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Quantitative FRET (transfert de Förster Resonance Energy) Analyse de la protéase SENP1 Kinetics Détermination
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Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Quantitative FRET (Förster Resonance Energy Transfer) Analysis for SENP1 Protease Kinetics Determination
DOI:

16:02 min

February 21, 2013

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:20Plasmid Constructs
  • 03:07Protein Expression and Purification
  • 06:16FRET-based Protease Assay for Enzyme Kinetic Study
  • 08:54Quantitative FRET Spectrum Analysis
  • 13:36Representative Results
  • 15:11Conclusion

Summary

Automatic Translation

Une nouvelle méthode qui analyse quantitative de FRET (Förster Resonance Energy Transfer) des signaux est décrite pour l'étude de la cinétique enzymatique.<em> K<sub> M</sub</em> Et<em> K<sub> Cat</sub</em> Ont été obtenus pour l'hydrolyse du domaine catalytique de SENP1 (SUMO / sentrine protéase spécifique 1) de pré-SUMO1 (Small Ubiquitin-comme modificateur). Les principes généraux de cette étude quantitative-FRET à base de protéase cinétique peut être appliquée à d'autres protéases.

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