Prélèvement sanguin de la veine sous-clavière chez des rats conscients

Résumé

Nous présentons ici une combinaison de méthodes efficaces de restriction chez le rat et de ponction veineuse sous-clavière qui permettent une collecte de sang rapide, sûre et répétée chez le rat sans anesthésie.

Résumé

Il existe plusieurs méthodes établies pour obtenir des échantillons de sang répétés de rats, les méthodes les plus couramment utilisées étant le prélèvement latéral de la veine caudale sans anesthésie et le prélèvement de la veine jugulaire sous anesthésie. Cependant, la plupart de ces méthodes nécessitent une assistance et un matériel anesthésique et posent parfois des difficultés en termes de prélèvement sanguin ou de mauvaise qualité des prélèvements sanguins. De plus, ces méthodes de prélèvement sanguin consomment beaucoup de temps et de ressources humaines lorsque des prélèvements sanguins répétés sont nécessaires pour un grand nombre de rats. Cette étude présente une technique de prélèvement sanguin répétitif chez des rats non anesthésiés par un seul individu compétent. Des échantillons de sang très satisfaisants peuvent être obtenus en ponctionnant la veine sous-clavière. La méthode a démontré un taux de réussite global impressionnant de 95 %, avec un temps médian de seulement 2 minutes entre la contention du rat et la fin de la collecte de sang. De plus, le fait d’effectuer des prélèvements sanguins consécutifs dans la plage désignée n’inflige aucun dommage aux rats. Cette méthode mérite d’être encouragée pour la collecte de sang, en particulier dans les études pharmacocinétiques à grande échelle.

Introduction

Les rats sont l’un des animaux de laboratoire les plus courants, et il existe de nombreuses façons d’obtenir des échantillons de sang. Pour les expériences impliquant un seul prélèvement sanguin au stade final, une quantité suffisante de sang peut être obtenue par ponction cardiaque ou prélèvement sanguin de l’aorte abdominale¹. Cependant, certaines études nécessitent des prélèvements sanguins répétés sur des rats pour des analyses sanguines ou biochimiques de routine, en particulier dans les études de pharmacocinétique et de toxicologie, où des prélèvements sanguins répétés sont nécessaires pour déterminer l’absorption, la distribution et le m....

Protocole

Cette étude a respecté les lignes directrices énoncées dans la 8e édition du Guide sur le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire¹³. La recherche a reçu l’approbation du comité d’éthique du deuxième hôpital de l’Université de Lanzhou et a été documentée conformément aux directives ARRIVE 2.0¹⁴. Douze rats Wistar en bonne santé (six mâles pesant entre 290 et 330 g et six femelles pesant entre 250 et 280 g) âgés de 12 à 16 semaines ont été hébergés dans le laboratoire animalier BPL de l’Université de Lanzhou pendant 3 jours avant l’expérience proprement dite. Les cages à rats utilisées étaient de type R5, mesurant....

Résultats

Les échantillons de plasma de haute qualité présentent une teinte, une clarté et une transparence jaune pâle, dépourvues de toute teinte rouge ou coagulation, comme le montre la figure 2A. La figure 2B montre l’hémolyse (côté gauche) ou la coagulation (côté droit) à la suite de procédures inappropriées, respectivement. Au cours de 96 séances de prélèvement sanguin en 4 jours, les temps moyens de prélèvement sanguin pour les groupes A et .......

Discussion

Bien que le prélèvement sanguin dans la veine caudale soit la méthode la plus courante pour les prélèvements sanguins répétés chez le rat, elle peut être influencée par les médicaments anesthésiques et, en raison de la petite taille de la veine caudale, la quantité de sang qui peut être prélevée en une seule fois est limitée, ce qui entraîne une durée de prélèvement sanguin plus longue ^4,5. Bien que les systèmes de chromatographie liquide (HPLC) et de spectrométr.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
0,75 % de solution saline normale	Gansu Fuzheng Pharmaceutical Technology Co., Ltd.	&mdash ; &mdash ;	Solution d’héparine sodique préparée
Pipette Pasteur 1 mL	Biosharp	BS-XG-01-NS	Seringue de prélèvement sanguin
de 1 mL (26 G, 0,45 mm x 12 mm)	Shinva Medical Instrument Co.,Ltd.	0,45 * 12RWLB	Prélèvement sanguin
Tube Eppendorf de 1,5 ml	Biosharp	BS-15-M	Stockage et collecte de sang
Alcool médical à 75 %	Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.	&mdash ; &mdash ;	Désinfection du site de prélèvement de sang de rat
Support de tube à centrifuger	Biosharp	BS-05/15-SM60	&mdash ; &mdash ;
Balance électronique	Shanghai PUCHUN Measure Instrument Co., Ltd.	JE1002	Peser
l’héparine sodique injectable	Hebei Changshan Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd.	&mdash ; &mdash ;	Rincer la seringue et le tube EP ; diluer avec une solution saline normale à 25 U/mL
Centrifugeuse à basse température	HuNan Xiang Yi Centrifuge Instrument  ; Co., Ltd.	; H1750R	Séparation du sérum