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Isolamento de Ribossomos ligados a polipeptídeos nascentes<em> In vitro</em> Identificar Sites Pausa translacionais Junto mRNA
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Isolation of Ribosome Bound Nascent Polypeptides in vitro to Identify Translational Pause Sites Along mRNA

Isolamento de Ribossomos ligados a polipeptídeos nascentes<em> In vitro</em> Identificar Sites Pausa translacionais Junto mRNA

DOI:
10.3791/4026-v

•

10:15 min

•

July 06, 2012

•

,
1Center for Gene Regulation in Health and Disease, Department of Biological, Geological and Environmental Sciences,Cleveland State University

Chapters

  • 00:05Title
  • 03:55DNA Template Preparation, In vitro Transcription, and In vitro Translation
  • 05:30Isolation and Resolution of Nascent Polypeptides
  • 06:54Representative Translational Pause Results
  • 08:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Uma técnica para identificar locais de pausa de translação sobre mRNA é descrito. Este procedimento é baseado no isolamento de polipéptidos nascentes que se acumulam nos ribossomas durante in vitro tradução de um ARNm alvo, seguido de análise de tamanho das cadeias nascentes utilizando uma electroforese em gel de desnaturação.

Tags

RibosomePolypeptidesTranslational Pause SitesMRNACodon UsageSynonymous CodonsNon-uniform ElongationMRNA Secondary StructureRibosome MovementTranslational Elongation RatesCodon BiasTRNAsRare CodonsPause SitesProtein ExpressionMRNA StabilityProtein Folding

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