Name: Trachéotomie: Une méthode pour la transplantation de cellules souches pour le poumon (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 45 s
Description: Apprenez une méthode de trachéotomie pour la transplantation de cellules souches pulmonaires. Cette procédure chirurgicale permet un accès sûr et fiable au lobe gauche du poumon, améliorant ainsi l'efficacité de la thérapie cellulaire.

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<p class="jove_step"> Pré-opératoire </p><ol><li> Souris receveuse et de cellules du donneur </li><li> Exploitation plateforme avec du fil de suture et des bandes </li><li> Seringues 1cc </li><li> Aiguille 23G </li><li> Anesthésiques: Avertin 25 mg / ml (alternativement kétamine à 9 mg / ml et xylazin 1 mg / ml) </li><li> Tondeuse à cheveux avec la lame n ° 40 </li><li> Gants stériles </li><li> Tampons alcoolisés </li><li> L&#39;iode </li><li> Instruments chirurgicaux stérilisés </li><li> Fil de suture </li><li> Cathéter 22G </li><li> 200 ul pipette (stérile) </li><li> Embouts de pipette stérilisée </li><li> Une pommade antibiotique de la colle </li><li> Sharpie conteneurs </li></ol><p class="jove_step"> Opératoire </p><p> <span class="jove_content">Des techniques aseptiques sont utilisés tout au long de cette procédure.</span> </p><ol><li> Peser souris. </li><li> L&#39;injection intrapéritonéale d&#39;anesthésique (250 mg / kg de kétamine Avertin ou alternativement 90 mg / kg et de xylazine à 10 mg / kg) à des doses suffisantes pour permettre la respiration spontanée, mais fournissent de chirurgie de concentration anesthésie. Pour la chirurgie de commencer le pincement de l&#39;orteil a été utilisé comme un indicateur de la douleur profonde avec absence de réponse de l&#39;animal anesthésié. </li><li> Lay à la souris avec les incisives niché dans un fil de suture et la queue de bande à se stabiliser. </li><li> Cheveux clip à l&#39;aide d&#39;une lame # 40 clipper. </li><li> Gants Changement (continuer avec des gants stériles). </li><li> Désinfectez à deux reprises avec de l&#39;alcool avant l&#39;incision cutanée. </li><li> Stériliser zone avec un iodophore. </li><li> Utiliser des instruments stériles faire une petite incision (&lt;1 cm), parallèlement à la trachée. </li><li> Soigneusement tissus séparés du cartilage. </li><li> Une liaison est inséré sous la trachée. </li><li> Soulevez doucement le haut et cravate insérer l&#39;aiguille dans la trachée exposés. </li><li> Retirer l&#39;aiguille et insérer le tube en douceur, mais rapidement, jusqu&#39;à ce sentiment de légère résistance. </li><li> Pipeter cellules (jusqu&#39;à 50 microlitres de volume) directement dans le cathéter. </li><li> Retirer immédiatement le tube et la cravate tandis souris libérateur d&#39;un appareil d&#39;exploitation. </li><li> Si nécessaire délicatement maintenez la souris verticale (vertical) en s&#39;accrochant ses pattes antérieures et déplacer doucement. </li><li> Fermez la plaie avec une suture ou colle aux antibiotiques. </li></ol><p class="jove_step"> Post-opératoire </p><ol><li> Gardez la souris chaude. </li><li> La buprénorphine (0,05 mg / kg) doit être donné comme analgésie postopératoire toutes les 12 heures pendant les 24 premières heures suivant cette procédure. </li></ol><p><img src="/files/ftp_upload/old/163_2008_7_15_4/163_figure-1.png" alt="Figure 1" width="587" height="531" /></p>

<table><tbody><tr><td>Aiguille 23 G</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Seringue de 1 cc</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cathéter 22 G</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>fil de suture</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>pommade adhésive antibiotique</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthésique</td><td></td><td></td><td>Avertin 25 mg/mL. En alternative, kéta­mine 9 mg/mL et xylazine 1 mg/mL.</td></tr></tbody></table>

trachéotomie: une méthode pour la transplantation de cellules souches pour le poumon

Tracheotomy: A Method for Transplantation of Stem Cells to the Lung

<p class="jove_content">La maladie pulmonaire est une cause majeure de décès et susceptible de devenir une épidémie donnée augmentation de la pollution et dans le monde de fumer. Les progrès de la thérapie par cellules souches peuvent atténuer bon nombre des symptômes associés aux maladies pulmonaires et induisent la réparation alvéolaire chez les adultes. Parallèlement à la recherche permanente de cellules souches pour le traitement applicable humaine, la livraison précis et homing (sur le site de la maladie) doivent être rassurés pour le succès du traitement. Ici, je déclare que les cellules souches peut sans risque être inculquée par la trachée ouvrant une route non-stop au niveau du poumon. Cette méthode implique une incision de la peau, l&#39;insertion d&#39;une canule caudale dans et le long de la lumière trachéale, et l&#39;injection d&#39;un mélange de cellules souches du véhicule dans les voies aériennes du poumon. Une large gamme de solutions de médias et de stabilisants peuvent être inculqué par une trachéotomie, résultant en la capacité de livrer une gamme plus large de types de cellules. Avec épithélium alvéolaire confiner ces cellules à la lumière, l&#39;expansion du poumon et la pression négative lors de l&#39;inhalation peut également aider à l&#39;intégration de cellules souches. La livraison trachéale de cellules souches, avec une absorption rapide et la capacité de gérer un large éventail de traitements, pourrait accélérer le développement de thérapies cellulaires, ouvrant de nouvelles avenues pour le traitement des maladies pulmonaires.</p>

<p class="jove_content">Des avancées significatives dans l&#39;identification de cellules souches sont continuellement en cours. Pour traduire ces découvertes, cependant, de nouvelles méthodes pour la livraison cellulaires doivent être élaborées. Ici je signale que les voies respiratoires fournir un itinéraire sûr pour la transplantation de cellules souches pour les poumons.</p>

Trachéotomie: Une méthode pour la transplantation de cellules souches pour le poumon

Les maladies pulmonaires sont une cause majeure de décès et sont susceptibles de devenir une épidémie compte tenu de l'augmentation de la pollution et du tabagisme à l'échelle mondiale. Les progrès dans le domaine des cellules souches...

