Ici, nous présentons un protocole qui démontre la technique et les contrôles nécessaires pour l’imagerie par perfusion Laser Doppler pour mesurer le flux sanguin dans l’arrière-point de la souris.
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Article de méthode
Laser Doppler Perfusion Imaging dans l’hindlimb souris
Dans cet article
Résumé
Résumé
La récupération de flux sanguin est une mesure critique de résultats après ischémie postérieuse expérimentale ou ischémie-reperfusion. La formation image de perfusion de Doppler de laser (LDPI) est une méthode commune, non invasive, reproductible pour évaluer la récupération de flux sanguin. La technique calcule le flux sanguin global dans le tissu échantillonné à partir du changement de fréquence Doppler causé lorsqu’un laser frappe les globules rouges en mouvement. Les mesures sont exprimées en unités de perfusion arbitraires, de sorte que la non-intervention contralatérale sur la jambe est généralement utilisée pour aider à contrôler les mesures. La profondeur de mesure est de l’ampleur de 0,3 à 1 mm; pour l’ischémie postérieures, cela signifie que la perfusion cutanée est évaluée. La perfusion cutanée dépend de plusieurs facteurs, notamment la température de la peau et l’agent anesthésique, qui doivent être soigneusement contrôlés pour aboutir à des lectures fiables. En outre, la pigmentation des cheveux et de la peau peut modifier la capacité du laser à atteindre ou pénétrer dans le derme. Cet article démontre la technique de LDPI dans l’arrière-point de souris.
Introduction
L’ulcération de peau avec la guérison inadéquate de blessure est une cause principale des amputations dans les patientshumains 1. La guérison adéquate de blessure exige des niveaux plus élevés de perfusion artérielle que sont nécessaires pour maintenir la peau intacte, qui est compromise dans les patients présentant la maladie artérielle périphérique2,3,4. Plusieurs autres affections rhumatismologiques et le diabète peuvent également conduire à une microcirculation cutanée perturbée et inadéquate pour guérir lesplaies 5,
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Protocole
Les expériences sur les animaux ont été réalisées selon un protocole approuvé par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université de Washington.
1. Préparation du scanner
- Ajustez la hauteur du scanner de sorte que la distance avec le sujet numérisé est d’environ 30 cm.
- Allumez l’imageur et lancez le logiciel associé.
- Ouvrez le programme de mesure. Si le logiciel communique correctement avec le scanner, le laser infrarouge allume l’avertissement apparaîtra.
- Calibrer la machine avec des normes fournies par le fabricant (non indiquées dans la vidéo et dépen....
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Résultats
Le succès de l’IPV devrait donner lieu à des analyses répétées cohérentes des mesures, avec une variation de l’unité de perfusion ne pas plus de 100 à 150 (correspondant à environ 10 % de la perfusion moyenne habituelle pour le tapis de souris) entre les trois scans (figure 2). Comme l’indique la figure 2,les balayages répétés aident à déterminer que la souris a été convenablement équilibrée de sorte que le rapport ischémique/de contrôle reflète le mieux le flux.......
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Discussion
Une technique cohérente est essentielle pour obtenir des résultats fiables avec LDPI. Le même anesthésique, les mêmes réglages de température, la position de la souris et la même région d’intérêt doivent être utilisés tout au long du cours du temps. Différents agents anesthésiques se traduira par des valeurs de perfusion plus ou moinsélevées 9. L’anesthésie isoflurane est pratique en raison de son apparition et de son émergence rapides ainsi que de sa sécurité globale. Un pourcentage constant d’is.......
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Déclarations de divulgation
Le Dr Tang n’a aucun conflit d’intérêts à divulguer.
Remerciements
Ces travaux ont été réalisés avec l’utilisation d’installations et de ressources au VA Puget Sound Health Care Center. L’œuvre est celle de l’auteur et ne reflète pas nécessairement la position ou la politique du ministère des Anciens Combattants ou du gouvernement des États-Unis. Le Dr Tang est actuellement financé par l’intermédiaire de l’AV (Merit 5 I01 BX004975-02).
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| noir non réfléchissant | Magasin de tissu, néoprène noir recommandé par la société | ||
| F/air cannister | A.M. Bickford Inc | 80120 | |
| Couverture homéothermique avec sonde métallique rigide | Appareil Harvard Livré | également avec une sonde flexible, mais celle-ci est moins durable | |
| Isoflurane Machine d’anesthésie | Dräger | fabricants | |
| Chambre à induction d’isoflurane | VetEquip | 941444 | 2 L Chambre |
| Imageur de perfusion Doppler laser Moor | Moor Instruments | MoorLDI2-IR | Imageur à haute résolution (MoorLDI2-HIR) |
| Souris Anesthésie Cône | Plusieurs fabricants | ||
| Nair | Nair | ||
| Réservoir | Plusieurs fabricants | ||
| Surgilube | Plusieurs distributeurs |
Références
- Varma, P., Stineman, M. G., Dillingham, T. R. Epidemiology of limb loss. Physical Medicine and Rehabilitation Clinics of North America. 25 (1), 1-8 (2014).
- Farber, A. Chronic Limb-Threatening Ischemia. New England Journal of Medicine. 379 (2), 171-180 (2018).
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Réimpressions et autorisations
