Name: Utilisation d’un système de suivi 3D automatisé pour enregistrer les individus et les bancs de poissons-zèbres adultes (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-12-05T16:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 3 s
Description: Découvrez un système de suivi 3D automatisé utilisant des algorithmes avancés pour reconstruire les trajectoires de poissons-zèbres. Cette méthode permet d'analyser précisément les comportements sociaux et cinématiques en neurosciences.

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</ol>

Hans Maaswinkel, Liqun Zhu et Wei Weng sont des employés de xyZfish, Ronkonkoma NY, qui produit le système de suivi utilisé dans cet article.

La procédure expérimentale présentée ici permet d’enregistrer des poissons zèbres individuels, des couples de poissons-zèbres (par exemple pour étudier l’accouplement ou l’agression) et des bancs de poissons-zèbres (comme le montre l’exemple représentatif). Le système est particulièrement adapté pour obtenir simultanément des informations sur la distribution 3D (verticale et horizontale), les caractéristiques cinématiques (par exemple, la vitesse, l’accélération, l’angle de braquage) et les paramètres sociaux (par exemple, la cohésion sociale). Dans ce qui suit, nous énumérons quelques points importants à prendre en compte lors de la planification d’expériences.
Selon la procédure expérimentale, différents systèmes comportementaux peuvent être étudiés. Par exemple, pour explorer la néophobie (c’est-à-dire la peur de nouveaux environnements), l’enregistrement doit être commencé immédiatement après avoir introduit le poisson-zèbre dans le bassin d’observation (après avoir attendu quelques secondes que l’eau se calme pour diminuer le bruit), sans accoutumance préalable11,17,37. D’autre part, certains sujets de recherche pourraient nécessiter que le poisson-zèbre soit bien habitué, par exemple lors de l’étude des effets des phéromones d’alarme16. Lors de l’étude de groupes de poissons-zèbres, l’expérimentateur doit être conscient que, bien que le logiciel minimise la commutation des balises, il n’est pas possible pour le moment de suivre des poissons-zèbres individuels. Ce n’est pas non plus important pour les études sur les bancs où l’accent est mis sur la cohésion sociale, mais ce serait crucial lors de l’exploration de l’agression ou de l’accouplement. La réaffectation manuelle des balises est une option, mais peut prendre beaucoup de temps.
La couleur des parois du récipient d’observation et de la chambre d’observation peut avoir une grande influence sur le comportement du poisson zèbre. Par exemple, il a été décrit que les murs blancs induisent des réponses d’aversion36, 37. Lorsque vous essayez différentes couleurs, gardez deux choses à l’esprit : 1) il est important que la paroi avant (c’est-à-dire la paroi la plus proche de l’appareil photo) reste transparente et qu’un couvercle (le cas échéant) doit également être transparent ; 2) Lorsque vous sélectionnez une couleur jamais utilisée auparavant, déterminez d’abord si le contraste entre le poisson zèbre et l’arrière-plan est approprié pour l’enregistrement. Faites un test. La modification des paramètres de l’appareil photo pour l’enregistrement (gain, obturateur, rouge et bleu, comme expliqué aux étapes 2.5 et 2.6) et les paramètres de reconstruction de trajectoire (par exemple, les seuils de couleur et de taille, comme expliqué aux étapes 3.3, 3.5, 3.11 et 3.12) peut faire une grande différence. Encore une fois, l’expérience du système contribuera grandement à décider de ce qui est possible.
