간의 귀, 약 20 kHz1보다 더 높은 가청 범위 주파수를 가진 음파 이다. 동물 처럼 박쥐, 웨일즈, 돌고래2,3, 쥐4,5, 쥐 그리고 쥐 여우 원숭이6 모든 방향이 나 통신에 대 한 초음파를 사용 하 여. 인간은 여러 가지 기술 및 의료 응용 프로그램에 대 한 초음파의 활용. 초음파 장치는 사운드 웨이브를 만들고 배포 하 고 신호를 나타내는 수 있습니다. 초음파 발생 하면 장애물, 소리 반사, 흡수 또는 그것을 통해 갈 수 있다. 초음파, 불리 한 이미징 방법으로 초음파의 응용 프로그램은 인간의 유기 조직 또는 마음 (심장 초음파)7,8, 폐9, 상선10 같은 수의학의 분석에 사용 되 ,11신장 및 비뇨 기 및 생식 책자12,13; 담 석14 및 종양15; 검색 그리고 혈관 이나 장기16,17의 관류를 평가. 초음파는 임신 중 태아 치료에 표준 방법 그리고 태아 발달 장애 또는 일찍 인식 될 수 있다. 특히, 태아의 성장 밀접 하 게 인식 가능한 IUGR를 정기적으로 모니터링 합니다. 마지막으로, 태아 혈이 성장을 제한18,19,,2021지적 수로, 모니터링할 수 있습니다.

방사선 같은 다른 방법에 비해 초음파 이미징의 주요 이점은 분석 조직의 사운드의 harmlessness 이다. 이 간단 하 고 빠른 방법은 비-침략 적, 고통, 그리고 수를 여러 번 사용. 초음파 장치의 초기 지출 비싸요; 그러나, 필요한 소모 재료는 저렴 한. 이 원고에 사용 하는 초음파 시스템은 다양 한 동물 모델에 대 한 적합 한 (즉, 쥐와 생선) 인 간에 대 한 초음파 장치는 3-15 m h z의 주파수를 필요, 15-70 mHz의 주파수는 마우스에 대 한 필요.

현재 원고 B 모드, 컬러 도플러 모드 및 펄스 파 도플러 모드의 사용에 대 한 프로토콜을 설명합니다. 설명은 마우스 뿐 아니라 성능, 데이터 수집 및 저장의 준비를 포함 한다. 이 방법은 성공적으로 적용 된 다른 마우스 긴장 전혀 임신 일 되었으며 태아 및 태 반 개발 뿐만 아니라 산 모와 태아 혈액 매개 변수를 조사 하는 데 사용할 수 있습니다. 여기, 모든 응용 프로그램 임신 MC/NK 결핍 및 제어 마우스를 사용 하는 우리의 연구에 따라 설명 되어 있습니다.

Protocol

여기서 설명 하는 모든 방법에 의해 승인 된 “Landesverwaltungsamt 뉴 스타트 인섹 센 안할트: 42502-2-1296UniMD.” 1. 실험 절차 6 8 주 오래 된 여성 MC 불충분 한 C57BL/6J-Cpa3-친구Cre /+ (Cpa3Cre /+) 생쥐와 엠씨 충분 한 C57BL/6J-Cpa3+/+ (식민지 컨트롤; Cpa3+/+) BALB/c 남성. 임신 일 (gd) 0 질 플러그의 확?…

Representative Results

이 원고에 사용 되는 초음파 시스템의 개별 구성 요소는 그림 1에 나와 있습니다. 그림 2 는 대표 초음파 이미지 획득 B 모드에서 gd5, 8, 10, 그리고 12 (B) 및 해당 이식 영역 측정 결과 (A)의 중요 한 감소 주입 영역을 보여주는 안티 CD122 처리 Cpa3Cre / + gd10 이후에서 쥐. <p class="jove_content" fo:keep-toge…

Discussion

우리의 초음파 시스템을 사용 하 여, 우리 시연 했다 태아 성장 제한 MC/NK 불충분 한 어머니에서 gd10에서에. 또한, gd10 및 12, 우리가 관찰 감소 placental 차원, 그리고 gd14에서 부재 또는 uMC/uNK 불충분 한 쥐의 일부 태아의 UmAs 끝 확장기 흐름의 복귀. 이 기호의 가난한 vascularization IUGR를 나타내는 동맥의 중요 한 저항 인덱스와 연관 되었다. 결과 임신과 태아 복지에 고 IUGR의 과정 이해에서 uMCs와 uNKs의 ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

많은 악기 이미징 회사 (특히 하 막달레나 스타 이너, 카트린 Suppelt, 산드라 메이어) 쾌적 하 고 빠른 지원에 대 한 신속 하 고 완전히 이미징 시스템 및 그것의 사용에 관한 우리의 모든 질문에 응답 하기 위한 감사 합니다. 우리는 Cpa3 식민지를 제공 하기 위한 교수 한스 Reimer Rodewald와 박사 Thorsten 파이어아벤트 (DKFZ 하이델베르크, 독일) 감사. 또한, 우리 감사 스테파니 Langwisch, 누가 마우스 식민지 담당 이었고 누가 그림 1에서 그림을 생성 합니다.

작업 및 이미징 시스템 교부 금에 의해 도이치 가운데 (DFG)에서 A.C.Z. (ZE526/6-1과 AZ526/6-2)에 DFG 우선 프로그램 1394 “돛대 세포 건강과 질병.”에 포함 된 프로젝트를 했다 투자 했다

Materials

LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb) BioLegend 123204 Klon TM-β1; 500 µg
Vevo 2100 System  FujiFilm VisualSonics Inc. Transducer MS550D-0421
Vevo LAB Software  FujiFilm VisualSonics Inc.
Isoflurane Baxter PZN: 6497131
Electrode gel Parker 12_8
Surgical tape 3M Transpore 1527-1
Eye cream Bayer PZN: 1578675
Cotton tipped applicators Raucotupf 11969 100 pieces
Depilatory cream Reckitt Benckiser 2077626
Compresses Nobamed Paul Danz AG 856110 10 x 10 cm
Ultrasound gel Gello GmbH 246000

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Cite This Article
Meyer, N., Schüler, T., Zenclussen, A. C. High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo. J. Vis. Exp. (141), e58616, doi:10.3791/58616 (2018).

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