De volledige tekst protocol voor deze experimentele aanpak is beschikbaar in <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0401/current/abstract ">Current Protocols in Cell Biology</a> .

De auteurs hebben niets te onthullen.

belangrijke componenten van de lichtmicroscoop

Het licht microscoop is een basisinstrument voor de celbioloog, die moet een grondig begrip van hoe het werkt, hoe het dient te worden aangepast voor verschillende toepassingen, en hoe het moet worden gehandhaafd als nodig is om een ​​maximale beeld-vorming van de capaciteit en de resolutie te verkrijgen. De onderdelen van de microscoop worden in detail beschreven hier.

Belangrijke componenten van de lichtmicroscoop

The light microscope is a basic tool for the cell biologist, who should have a thorough understanding of how it works, how it should be aligned for ...

Lichtmicroscopen zijn essentiële hulpmiddelen in de biomedische wetenschap. De optische componenten zorgen voor een veel grotere beeldresolutie dan kijken met het blote oog. Door microscopie te combineren met digitale beeldverwerking, kunnen onderzoekers de zichtbaarheid van het beeld verbeteren en nauwkeurige kwantitatieve metingen uitvoeren.Deze video begeleidt u door de belangrijkste componenten van de microscoop en hun functies. Hallo, ik ben Victoria Sanon Frolic van de Core Optical Imaging Facility aan de University of Texas Health Science Center in San Antonio. Vandaag laat ik u de belangrijkste componenten van uw lichtmicroscoop en hun basisfuncties zien.Dus laten we een rondleiding maken door uw microscoop. Voordat u een microscoop gebruikt, is het het beste om vertrouwd te raken met de componenten en hun functies. Dit is een Nikon Eclipse TI omgekeerde samengestelde lichtmicroscoop uitgerust voor zowel doorgelaten licht als epi-fluorescentie microscopie.De richting langs de as van de microscoop wordt de Z-as genoemd en de loodrechte richtingen zijn de X- en Y-assen. Eerst bekijken we het oogstuk, de neusstuk met de objectieven en het objectieftafel. Dit zijn de belangrijkste beeldvormende componenten van de microscoop.De stukken zijn de interface tussen waarnemer en microscoop. Door de basis van de binoculaire oogstukbuizen vast te pakken, kunt u de interpupillare afstand aanpassen door ze dichter bij elkaar of verder uit elkaar te bewegen. Dit stelt u in staat om comfortabel met beide ogen te kijken.Tegelijkertijd kan het oogstuk nu ook onafhankelijk voor elk oog worden aangepast. De vergroting van het oogstuk is gemarkeerd op de vat. Camera's worden routinematig op microscoppen gemonteerd voor beeldacquisitie.Deze specifieke scope gebruikt een C-mount adapter om een CCD-camera aan de zijpoort van de microscoopbehuizing te bevestigen. Een knop op de microscoop wordt gedraaid om een prisma te positioneren om de beeldvormende lichtstralen weg van de oogstukken en richting de camera te leiden, die op de camerapoort is gemonteerd. De verschillende objectieven, die de meeste vergroting en resolutie bepalen, zijn gemonteerd op een roterende neusstuk.Elk objectief is gemarkeerd met specificaties zoals de vergroting, numerieke apertuur, het benodigde immersiemedium zoals olie glycerine of lucht dekglasdikte, en andere speciale functies zoals de verlichtingsmodus, het licht dat het oogstuk en de neusstukken onscherp verlaat of naar oneindig wordt geprojecteerd. De buis bevat een positieve focuslens die het beeldvormende licht scherp stelt voor het oogstuk of de camera. Nu ik u de beeldvormende componenten van de scope heb laten zien, laten we eens kijken naar de componenten die ons zullen helpen om ons op een beeld te concentreren en aanpassingen te maken aan het doorgelaten licht.Vervolgens bekijken we de monsterstuk, dat de mechanische drager is die het monsterstukje vasthoudt. Door de knoppen te draaien, kunt u de monsters in de x- en y-richtingen aanpassen. In de omgekeerde microscoopconfiguratie is de tafel vast en wordt het monster scherpgesteld door de objectieven omhoog en omlaag te bewegen langs de Z AEs met behulp van grove en fijne scherpstelknoppen op de microscoopbehuizing.Nu bekijken we de transverlichtingscomponenten van de lichtmicroscoop, die het licht leveren voor het visualiseren van uw monsters. Eerst hebben we de lamp en behuizing, die het licht leveren voor het verlichten van het monster. Voor lichtmicroscopie is de lamp meestal een laagspannings halogeenlamp met een wolfraamgloeidraad die kan worden aangepast om de lichtomvang te regelen. Een sluiter kan na de lichtbron worden geplaatst om de duur van de verlichting te regelen.Net na de lichtbron is een velddiafragma-aanpassing van het veld, het diafragma regelt het gebied of veld van het monster dat moet worden verlicht. Vervolgens is het onderdeel bekend als de condensor, waarvan de belangrijkste functie is om heldere uniforme verlichting op het monster te focusseren. De condensor of irisdiafragma op de bodem van de condensor regelt de hoek van de condensorkegel van de verlichting van het monster.Aanpassing van dit diafragma regelt de grootte en numerieke apertuur van de lichtkegel gericht op het monster, wat resulteert in correcte verlichting, contrast en diepte van veld. Optische aanpassing van het condensordiafragma resulteert in een goede vulling van het voorste lenselement van het objectief. Idealiter moet deze aanpassing voor elk objectief worden gemaakt om het volledige potentieel van de lens te realiseren. Voor epi-fluorescentie verlichting is de lichtbron meestal een xenon of kwikbooglamp.Op onze scope hebben we een kwikgebaseerde lichtbron booglamp, deze moet voorzichtig worden gehanteerd omdat ze kunnen ontploffen. Als verkeerd behandeld. Zorg ervoor dat u handschoenen draagt ​​bij het installeren van de lamp, omdat vingerafdrukken en puin hete punten kunnen creëren en ervoor zorgen dat de lamp barst, het is ten zeerste aanbevolen om een booglamp niet langer te laten draaien dan het aantal uren waarvoor deze is geclassificeerd.De fluorescente lichtbaan omvat een velddiafragma en een apertuurdiafragma. Vergelijkbaar met de transmissielichtbaan. Voorbij deze diafragma's zal het licht een reeks filters tegenkomen die lichtbandbreedte selecteren en de verlichting richten in het objectief om het monster in de epi-verlichtingsbaan te bereiken, het objectief fungeert als zowel de condensor als het objectief.We hebben u zojuist de belangrijkste componenten van uw lichtmicroscoop laten zien. Ik begon met het laten zien van de beeldvormende componenten van de microscoop, namelijk de oogstukken, het objectief en de CCD-camera. Vervolgens bespraken we de manipulatie van het objectieftafel, de scherpstelknoppen en de condensor.Dat is alles. Bedankt voor het kijken en veel succes met uw microscopie.

Research

JoVE Journal

Biology

Major Components of the Light Microscope

University of Texas Health Science Center at San Antonio (UTHSCSA).  The light microscope is a basic tool for the cell biologist, who should have a thorough understanding of how it works, how it should be aligned for different applications, and how it should be maintained as required to obtain maximum image-forming capacity and resolution. The components of the microscope are described in detail here.

Belangrijke componenten van de lichtmicroscoop

In This Article

Summary

Abstract

Protocol

Disclosures

Reprints and Permissions

Tags

Related Articles