Selon l’objectif de l’expérience, une source lumineuse ayant des caractéristiques différentes (par exemple, spectre, intensité) peut être souhaitable. Les barres LED peuvent être facilement remplacées. Assurez-vous que la lumière atteint toutes les parties du récipient.
Si l’expérience exige que le poisson-zèbre reste dans le récipient d’observation pendant plusieurs heures, assurez-vous de prévoir une aération. Un tube d’air peut être fixé dans le coin arrière droit à l’aide d’un clip. Vérifiez sur l’écran de l’ordinateur que le clip n’interfère pas avec l’enregistrement, c’est-à-dire que le poisson-zèbre n’est à aucun moment caché à la vue. Dans les figures 2A et 2B , le clip noir peut être vu sur la vue de dessus. Idéalement, l’aération devrait être assurée avant ou entre les enregistrements, mais pas pendant l’enregistrement afin d’éviter le bruit. Notez également que l’activation ou la désactivation d’une forte aération peut effrayer le poisson-zèbre.
Si l’expérience nécessite de garder le poisson-zèbre dans le récipient pendant la nuit, il est utile de couvrir la chambre d’observation avec un couvercle transparent pour empêcher le poisson-zèbre de sauter (ce qui est un phénomène très courant). Si le couvercle n’est pas retiré avant l’enregistrement (afin de ne pas déranger le poisson-zèbre), tenez compte des deux points suivants : 1) assurez-vous que les images miroir des sources lumineuses n’obstruent pas l’enregistrement (par exemple en déplaçant les sources lumineuses ou en choisissant un couvercle qui ne réfléchit la lumière que de manière minimale) ; 2) considérer que le couvercle peut devenir brumeux lorsqu’il est utilisé pendant la nuit, d’autant plus que dans ce cas, l’aération doit également être prévue ; Une façon de réduire cela est de choisir un couvercle avec de petits trous.
Pour certaines expériences, il peut être essentiel de déterminer le comportement de base du poisson-zèbre avant d’administrer un médicament. Dans ce cas, le médicament peut être ajouté entre les séances au moyen d’un tube (similaire au tube d’aération discuté ci-dessus).
Bien que l’accent ait été mis ici sur l’enregistrement du poisson-zèbre (Danio rerio), d’autres espèces de poissons peuvent bien sûr également être enregistrées avec le système. Il a été utilisé pour étudier les comportements des poissons rouges (juvéniles) (Carassius auratus), de l’ardillon tigré (Barbus tetrazona) et de la porte-épée verte (Xiphophorus helleri).
Enfin, il convient de noter que d’autres dimensions des bassins d’observation sont principalement possibles. Cependant, cela nécessiterait de reconfigurer le système et de trouver un bon équilibre entre la résolution spatiale et temporelle lors de l’utilisation de conteneurs d’observation beaucoup plus grands. De plus, la forme du récipient doit être cuboïde. Le nombre de poissons-zèbres ou d’autres sujets expérimentaux est théoriquement illimité ; Cependant, l’échange de balises augmente avec le nombre de sujets.

