De volledige tekst protocol voor deze experimentele aanpak is beschikbaar in <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0401/current/abstract ">Current Protocols in Cell Biology</a> .

De auteurs hebben niets te melden.

belangrijke componenten van de lichtmicroscoop

Major Components of the Light Microscope

Het licht microscoop is een basisinstrument voor de celbioloog, die moet een grondig begrip van hoe het werkt, hoe het dient te worden aangepast voor verschillende toepassingen, en hoe het moet worden gehandhaafd als nodig is om een ​​maximale beeld-vorming van de capaciteit en de resolutie te verkrijgen. De onderdelen van de microscoop worden in detail beschreven hier.

Belangrijke componenten van de lichtmicroscoop

De lichtmicroscoop is een basisinstrument voor de celbioloog, die een grondige kennis moet hebben van de werking ervan en hoe deze moet worden uitgelijnd voor ...

Lichtmicroscopen zijn essentiële instrumenten in biomedisch onderzoek. De optische componenten maken een veel hogere beeldresolutie mogelijk dan waarneming met het blote oog. Door microscopie te combineren met digitale beeldbewerking kunnen onderzoekers de zichtbaarheid van het beeld verbeteren en nauwkeurige kwantitatieve metingen verrichten.Deze video leidt u door de belangrijkste componenten van de microscoop en hun functies. Hallo, ik ben Victoria Sanon Frolic van de Core Optical Imaging Facility aan het University of Texas Health Science Center in San Antonio. Vandaag laat ik u de belangrijkste onderdelen van uw levensvatbaarheidsmicroscoop en hun basisfuncties zien.Laten we een rondleiding geven langs uw microscoop. Voordat u een microscoop gebruikt, is het raadzaam om bekend te raken met de componenten en hun functies. Dit is een Nikon eclipse TI omgekeerde samengestelde lichtmicroscoop, uitgerust voor zowel transmissielicht- als epifluorescentiemicroscopie.De richting langs de as van de microscoop wordt aangeduid als de Z-as en de loodrechte richtingen als de X- en Y-as. Eerst onderzoeken we de oculairbuis, het revolverheadstuk met de objectieven en de tafel. Dit zijn de belangrijkste beeldvormende componenten van de microscoop.De onderdelen vormen de interface tussen de waarnemer en de microscoop. Door de basis van de binoculaire oculairhouders vast te pakken, kunt u de interpupillaire afstand aanpassen door ze dichter bij elkaar of verder uit elkaar te bewegen. Hierdoor kunt u comfortabel met beide ogen kijken.Tegelijkertijd kan nu ook de focus van het oculair voor elk oog afzonderlijk worden ingesteld. De vergroting van het oculair staat op de huls vermeld. Camera's worden routinematig op microscopen gemonteerd voor beeldacquisitie.Deze specifieke microscoop maakt gebruik van een C-mount-adapter om een CCD-camera aan de zijpoort van de microscoopbehuizing te bevestigen. Een knop op de microscoop wordt gedraaid om een prisma te positioneren, zodat de beeldvormende lichtstralen van de oculairs weg en naar de camera worden geleid, die op de camerapoort is gemonteerd. De verschillende objectieven, die grotendeels de vergroting en resolutie bepalen, zijn gemonteerd op een draaibare revolver.Elk objectief is voorzien van specificaties zoals de vergroting, de numerieke apertuur, het vereiste immersiemedium zoals olie, glycerine of lucht, de dikte van het dekglas en andere speciale kenmerken zoals de verlichtingsmodus, waarbij het licht uit het oculair en de neusstukken ongefocust is of naar oneindig wordt geprojecteerd. De tubuskop bevat een positieve focuslens die het beeldvormende licht in focus brengt voor het oculair of de camera. Nu ik u de beeldvormende componenten van de microscoop heb getoond, kijken we naar de onderdelen die ons helpen om een beeld scherp te stellen en aanpassingen aan het doorgelaten licht aan te brengen.Vervolgens