Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Протокол желудочного шунтирования Roux-en-Y у крыс с использованием линейных степлеров

5.3K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/62575

⸱

21 августа 2021 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Желудочное шунтирование Roux-en-Y (RYGB) проводится для лечения ожирения и диабета. Однако механизмы, лежащие в основе эффективности RYGB, не полностью поняты, и исследования ограничены техническими трудностями, приводящими к высокой смертности на животных моделях. В этой статье приведены инструкции о том, как выполнять RYGB у крыс с высокими показателями успеха.

Аннотация

Желудочное шунтирование Roux-en-Y (RYGB) обычно выполняется для лечения тяжелого ожирения и диабета 2 типа. Однако механизм похудения и метаболических изменений не совсем понятен. Считается, что несколько факторов играют определенную роль, в том числе снижение потребления калорий, снижение поглощения питательных веществ, повышение сытости, высвобождение гормонов, способствующих сытости, сдвиги в метаболизме желчных кислот и изменения в микробиоте кишечника.

Крысиная модель RYGB представляет собой идеальную основу для изучения этих механизмов. Предыдущая работа на мышиных моделях имела высокие показатели смертности, варьирующиеся от 17 до 52%, что ограничивало их принятие. Модели крыс демонстрируют больше физиологического резерва для хирургического стимула и технически их легче принять, поскольку они позволяют использовать хирургические степлеры. Одна из проблем с хирургическими степлерами, однако, заключается в том, что они часто оставляют большой желудочный мешочек, который не является репрезентативным для RYGB у людей.

В этом протоколе мы представляем протокол RYGB у крыс, которые приводят к небольшому желудочному мешочку с использованием хирургических степлеров. Используя два степлерных пожара, которые удаляют лесомах крысы, мы получаем меньший желудочный мешочек, похожий на тот, который следует за типичным человеческим RYGB. Хирургическое сшивание также приводит к лучшему гемостазу, чем резкое деление. Кроме того, лесомах крысы не содержит желез и его удаление не должно изменять физиологию RYGB.

Потеря веса и метаболические изменения в когорте RYGB были значительными по сравнению с фиктивной когортой, со значительно более низкой толерантностью к глюкозе через 14 недель. Кроме того, этот протокол имеет отличную выживаемость 88,9% после RYGB. Навыки, описанные в этом протоколе, могут быть приобретены без предварительного микрохирургического опыта. После освоения эта процедура обеспечит воспроизводимый инструмент для изучения механизмов и эффектов RYGB.

Введение

Ожирение и сахарный диабет 2 типа стали всемирнойэпидемией1. Хотя медицинская потеря веса может улучшить диабет у пациентов, пациенты с тяжелым диабетом получают наибольшую пользу от бариатрической хирургии. Бариатрическая хирургия оказалась безопасной и эффективной при потере веса и улучшении или лечении диабета 2 типа2,3,даже у людей с давним заболеванием4. Метаболические бариатрические процедуры, такие как текущее желудочное шунтирование Roux-en-Y (RYGB) золотого стандарта, вызывают быстрое и устойчивое улучшение гомеостаза глюкозы, а также уменьшают потребнос....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Протоколы использования животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных в Университете Альберты (AUP00003000). Диаграмму, демонстрирующую анатомию RYGB, см. на рисунке 1.

1. Желудочное шунтирование Roux-en-Y

  1. Подготовка животных и оперативная установка
    1. За неделю до операции обеспечьте крыс пероральной регидратационной терапией и жидкой диетой в дополнение к их твердой диете и воде, чтобы акклиматизировать их к этой новой диете.
    2. Быстрые крысы с доступом только к воде за 12-18 ч до операции.
      1. Убедитесь, что крысы голодают на приподнятой проволочной платформе, ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Животные и жилище
36 самцов крыс Wistar были размещены парами и получали 60% стерильной диеты грызунов с высоким содержанием жиров, начиная с шестинедельного возраста(рисунок 2). В возрасте 16 недель они перенесли RYGB или фиктивную операцию. После первой послеоперационной недели крысы были возобновлены на диете с высоким содержанием жиров. Половина крыс была усыплена через 2 недели после операции, а другая половина была усыплена через 14 недель после операции.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