Le poisson-zèbre est devenu un modèle important pour la recherche biologique et pharmacologique1-3. Le suivi des mouvements et de la distribution spatiale des poissons-zèbres et des bancs de poissons-zèbres est inestimable. Les études plus anciennes appliquent une quantification manuelle basée sur des images enregistrées4. Aujourd’hui, les systèmes de suivi vidéo automatique 2D sont couramment utilisés5. Cependant, comme le poisson-zèbre et de nombreux autres animaux aquatiques et non aquatiques se déplacent dans un espace tridimensionnel, l’intérêt pour les systèmes 3D ne cesse de croître6. Le système 3D décrit a été publié pour la première fois en 20077. Pour plus de détails techniques et des comparaisons avec d’autres systèmes, voir8. L’avantage fondamental de ce système par rapport à d’autres systèmes est qu’il acquiert deux (éventuellement trois) vues synchrones et indépendantes à l’aide d’un système de mise en miroir et qu’il utilise un protocole d’étalonnage en deux étapes. Dans un premier temps, la géométrie 3D du système stéréo (formée par la caméra et les miroirs) est calibrée. Dans la deuxième étape, les erreurs non linéaires introduites par la réfraction de la lumière sont corrigées. Lors de l’étude des animaux aquatiques, l’impact de la réfraction de la lumière peut être considérable lorsqu’il n’est pas corrigé. D’autres systèmes publiés jusqu’à présent (même des développements plus récents9) omettent la procédure d’étalonnage en deux étapes. Pour des détails techniques sur l’identification d’objets, l’occlusion avec suivi multi-objets, le bruit de jigging, etc. Le lecteur est prié de se reporter aux publications originales8,9. Le système a été validé pour l’étude des réponses comportementales analytiques10,11, des bancs8,11,12 et, dans une étude préliminaire, pour le comportement antagoniste chez le poisson-zèbre13. Il a également été testé pour d’autres espèces de poissons (poisson rouge8, porte-épée, barbe tigrée) et pour des souris9.
Dans ce qui suit, les protocoles d’étalonnage et d’utilisation du système sont décrits et les résultats d’une expérience testant les effets de l’antagoniste non compétitif du récepteur NMDA MK-801 sur le poisson-zèbre en bancs sont présentés à titre d’exemple représentatif pour démontrer le type de données qui peuvent être obtenues avec le système.
Tant dans le milieu naturel que dans les aquariums, le poisson-zèbre nage généralement en bancs14. Les préférences en matière de bancs semblent dépendre de plusieurs facteurs, tels que l’élevage, le sexe et la disponibilité de la nourriture14,15. Il est intéressant de noter que la distance entre les poissons-zèbres dans un banc devient plus petite lorsque des signaux de danger potentiel sont présents, tels que les phéromones d’alarme16 ou la nouveauté11. Le paradigme du haut-fond est donc également utilisé pour tester les médicaments anxiolytiques17. Les hiérarchies de dominance18 et l’apprentissage social19 sont des aspects fascinants du comportement du poisson zèbre. En raison de son caractère socio-comportemental très développé, le poisson-zèbre est également devenu un intérêt pour la recherche sur l’autisme20,21.
MK-801 a été signalé pour modifier le comportement social chez le poisson zèbre5,22,23, ce qui rappelle ses effets sur les mammifères24. Cependant, MK-801 a également de nombreux autres effets sur d’autres comportements (tels que le comportement de nage, l’évitement inhibiteur et la préférencede place 25-27). Il est donc crucial, dans les expériences initiales, d’obtenir autant d’informations que possible à partir d’observations de base. Cela servira de base à la conception d’expériences plus ciblées.
Relevé de l’appareil d’enregistrement et du logiciel
Dans sa configuration actuelle, le conteneur d’observation (25 cm x 25 cm x 18 cm, L x l x H), contenant le poisson zèbre, est positionné dans la chambre d’observation (91 cm x 46 cm x 56 cm, L x l x H). La chambre contient également une caméra, un miroir suspendu à un angle d’environ >45° au-dessus du conteneur et des barres lumineuses LED. La figure 1 montre un schéma simplifié. La caméra enregistre à la fois la vue de face et la vue de dessus (miroir) pour construire les trajectoires 3D du poisson-zèbre en déterminant ses coordonnées x, y et z. À des fins d’orientation, les vecteurs de coordonnées sont présentés dans le coin avant gauche du conteneur d’observation (position par rapport à la caméra), ce qui correspond aux vecteurs présentés sur les vues 3D (par exemple Figure 15) générées par le module de reconstruction de trajectoire (voir plus bas). Le taux d’échantillonnage dépend de l’appareil photo et de l’ordinateur. Dans nos expériences, il est d’environ 40 images/s (fps). La résolution spatiale des images enregistrées est de 640 x 480 pixels (cette configuration a été choisie comme équilibre optimal entre la résolution spatiale et temporelle). Windows XP ou une version ultérieure est requis.
Avant le premier enregistrement, le système doit être calibré pour déterminer l’emplacement des parois du récipient et de la surface de l’eau, pour déterminer le facteur d’échelle des images enregistrées et pour s’ajuster à l’erreur considérable générée par la réfraction de la lumière lors du passage de l’eau à l’air. En principe, l’étalonnage ne doit être effectué que lors de l’installation initiale et après le déplacement ou le remplacement de pièces de l’installation, telles que l’appareil photo ou le miroir. Néanmoins, il est recommandé de vérifier de temps en temps si l’étalonnage est toujours correct et de le recalibrer si nécessaire.
Le logiciel se compose de trois modules. Le module d’enregistrement enregistre les trames (deux exemples de trames sont illustrés à la figure 2). Le module de trajectoire reconstruit les trajectoires de chaque poisson-zèbre. Le module de traitement des données calcule une gamme de paramètres cinématiques et spatiaux standard. À des fins d’analyse plus approfondie, les données peuvent être importées dans un tableur ou un logiciel statistique.

