Name: Wolbachia infection bactérienne chez la drosophile (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Découvrez un protocole simple pour isoler Wolbachia de drosophiles infectées et les injecter dans des mouches non infectées. Cette méthode utilise un dispositif filtrant et facilite l'étude de la transmission des infections chez les insectes.

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wolbachia infection bactérienne chez la drosophile

Wolbachia Bacterial Infection in Drosophila

Wolbachia infection bactérienne chez la drosophile

Je m'appelle Voia Friedman. Je suis chercheuse associée à l'Université de Princeton. Aujourd'hui, je vais vous parler de plusieurs protocoles que j'ai mis au point pour transinfecter, initialement afin d'isoler, puis de revenir à partir des hélices de mouches infectées, et par la suite pour aider à injecter l'hélice alimentée à des mouches non infectées.Donc, fondamentalement, il s'agit d'un protocole très simple pour isoler lui-même à des fins de base. Vous utiliserez cet appareil provenant de Mepo, qui contient un filtre placé au-dessus d'un E. On commence essentiellement avec environ cent mouches. Vous anesthésiez les mouches, les placez dans le dispositif de filtration, vous pouvez simplement utiliser une ampoule et celle-ci s'adaptera très facilement sur cet appareil, puis vous rincez avec de l'éthanol à 70 %.Vous prenez simplement, retirez le futur, vous pouvez jeter l'éthanol, puis après trois lavages, vous effectuez votre dernier lavage avec de l'eau moléculaire, car vous ne voulez pas de bactéries provenant de traces d'éthanol. Ensuite, vous passez simplement à une nouvelle porte d'arme et vous centrifugez dans un micro, un vrai micro, pendant deux minutes. Ensuite, vous p

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Parasitoïde (parasite) guêpes constituent une classe importante des ennemis naturels des insectes, y compris de...

Une introduction à guêpes parasites<em&gt; Drosophila</em&gt; Et la réponse immunitaire antiparasitaire

Source : Siva-Jothy, J. A., et al. Infection bactérienne orale et extirpation chez Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2018)La vidéo montre l’infection buccale de Drosophila melanogaster par des bactéries pathogènes. Cela inclut la préparation de fioles infectées et le transfert de mouches affamées pour permettre l’ingestion bactérienne. La procédure capture la colonisation intestinale, suivie de la stérilisation de surface et de l’homogénéisation des mouches. Enfin, il montre la...

Infection buccale de Drosophila melanogaster avec des bactéries pathogènes

Source : Hiroyasu, A., D et al., Extraction d’hémocytes de larves de Drosophila melanogaster pour infection microbienne et analyse. J. Vis. Exp. (2018)Cette vidéo montre la procédure pour établir une infection bactérienne chez les larves de Drosophila en les plaçant dans une gouttelette bactérienne et en les piquant avec une aiguille en tungstène. Les larves sont ensuite incubées sur une plaque agar rainurée et riche en nutriments pour étudier les interactions hôte-pathogène.

Établissement d’une infection bactérienne chez les larves de Drosophila

Drosophila melanogaster est un organisme modèle exceptionnel pour l’étude du système immunitaire inné et des conséquences physiologiques des infections et des maladies. Ce protocole décrit comment administrer des infections bactériennes robustes et quantitativement reproductibles à D. melanogaster, et comment mesurer par la suite la gravité de l’infection et quantifier la réponse immunitaire de l’hôte.

Infection bactérienne systémique et défense immunitaire phénotypes<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Une méthode pour l' élevage Drosophila melanogaster dans des conditions axéniques et gnotobiotiques est présenté. Fly embryons sont dechorionated dans l'hypochlorite de sodium, transférés de manière aseptique à l'alimentation stérile, et élevés dans des récipients fermés. Inoculant régime alimentaire et les embryons avec des bactéries conduit à des associations gnotobiotiques, et la présence bactérienne est confirmée par plaquage du corps entier homogénats drosophile.

L&#39;élevage du Fruit Fly<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Sous axéniques et gnotobiotique Conditions

Les moustiques Aedes aegypti infectés par Wolbachia sont libérés dans les populations naturelles de supprimer la transmission des arbovirus. Nous décrivons des méthodes arrière Ae. aegypti Wolbachia infections en laboratoire pour des expériences et sortie de terrain, prendre des précautions pour réduire au minimum la sélection et l’adaptation de laboratoire.

Maintenir les moustiques Aedes aegypti infectés par Wolbachia

Ce protocole décrit les méthodes à exposer oralement et à infecter la drosophile Drosophila melanogaster avec des bactéries pathogènes et de mesurer le nombre de bactéries infectieuses hangar suite à une infection intestinale. Nous décrivons plus l’effet des mutants immunitaires sur la mouche survie suite à une infection bactérienne par voie orale.

Oral Infection bactérienne et excrétion chez Drosophila melanogaster

Ce protocole décrit comment établir une infection virale in vivo chez Drosophila melanogaster en utilisant la méthode de nano-injection et les techniques de base pour analyser l’interaction virus-hôte.

Mise en place d’une Infection virale et analyse de l’Interaction hôte-Virus chez Drosophila Melanogaster

Les mouches adultes Drosophila melanogaster ont été largement utilisées comme organismes modèles pour étudier les mécanismes moléculaires sous-jacents aux réponses immunitaires innées antimicrobiennes de l’hôte et les stratégies d’infection microbienne. Pour promouvoir le stade larvaire de D. melanogaster en tant que système modèle supplémentaire ou alternatif, une technique d’injection larvaire est décrite.

Drosophila melanogaster Protocole d’injection de larves

Quatre méthodes ont été utilisées pour détecter les Wolbachia intracellulaires, qui se complétaient et amélioraient la précision de la détection de l’infection à Wolbachia de aa23 dérivé d’Aedes albopictus et de l’Aa23-T guéris de l’infection native de Wolbachia à l’aide d’antibiotiques.

Détection de la souche wAlbB de Wolbachia dans les lignées cellulaires d’Aedes albopictus

Les lignées cellulaires sont utiles dans les études sur les organismes intracellulaires qui ne peuvent pas être cultivés en dehors de leurs cellules hôtes. Bien que les lignées infectées par Wolbachia aient permis de nombreuses découvertes, l’hétérogénéité au sein de ces lignées peut conduire à des résultats expérimentaux variables. Nous présentons un protocole pour générer des clones unicellulaires et des cultures continues à partir de cellules JW18 infectées par Wolbachia.

Génération de cultures monoclonales à partir de la lignée cellulaire de Drosophila melanogaster JW18 infectée par Wolbachia

Découvrez un protocole simple pour isoler Wolbachia de drosophiles infectées et les injecter dans des mouches non infectées. Cette méthode utilise un dispositif filtrant et facilite l'étude de la transmission des infections chez les insectes.

Wolbachia infection bactérienne chez la drosophile

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