<p>Les techniques aseptiques sont utilisées th</p>

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Cette vidéo montre et compare deux modèles expérimentaux pour étudier le développement de maladies des voies respiratoires oblitérante (OAD) chez la souris, le modèle orthotopique transplantation hétérotopique et la trachée.

Hétérotopique et orthotopique transplantation trachéale chez des souris utilisées comme modèles pour étudier le développement de maladies des voies respiratoires oblitérante

Ici, nous démontrons notre protocole pour l'isolement de cellules basales et sous-muqueuse du canal de la glande trachées de souris. Nous démontrons également la méthode de l'injection de cellules souches dans le coussinet adipeux de souris dorsale de créer...

Isolement de cellules basales et les cellules sous-muqueux du canal de la glande de la souris Trachée

Bronchiolite oblitérante est le principal obstacle à la survie à long terme des greffés du poumon et de l'absence d'un modèle robuste préclinique empêche l'examen immunopathogenèse bronchiolite oblitérante. Contrairement à d'autres transplantations d'organes solides, vascularisée de la souris la transplantation pulmonaire n'a été que récemment mis au point. Ici, nous montrons notre modèle développé indépendamment bronchiolite oblitérante après murin orthotopique simple transplantation...

Développement de la bronchiolite oblitérante dans un modèle murin de transplantation pulmonaire orthotopique

Nous décrivons une nouvelle technique de transplantation cœur-poumon abdominale hétérotopique (HAHLT) chez le rat. La configuration de la greffe entraîne une circulation du greffon partiellement chargée, ce qui permet une évaluation fonctionnelle directe. Ce modèle peut être utilisé pour des études aiguës ou chroniques de la fonction et de l’état immunologique du greffon transplanté.

Rat Heterotopic abdominale Coeur / Transplantation pulmonaire simple dans une configuration de volume chargé

Nous décrivons ici un modèle de transplantation orthotopique syngénique minimalement invasives des cellules d’adénocarcinome pulmonaire souris comme un modèle de temps - et réduction des coûts pour étudier le cancer du poumon non à petites cellules.

Orthotopic Transplantation de cellules d’adénocarcinome pulmonaire syngénique pour étudier l’Expression des PD-L1

Sténose de la greffe constitue un obstacle critique en remplacement de tissu conçu des voies respiratoires. Afin d’étudier les mécanismes cellulaires qui sous‑tendent la sténose, nous utilisons un modèle murin de remplacement trachéale tissu machiné avec ensemencé la moelle osseuse des cellules mononucléaires (BM-MNC). Ici, nous détaillons notre protocole, y compris la fabrication d’échafaudages, BM-MNC isolement, semis de la greffe et l’implantation.

Ensemencement et Implantation d’un greffon biosynthétique de trachéale tissulaire dans un modèle murin

Décrit est un protocole pour effectuer la transplantation intratrachéale des cellules stromales mésenchymales (MSCs) par injection intratrachéale dans les rats néonatals terme. Cette technique est une option cliniquement viable pour l’administration de cellules souches et de médicaments dans les poumons néonatals de rat pour évaluer leur efficacité.

Instillation intratrachéale des cellules souches chez les rats néonatals à terme

Cette technique consistant à instiller des médicaments directement dans la trachée des rongeurs néonatals est importante pour étudier l’impact des médicaments ou des produits biologiques administrés localement sur les maladies pulmonaires néonatales. En outre, cette méthode peut également être utilisée pour induire des lésions pulmonaires dans des modèles animaux.

Une méthode mini-invasive pour l’instillation intratrachéale de médicaments chez les rongeurs néonatals pour traiter les maladies pulmonaires

Le modèle de transplantation trachéale intrapulmonaire (IPTT) murine est précieux pour l’étude de la maladie oblitérante des voies respiratoires (OAD) après une transplantation pulmonaire. Il offre un aperçu du comportement immunologique et angiogénique spécifique du poumon dans l’oblitération des voies respiratoires après allotransplantation avec une reproductibilité élevée. Nous décrivons ici la procédure IPTT et ses résultats attendus.

Transplantation trachéale intrapulmonaire murine : un modèle pour étudier la maladie oblitérante des voies respiratoires après une transplantation pulmonaire

Ce protocole décrit une technique améliorée de transplantation orthotopique du poumon gauche chez le rat, en mettant l’accent sur la réduction des difficultés opérationnelles et l’amélioration des taux de survie.

Transplantation orthotopique du poumon gauche chez le rat

Apprenez une méthode de trachéotomie pour la transplantation de cellules souches pulmonaires. Cette procédure chirurgicale permet un accès sûr et fiable au lobe gauche du poumon, améliorant ainsi l'efficacité de la thérapie cellulaire.

Trachéotomie: Une méthode pour la transplantation de cellules souches pour le poumon

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