Method Article

نموذج فأر BALB/c الوليدي لالتهاب الأمعاء والقولون الناخر

DOI:

10.3791/63252

November 30th, 2021

In This Article

Erratum Notice

Important: There has been an erratum issued for this article. Read More ...

Erratum

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Formal Correction: Erratum: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis
Posted by JoVE Editors on 3/07/2022. Citeable Link.

An erratum was issued for: A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis. The Representative Results section was updated.

Figure 1 was updated from:

Timeline diagram of NEC induction; process includes LPS, formula, hypoxia, reoxygenation stimulation.
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.

to:

NEC induction timeline diagram, days after birth, LPS-formula hypoxia reoxygenation protocol
Figure 1: Induction of the BALB/c NEC model process. (A) The mice in the NEC group were separated from the dam at birth until they were 4 days old (on Day 4) and fasted that night. The NEC model was induced from Day 5 onwards after birth and lasted for 5 days. Intestinal tissue specimens were collected on Day 10 or earlier. The mice in the Cont. group were housed with and nursed by the dam. (B) The sequence of operations for each day after inducing the NEC model. Abbreviations: Cont. = control; NEC = necrotizing enterocolitis; LPS = lipopolysaccharide. Please click here to view a larger version of this figure.

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التهاب الأمعاء والقولون الناخر (NEC) هو أشد أمراض الجهاز الهضمي (GI) التي تحدث غالبا عند الأطفال الخدج ، وخاصة الرضع منخفضي الوزن عند الولادة ، مع ارتفاع معدل الوفيات وعدم وضوح الإمراض. قد يكون سبب NEC مرتبطا بتشوهات الجهاز المناعي الالتهابي. نموذج حيواني NEC هو أداة لا غنى عنها لأبحاث المناعة لمرض NEC. عادة ما تستخدم النماذج الحيوانية NEC الفئران الوليدة C57BL / 6J. نادرا ما تستخدم الفئران الوليدة BALB / c. وقد أظهرت الدراسات ذات الصلة أنه عندما تصاب الفئران بالعدوى ، يكون تمايز الخلايا Th2 سائدا في الفئران BALB / c مقارنة بالفئران C57BL / 6J. وقد أشارت الدراسات إلى أن حدوث وتطور NEC يرتبط بزيادة في الخلايا المساعدة التائية من النوع 2 (Th2) ويرافقه عموما عدوى. لذلك ، استخدمت هذه الدراسة الفئران BALB / c حديثي الولادة للحث على نموذج NEC مع خصائص سريرية مماثلة وتغيرات مرضية معوية مثل تلك التي لوحظت في الأطفال الذين يعانون من NEC. هناك ما يبرر إجراء مزيد من الدراسة لتحديد ما إذا كان يمكن استخدام هذا النموذج الحيواني لدراسة استجابات خلايا Th2 في NEC.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التهاب الأمعاء والقولون الناخر (NEC) هو أشد أمراض الجهاز الهضمي (GI) التي تحدث غالبا عند الأطفال الخدج ، وخاصة الرضع منخفضي الوزن عند الولادة ، مع ارتفاع معدل الوفيات وعدم وضوح الإمراض. قد يكون سبب NEC مرتبطا بتشوهات الجهاز المناعي الالتهابي. نموذج حيواني NEC هو أداة لا غنى عنها لأبحاث المناعة لمرض NEC. عادة ما تستخدم النماذج الحيوانية NEC الفئران الوليدة C57BL / 6J. نادرا ما تستخدم الفئران الوليدة BALB / c. وقد أظهرت الدراسات ذات الصلة أنه عندما تصاب الفئران بالعدوى ، يكون تمايز الخلايا Th2 سائدا في الفئران BALB / c مقارنة بالفئران C57BL / 6J. وقد أشارت الدراسات إلى أن حدوث وتطور NEC يرتبط بزيادة في الخلايا المساعدة التائية من النوع 2 (Th2) ويرافقه عموما عدوى. لذلك ، استخدمت هذه الدراسة الفئران BALB / c حديثي الولادة للحث على نموذج NEC مع خصائص سريرية مماثلة وتغيرات مرضية معوية مثل تلك التي لوحظت في الأطفال الذين يعانون من NEC. هناك ما يبرر إجراء مزيد من الدراسة لتحديد ما إذا كان يمكن استخدام هذا النموذج الحيواني لدراسة استجابات خلايا Th2 في NEC.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يحدث التهاب الأمعاء والقولون الناخر (NEC)، وهو أشد أمراض الجهاز الهضمي (GI)، لدى معظم الأطفال الخدج (>90٪)، وخاصة أولئك الذين يعانون من انخفاض الوزن عند الولادة (VLBW)1. في الرضع VLBW ، يتراوح معدل الإصابة بالمرض من 10٪ إلى 12٪ ، وتتراوح وفيات الأطفال الذين تم تشخيصهم ب NEC بين 20٪ و 30٪ 2,3. قد يكون سبب NEC مرتبطا بإصابات الغشاء المخاطي ، وغزو البكتيريا المسببة للأمراض ، والتغذية المعوية ، والتي يمكن أن تؤدي إلى استجابات التهابية وتحريض الإصابات المعوية في المضيفين الحساسين 3. التسبب في NEC غير واضح. تظهر الأبحاث ذات الصلة أن الاستجابة المناعية للرضيع المصاب غير....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على هذا البحث من قبل لجنة الأخلاقيات الطبية في مركز قوانغتشو الطبي للنساء والأطفال (رقم 174A01) ولجنة أخلاقيات الحيوان التابعة لمركز جوانزو فوريفرجين للعلوم البيولوجية للحيوانات (IACUC-G160100). تم تربية جميع الحيوانات في نفس الغرفة في بيئة محددة خالية من مسببات الأمراض (SPF) ، وتم إجراء التجارب في بيئة تقليدية. كانت الفئران المستخدمة للتكاثر تبلغ من العمر 7-8 أسابيع. تم فصل الفئران لتحفيز NEC (n = 72) عن السد في اليوم 4 ، وتم الاحتفاظ بالسدود (n = 14) في القفص الأصلي ورعاية مجموعة الفئران الضابطة (Cont.) (n = 24).