RYGB включает в себя создание небольшого желудочного мешочка (менее 30 мл), а также создание билиопанкреатической конечности и конечности Ру(рисунок 1). У людей билиопанкреатическая конечность обычно составляет от 30 до 50 см и транспортирует секрецию из желудочного остатка, печени и поджелудочной железы. Конечность Ру обычно составляет от 75 до 150 см в длину и является основным каналом для проглатываемой пищи. Общим каналом является оставшаяся точная кишки дисталь к тому, где соединяются д.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Ethicon поставила два 45-мм степлера линейной резки, несколько 3,5-мм степлерных перезарядок и 6-0 полипропиленовых швов. Авторы не имеют других конфликтов интересов, о которых можно было бы заявить.

Благодарности

Это исследование финансировалось Американским обществом метаболической и бариатрической хирургии Research Award. Ethicon любезно поставляла швы, степлеры и клипсы. Докторское исследование ведущего автора финансировалось Программой исследователей-клиницистов Университета Альберты и стипендией клинициана Альберты Innovates. Мы также хотели бы поблагодарить Мишель Тран за ее медицинскую иллюстрацию анатомии RYGB.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
2-0 Шелковые шовные материалыEthiconK533
3-0 Викрил Шовные материалыEthiconJ219H
4% изофлуранН/АН/Д
5% декстроза и 0,9% раствор хлорида натрия - 1000 млBaxter2B1064
50 мл конические центрифужные пробиркиFisher Scientific14-432-22
6-0 Проленовые шовные материалыEthicon8805H
Обезболивающий аппаратН/Д/Д
Бритва Для Шерсти ЖивотныхН/Д/Д
Раствор БетадинаН/Д
Иглодержатель Castrojievo с замком 14 см (гладкий изогнутый)World Precision Instruments503258
ECHELON FLEX Артикуляционный эндоскопический линейный резакEthiconEC45A
Экономичный пинцет #4World Precision Instruments501978
ENDOPATH ETS Шарнирный линейный резак 45 мм перезаряжаетEthicon6R45B
Дальний инфракрасный контроллер нагревательной прокладки с согревающей прокладкой (15,2 см Ш x 20,3 см Д), прокладкой температурного щупа и 10 одноразовыми, нестерильными протекторами рукаваKent ScientificRT-0515
Большая крыса елизаветинская ошейницаKent ScientificEC404VL-10
Жидкий диетический питательный зонд (150 мл)Bio-Serv9007
(коротко регулируемый)Bio-Serv9015
Микромоскитные щипцыWorld Precision Instruments500452
микроножницыWorld Precision Instruments503365
Мышиный рацион, с высоким содержанием жира и калорий (60%), мягкие гранулыBio-ServS3282
No. 11 Лезвие и рукоятка скальпеляН/ДН/Д
OPMI Хирургический микроскопVario ZEISSS88
Сетка для фальшполаTecniplastGM500150 Сетка
Жидкая диета для грызунов, Lieber-DeCarli '82, контроль, 4 литра/мешокBio-ServF1259
Хлорид натрия Ирригация 0,9% раствор - 500 млBaxterJF7633
Стерильные ватные тампоныН/ДН/Д
Стерильная простынян/д Н/д
/д
Термоприжигание УстановкаWorld Precision Instruments501293
Н НДержатель жидкого диетического питательного зонда для фальшпола Стерильное полотенце н/д н/д Н

Ссылки

  1. World Health Organization. Obesity and Overweight. , Available from: http://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/obesity-and-overweight (2018).
  2. Courcoulas, A. P., et al. Three-year outcomes of bariatric surgery vs lifestyle intervention for type 2 diabetes mellitus treatment. JAMA Surgery. 15213 (10)....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Гастрошунтирование у крысоперация с использованием линейного сшивающего аппаратасоздание желудочного резервуараметодика гастроеюностомиипроцедура еюно-еюностомиикрысы на диете с высоким содержанием жировтест на толерантность к глюкоземодель метаболической хирургиимодель хирургии ожирения у крыс