Avaliação da Sensibilidade Mecânica das Costas no Rato para Investigação Mecanicista da Dor Lombar Crônica

Resumo

Para desenvolver novas intervenções terapêuticas para a prevenção e manejo da dor nas costas, modelos animais são necessários para examinar os mecanismos e a eficácia dessas terapias a partir de uma perspectiva translacional. O presente protocolo descreve o teste BMS, um método padronizado para avaliar a sensibilidade mecânica de retorno no rato.

Resumo

A dor lombar é a principal causa de incapacidade em todo o mundo, com dramáticas consequências pessoais, econômicas e sociais. Para desenvolver novas terapêuticas, são necessários modelos animais para examinar os mecanismos e a eficácia de novas terapias a partir de uma perspectiva translacional. Vários modelos de roedores de dor nas costas são utilizados nas investigações atuais. Surpreendentemente, no entanto, nenhum teste comportamental padronizado foi validado para avaliar a sensibilidade mecânica em modelos de dor nas costas. Isso é fundamental para confirmar que animais com suposta dor nas costas apresentam hipersensibilidade local a estímulos nociceptivos e para monitorar a sensibilidade durante intervenções destinadas a aliviar a dor nas costas. O objetivo deste estudo é estabelecer um teste simples e acessível para avaliar a sensibilidade mecânica no dorso de ratos. Uma gaiola de teste foi fabricada especificamente para este método; comprimento x largura x altura: 50 x 20 x 7 cm, com uma malha de aço inoxidável na parte superior. Esta gaiola de teste permite a aplicação de estímulos mecânicos nas costas. Para realizar o teste, a parte de trás do animal é raspada na região de interesse, e a área de teste é marcada para repetir o teste em dias diferentes, conforme necessário. O limiar mecânico é determinado com filamentos de Von Frey aplicados aos músculos paraespinhais, utilizando o método up-down descrito anteriormente. As respostas positivas incluem (1) espasmos musculares, (2) arqueamento (extensão das costas), (3) rotação do pescoço (4) coçar ou lamber as costas e (5) escapar. Este teste comportamental (teste de Sensibilidade Mecânica das Costas (BMS)) é útil para pesquisas mecanicistas com modelos de roedores de dor nas costas para o desenvolvimento de intervenções terapêuticas para a prevenção e manejo da dor nas costas.

Introdução

A lombalgia (lombalgia) é a principal causa de incapacidade em todo o mundo, o que tem dramáticas consequências pessoais, econômicas e sociais 1,2,3,4. Todos os anos, aproximadamente 37% da população é afetada pela lombalgia⁵. A lombalgia geralmente se resolve dentro de algumas semanas, mas se repete em 24%-33% dos indivíduos, tornando-se crônica em 5%-10% dos casos². Para compreender os mecanismos e impactos da lombalgia, bem como os efeitos de diferentes intervenções terapêuticas, vários mode....

Protocolo

O protocolo experimental foi aprovado pelo comitê de cuidados com animais da Université du Québec à Trois-Rivières e está em conformidade com as Diretrizes do Conselho Canadense de Cuidados com os Animais e as Diretrizes do Comitê de Pesquisa e Questões Éticas da Associação Internacional para o Estudo da Dor (IASP). O presente estudo utilizou seis ratos Wistar machos (peso corporal: 320-450 g; idade: 18-22 semanas). Os animais foram obtidos de uma fonte comercial (ver Tabela de Materiais). Os dados desses ratos são da amostra maior de um estudo anterior³⁰.

1. Preparação experimental

Resultados

O método foi utilizado em estudo anterior, no qual foram apresentados dados completos e estatísticas para comparar a sensibilidade mecânica entre CFA e ratos controle³⁰. Dados individuais representativos (média dos limiares esquerdo e direito) de seis ratos incluídos no estudo anterior são apresentados na Figura 3 e na Tabela 1. No início do estudo, a sensibilidade mecânica foi semelhante entre os grupos. A injeção intramuscular de CFA nos músculos lo.......

Discussão

Etapas críticas
O teste BMS é um método simples para avaliar a sensibilidade mecânica no dorso de ratos, seja em um ponto de tempo ou repetidamente ao longo de dias ou semanas, quando se espera que ocorram mudanças (modelos de dor) ou após intervenção farmacológica ou não farmacológica. Questões críticas do método incluem a gaiola de teste, cujas dimensões devem garantir que o rato esteja confortável, mas não se mova demais. As costas do animal devem permanecer acessíveis através do teto de malha para.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Aerrane (isoflurano, USP) - Apenas para uso veterinário	Baxter	NDC 10019-773-60	Anestésico por inalação; DIN 02225875, para induzir anestesia
Adjuvante Completo de Freund (CFA)	Fisher Scientific	#77140	Emulsão de água em óleo de Adjuvante Completo de Freund (CFA) com células mortas de Mycobacterium butyricum.
Charles River de		ratos Wistar machos	: 320– 450 g; Idade: 18-22 semanas.
Vaporizador Penlon Sigma Delta	Penlon	990-VI5K-SVEEK	Penlon Sigma Delta Vaporizer usado para anestesia
Marcador permanente Sharpie Marcador permanente	Sharpie	BC23636	Ponta fina, Gaiola de
teste	Largura		: 20 cm;  Comprimento: 50 cm; Altura de baixo para cima: 40 cm; Altura da malha inferior ao topo da gaiola: 7 cm; Espessura da parede: 5 mm; Malha: fio de 1 mm com uma distância entre fios de 8 mm
Von Frey Filaments	Aesthesio, Avaliador Sensorial Tátil Preciso	514000-20C	Filamentos de 0,07 g a 26 g
Wahl Professional Animal, ARCO Cordless Pet Clipper, Aparador de Grooming	Kit Wahl	#8786-1201	Aparador de pêlos de animais, para fins de barbear, lâmina zero

Peso corporal dos Laboratórios , preta personalizada