1. إعداد الكواشف والأجهزة

  1. تحضير بديل الحليب للفئران BALB / c في النسبة المقابلة (مسحوق ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تحفيز نموذج BALB / c mouse NEC عن طريق تغذية الصيغة ، وتغذية LPS ، ونقص الأكسجة ، والتحفيز البارد. خلال فترة الحث ، لوحظت الفئران لأمراض الأمعاء ، وخصائص البراز ، وتغيرات وزن الجسم ، والبقاء على قيد الحياة يوميا. صور تمثيلية للأمعاء الدقيقة أثناء تحريض NEC ؛ تمثل الأرقام في الصورة درجة علم الأمراض المعوية من 0 (ظهارة طبيعية) إلى 4 (الأكثر حدة) (الشكل 3A). كانت درجة علم الأمراض المعوية أعلى بكثير في مجموعة NEC منها في مجموعة Cont. (الشكل 3B). تمثل الأرقام في ا.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

NEC هو حالة الطوارئ الأكثر شيوعا في الجهاز الهضمي لحديثي الولادة ، مع ارتفاع معدل الإصابة والوفيات ، وخاصة عند الأطفال الخدج1،2،3. ومع ذلك ، فإن التسبب في المرض لا يزال غير واضح. ويعتقد حاليا أن تلف الغشاء المخاطي ، وغزو مسببات الأمراض ، والتغذية المعوية هي عوامل عالية الخطورة ل NEC3. حتى الآن ، فإن الحيوانات المستخدمة في نموذج NEC هي أساسا الخنازير والجرذان والفئران. استخدمت معظم الدراسات الفئران C57BL/6.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإفصاح عنه.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يشكر المؤلفون بنك الموارد البيولوجية السريرية في مركز قوانغتشو الطبي للنساء والأطفال على توفير العينة السريرية ومركز جوانزو فوريفرجين للعلوم البيولوجية للحيوانات على توفير الفئران. تم دعم هذا البحث من قبل منحة المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين 81770510 (R.Z).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
الإيثانولالمطلق سينوفارم الكاشف الكيميائي المحدودة.100092683
حليب الماعز المجفف  بيتاغ 71795558417
صبغسينوفارم الكاشف الكيميائي المحدودة.G1003
IsofluraneRWD ، شنتشن مكافأة الحياة التكنولوجيا المحدودة.R510   
LPSSigma-AdrichL2880
الأكسجين الطبيمختلف
المجهرنظام التصوير نيكون(DS-Ri2)
الراتنج المحايدSinopharm Chemical Reagent Co.، LTD.10004160
البارافينمختلفأنواع
حليب الأطفال المجفف الخدجأبوت57430
زيلينسينوفارم الكاشف الكيميائي المحدودة.10023418
1٪ حمض الهيدروكلوريكمختلف
10٪ فورمالينليجينDF0110
محلول نيكون

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Horbar, J. D., et al. Mortality and neonatal morbidity among infants 501 to 1500 grams from 2000 to 2009. Pediatrics. 129 (6), 1019-1026 (2012).
  2. Stoll, B. J., et al. Neonatal outcomes of extremely preterm infants from the NICHD Neonat....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Necrotizing EnterocolitisBALB c Mouse ModelNeonatal Mouse ModelT Cell PolarizationTh2 Cell DifferentiationIntestinal PathologyHypoxia ExposureLPS GavageHematoxylin Eosin StainingIntestinal Necrosis

Related Articles