هنا ، نقدم بروتوكولا للتوليف الموسع ل ثلاثي بوتيل الوسيط (5-تولوين سلفونيل -5h-pyrrole [2،3-b] بيرازين -2-يل) كربامات (ACT051-3) من Upatinib.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تم تطوير Upatinib ، وهو دواء مثبط لجانوس كيناز ، من قبل شركة للتكنولوجيا الحيوية لعلاج أمراض المناعة. مركب ثلاثي بوتيل (5-تولوين سلفونيل -5h-بيرول [2،3-ب] بيرازين -2-يل) كربامات (ACT051-3) هو وسيط مهم من Upatinib. حتى الآن ، لم يتم الإبلاغ عن الإنتاج الصناعي الثابت لهذا المركب الوسيط (ACT051-3). في هذه الدراسة ، وصفنا طريقة التوليف المحددة وعملية المركب ACT051-3 من حيث التوليف المختبري ، والتوسع التجريبي ، والإنتاج الصناعي. أثناء استكشاف مسار العملية ل ACT051-3 ، تم إجراء العديد من التعديلات والتحسينات المناسبة على ظروف التفاعل ، مما أدى في النهاية إلى التطوير الناجح لعملية الإنتاج الصناعي المثلى ل ACT051-3. تضاعف وقت التفاعل تقريبا عن طريق تغيير حالة كربونات البوتاسيوم المشاركة في التفاعل ، مما أدى إلى تحسين كفاءة التفاعل بشكل كبير. بالإضافة إلى ذلك ، من خلال إدخال N ، N-diisopropylethylamine (DIPEA) إلى التفاعل ، تم تقليل كمية المحفز باهظ الثمن Pd (OAc) 2 بمقدار 2.5 ضعف ، مما أدى إلى خفض تكاليف الإنتاج بشكل كبير ، مما يؤكد جدوى مسار العملية هذا والإنتاج الصناعي ل ACT051-3 ، وتلبية طلب السوق على هذا الوسيط المهم.
المقدمة
أصبح Upatinib مثبطا شائعا عالميا ل Janus kinase 1 (JAK1) لعلاج اضطرابات المناعة في السنوات الأخيرة 1,2. أظهر هذا الدواء آثارا علاجية كبيرة على التهاب المفاصل الصدفي (PsA) 3،4 ، والتهاب المفاصل الروماتويدي (RA) 5،6،7 ، والتهاب الجلد التأتبي (AD) 8،9. بالإضافة إلى ذلك ، نظرا لانتقائيتهاالعالية 10 ، فإن Upatinib لديها مجموعة واسعة من التطبيقات السريرية. تيرت بوتيل (5-توسيل-5h-بيرول....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. توليف النطاق التجريبي للمركبات ACT051-2 و ACT051-3
- تخليق 2-برومو-5-توسيل-5H-بيرولو [2،3-ب] بيرازين (ACT051-2)
- في دورق مستدير القاع ، قم بإذابة 50.0 جم من المركب 2-برومو-5H-بيرولو [2،3-ب] بيرازين (ACT051-1 ؛ 0.25 م) في 15 مل من N ، N-ثنائي ميثيل فورماميد (DMF ؛ 3 فولت).
- أضف 65.3 جم من ثنائي أيزوبروبيل إيثيل أمين (DIPEA ؛ 0.51 م) إلى محلول التفاعل تحت حماية النيتروجين (توفير حاجز للغاز والرطوبة) وقم بتبريد درجة الحرارة إلى 0-5 درجة مئوية من خلال حمام مائي بارد. لحماية النيتروجين ، قم بضخ ضغط المفاعل إلى -0.75-0.8 ميجا باسكال ، ثم مرر N2 لموازنة الضغط عند 0.1 ميجا باسكال.
- أضف 60.20 جم من TsCl المذاب في....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
توفر هذه الدراسة عملية التوليف الموسعة للوسيط المهم ACT051-3 من Upatinib (الشكل 1 والشكل 2). يوضح قسم البروتوكول (الخطوات 1-3) على وجه التحديد التوليف بدرجة الجرام ، والتوليف على نطاق الكيلوجرام التجريبي ، وخطوة الإنتاج الموسعة للمركب ACT051-2 و ACT051-3 المتوسط.
في سياق استكشاف المسار الأمثل للمركب ACT051-2 ، كما هو موضح في الجدول 1 ، وجد أن TsCl الصلب كان أكثر مشاركة في التفاعل من السائل TsCl (المذاب في DMF ، الخطو.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تؤثر ظروف تفاعل التوليف ، بما في ذلك درجة حرارة التفاعل والوقت واختيار كواشف التفاعل ونسبة المواد ، على جدوى التفاعل والغلة والنقاء وتكلفة الإنتاج ، خاصة بالنسبة لتوسيع نطاق الإنتاج.