bekijken we de objecttafel, de mechanische houder waarin het preparaatglas wordt geplaatst. Door aan de knoppen te draaien, kunt u het preparaat in de x- en y-richting verplaatsen. In de configuratie van de omgekeerde microscoop is de tafel gefixeerd en wordt het preparaat scherpgesteld door de objectieven langs de Z-as omhoog en omlaag te bewegen met behulp van de grove en fijne focusknoppen op de microscoopbehuizing.Nu bekijken we de componenten voor doorlichtingsverlichting van de lichtmicroscoop, die het licht leveren voor de visualisatie van uw preparaten. Ten eerste hebben we de lamp en de behuizing, die het licht leveren voor de verlichting van het preparaat. Bij lichtmicroscopie is de lamp doorgaans een halogeenlamp met een laag voltage en een wolfraamfilament, die kan worden afgesteld om de lichtintensiteit te regelen. Er kan een sluiter na de lichtbron worden geplaatst om de duur van de belichting te controleren.Direct na de lichtbron bevindt zich een veldiafragma ter aanpassing van het beeldveld; het diafragma regelt het gebied of veld van het preparaat dat moet worden verlicht. Vervolgens volgt het component dat bekend staat als de condensor, waarvan de hoofdfunctie is om een heldere, uniforme verlichting op het preparaat te focussen. Het condensor- of irisdiafragma onderaan de condensor regelt de hoek van de condensorconus voor de verlichting van het preparaat.Aanpassing van dit diafragma reguleert de grootte en de numerieke apertuur van de lichtkegel die op het preparaat is gericht, wat resulteert in een correcte belichting, contrast en scherptediepte; de optische afstelling van het condensor diafragma zorgt voor een juiste vulling van het voorste lenselement van het objectief. Idealiter moet deze afstelling voor elk objectief worden uitgevoerd om het volledige potentieel van de lens te benutten. Voor epifluorescentie-verlichting is de lichtbron doorgaans een xenon- of kwikdamplamp.Op onze microscoop bevindt zich een op kwik gebaseerde lichtbron; booglampen moeten met zorg worden gehanteerd, aangezien ze kunnen exploderen bij onjuist gebruik. Draag altijd handschoenen bij het installeren van de lamp, omdat vingerafdrukken en vuil hotspots kunnen veroorzaken waardoor de lamp kan barsten. Het wordt sterk aanbevolen om een booglamp niet langer te gebruiken dan het aantal uren waarvoor deze is gespecificeerd.Het fluorescentielichtpad bevat een veldiafragma en een apertuurdiafragma, vergelijkbaar met het transmissielichtpad. Na deze diafragma's komt het licht een set filters tegen die de lichtbandbreedte selecteren en de verlichting naar het objectief leiden om het preparaat te bereiken; in het epi-verlichtingspad fungeert het objectief zowel als condensator als objectief.We hebben zojuist de belangrijkste onderdelen van uw lichtmicroscoop behandeld. Ik ben begonnen met het tonen van de beeldvormende componenten van de microscoop, namelijk de oculairs, het objectief en de CCD-camera. Vervolgens hebben we de manipulatie van de tafel, de focusinstelknoppen en de condensor bekeken.Dat was alles. Bedankt voor het kijken en veel succes met uw microscopie.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

University of Texas Health Science Center at San Antonio (UTHSCSA).  Het licht microscoop is een basisinstrument voor de celbioloog, die moet een grondig begrip van hoe het werkt, hoe het dient te worden aangepast voor verschillende toepassingen, en hoe het moet worden gehandhaafd als nodig is om een ​​maximale beeld-vorming van de capaciteit en de resolutie te verkrijgen. De onderdelen van de microscoop worden in detail beschreven hier.

Belangrijke componenten van de lichtmicroscoop

In dit artikel

Samenvatting

Samenvatting

Protocol

Openbaarmakingen

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

Gerelateerde artikelen