जेम्स थॉमसन एट अल के बाद से 1998 में एक तकनीक विकसित अलग करने और संस्कृति में HES बढ़ने, बाद में उपयोग के लिए और एक जमे हुए स्टॉक से कोशिकाओं विगलन और विस्तार ठंड कोशिकाओं दिनचर्या HES सेल संस्कृति में महत्वपूर्ण प्रदर्शन प्रक्रियाओं बन गए हैं. चूंकि HES कोशिकाओं को ठंड और विगलन के तनाव के लिए बहुत संवेदनशील होते हैं, विशेष ध्यान रखा चाहिए. यहाँ हम तेजी से तरल नाइट्रोजन शेयरों से HES कोशिकाओं विगलन, उन्हें माउस भ्रूणीय फीडर कोशिकाओं पर चढ़ाना, और धीरे धीरे उन्हें लंबी अवधि के भंडारण के लिए ठंड के लिए उचित तकनीक का प्रदर्शन.