في التوليف المختبري ل ACT051-2 ، يمكن استخدام TsCl في شكل سائل (مذاب في DMF ؛ الخطوة 1.1.3) في التفاعل ؛ ومع ذلك ، فهي ليست مناسبة للتوليف التجريبي أو الإنتاج الصناعي ، لأن استخدام السائل TsCl لهذا التفاعل يزيد من كمية المذيب في نظام التفاعل ، مما يؤدي إلى المزيد من سوائل النفايات. نتيجة لذلك ، اخترنا TsCl الصلب ل.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
لا توجد اعترافات لذكرها هنا.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 2-bromo-5H-pyrrolo[2،3-b] pyrazine | Nanjing Cook Biotechnology Co.، Ltd. | 19120110 | |
| 1،4-ديوكسان | لياونينغ كوك التكنولوجيا الحيوية المحدودة | كاشف | |
| 1H NMR | Bruker AVIII 500 | ||
| 37٪ حمض الكلوريد الصف الجزيئي | NEON | 02618 NEON | |
| 4-تولوين سلفونيل كلوريد (TsCl) | نانجينغ كوك التكنولوجيا الحيوية المحدودة. | AR A2010137 | |
| مضاد للدجاج IgY (H + L) ، ممتص للغاية ، CF & nbsp ؛ 488 A الجسم المضاد المنتج في الحمار | Sigma-Aldrich | SAB4600031 | |
| IgG المضاد للفأر (H + L) ، F (ab & prime;)2 | سيجما ألدريتش | SAB4600388 | |
| BD FACSكانتو الثاني | BD Biosciences | BF-FACSC2 | |
| BD FACSDiva CS & حبات البحث T (CS& ; حبات البحث) | BD Biosciences | 655050 | |
| BD FACSبرنامج ديفا 7.0 | BD Biosciences | 655677 | |
| ألبومين مصل الأبقار | Sigma-Aldrich | A4503 | |
| أجهزة الطرد المركزي 5702 R | Eppendorf | Z606936 | |
| فراغ المياه المتداولة | قوانغتشو Zhiyan Instrument Co.، Ltd | SHZ-D ( ) | |
| CML اللاتكس ، 4٪ وزن / v | Invitrogen | C37253 | |
| Diatomite | Guangzhou Qishuo Chemical Co.، Ltd. | / | |
| مجفف فراغ دوار مزدوج مخروط | جيانغسو يانغ يانغ مصنع المعدات الكيميائية شركة | SZE-500T | |
| غلاية المينا | جيانغسو يانغ يانغ مصنع المعدات الكيميائية Inc | CS-03-002 | 1000L / 2000L |
| هيبتان | نانجينغ كوك التكنولوجيا الحيوية المحدودة | كاشف | |
| HPLC | قوانغتشو aoyi التكنولوجيا للتجارة المحدودة | LC-2030C 3D | |
| المبخرات الدوارة على نطاق واسع | قوانغتشو Xingshuo Instrument Co.، Ltd. | RE-2002 | |
| درجة حرارة منخفضة ودرجة حرارة ثابتة حمام رد فعل | التحريك قوانغتشو Yuhua Instrument Co.، Ltd | XHDHJF-3005 | |
| تعميم سائل التبريد ذات درجة الحرارة المنخفضة | قوانغتشو Jincheng Scientific Instrument Co.، Ltd | XHDLSB-5/25 | |
| Megafuge 8R | Thermo Scientific | TS-HM8R | |
| N ، N-Diisopropyl ethylamine (DIPEA) | Apicci Pharm | الكاشف | |
| N-dimethylformamide (DMF) | قوانغتشو بيل التكنولوجيا الحيوية المحدودة | كاشف | |
| عام حمض الأوكتانويد | Sigma-Aldrich | O3907 | |
| Pd (OAc) 2 | Xi'an Catalyst New Materials Co.، ltd. | 200704 | |
| الفوسفات المخزنة محلول ملحي | سيجما ألدريتش | 1003335620 | |
| كربونات البوتاسيوم (K2CO3) | قوانغتشو تشونغهوا التجارة المحدودة | الكاشف | |
| Tert amyl الكحول | Nanjing Cook Biotechnology Co.، Ltd. | كاشف | |
| tert-Butyl carbamate | Nanjing Cook Biotechnology Co.، Ltd. | كاشف | |
| خلاط حراري حرارة / بارد | KASVI | K80-120R | |
| التولوين | لياونينغ طبخ التكنولوجيا الحيوية المحدودة | كاشف | |
| فراغ فرن التجفيف | قوانغتشو Yuhua Instrument Co.، Ltd | DZF-6090 | |
| ماء | / | / | |
| Xantphos | Liaoning طبخ التكنولوجيا الحيوية المحدودة | Asp20-44892 |
المراجع
- Kerschbaumer, A., et al. Points to consider for the treatment of immune-mediated inflammatory diseases with Janus kinase inhibitors: a systematic literature research. RMD Open. 6 (3), e001374(2020).
- Fragoulis, G. E., Brock, J., Basu, N., McInnes, I. B., Siebert, S.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