<table><tbody><tr><td>AABT-3D Matériel de suivi</td><td>xyZfish</td><td>AABT II</td><td>Comprend une caméra, une carte vidéo, un compartiment d’observation avec miroir et éclairage</td></tr><tr><td>AABT-3D Équipement d’étalonnage</td><td>xyZfish</td><td>calib</td><td>Contient un panneau d’étalonnage et un rétroviseur latéral</td></tr><tr><td>AABT-3D Conteneurs d’observation</td><td>xyZfish</td><td>cubes</td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>AABT-3D Logiciel de suivi</td><td>xyZfish</td><td>v.1.0</td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Ordinateur</td><td>en option</td><td>N/A</td><td>Windows XP ou supérieur</td></tr><tr><td>(+)-MK-801 Maléate d’hydrogène</td><td>Sigma</td><td>M107</td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Pompe à air</td><td>Fusion</td><td>500</td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Tuyau de conduite d’air 3/16"</td><td>Lee' s Produits pour aquariums et animaux de compagnie</td><td>14508</td><td>&nbsp ;</td></tr><tr><td>Pinces de reliure moyennes</td><td>OfficeDepot</td><td>561339</td><td>Pour fixer l’avion à un conteneur d’observation</td></tr></tbody></table>

utilisation d’un système de suivi 3d automatisé pour enregistrer les individus et les bancs de poissons-zèbres adultes

Using an Automated 3D-tracking System to Record Individual and Shoals of Adult Zebrafish

Comme beaucoup d’animaux aquatiques, le poisson-zèbre (Danio rerio) se déplace dans un espace 3D. Il est donc préférable d’utiliser un système d’enregistrement 3D pour étudier son comportement. Le système de suivi vidéo automatique présenté accomplit cela en utilisant un système de miroir et une procédure de calibrage qui corrige l’erreur considérable introduite par le passage de la lumière de l’eau à l’air. Avec ce système, il est possible d’enregistrer à la fois des poissons zèbres simples et des groupes de poissons-zèbres adultes. Avant utilisation, le système doit être calibré. Le système se compose de trois modules : l’enregistrement, la reconstruction de chemin et le traitement des données. Les protocoles étape par étape pour l’étalonnage et l’utilisation des trois modules sont présentés. Selon la configuration expérimentale, le système peut être utilisé pour tester la néophobie, l’aversion blanche, la cohésion sociale, les déficiences motrices, l’exploration de nouveaux objets, etc. Il est particulièrement prometteur en tant qu’outil de première étape pour étudier les effets des médicaments ou des mutations sur les modèles comportementaux de base. Le système fournit des informations sur la distribution verticale et horizontale du poisson-zèbre, sur les composantes xyz des paramètres cinématiques (tels que la locomotion, la vitesse, l’accélération et l’angle de braquage) et il fournit les données nécessaires pour calculer les paramètres de cohésion sociale lors de l’essai des bancs.

L’utilisation d’un système vidéo automatique 3D capable de suivre des individus et des groupes de poissons-zèbres est décrite. À titre d’exemple d’application, nous explorons les effets de l’antagoniste du récepteur NMDA MK-801 sur des bancs de poissons-zèbres.

Utilisation d’un système de suivi 3D automatisé pour enregistrer les individus et les bancs de poissons-zèbres adultes

Like many aquatic animals, zebrafish (Danio rerio) moves in a 3D space. It is thus preferable to use a 3D recording system to study its behavior. The ...

L'objectif général de cette procédure est d'étudier les schémas de mouvement tridimensionnels des poissons zèbres ou d'autres animaux aquatiques et d'analyser leurs caractéristiques cinématiques, spatiales et sociales. Cela permet de détecter les comportements modifiés dus à des mutations génétiques ou à des facteurs chimiques et environnementaux. Ceci est réalisé en calibrant d'abord le système, ce qui corrige également la distorsion d'image importante provoquée par la réfraction.La deuxième étape consiste à enregistrer des images vidéo avec une résolution temporelle relativement élevée, provenant simultanément d'au moins deux angles différents. Ensuite, le logiciel reconstruit les trajectoires des poissons. Des algorithmes avancés sont appliqués pour réduire l'effet du bruit et déduire la position d'un poisson en cas d'occultation ou d'agglomération.La dernière étape consiste à analyser les données et à effectuer une analyse statistique portant sur l'accélération de la vitesse, l'angle de virage, la répartition horizontale et verticale dans le récipient d'observation, les distances interindividuelles et d'autres paramètres d'intérêt. En fin de compte, le suivi tridimensionnel calibré à haute vitesse s'avère utile pour étudier les déficits comportementaux chez le poisson-zèbre mutant ainsi que les effets de médicaments sur divers systèmes comportementaux. Dans le but de la découverte de médicaments, un avantage du système est qu'il permet d'étudier le comportement des poissons en 3D.Ceci est important car les poissons se déplacent naturellement dans les trois dimensions, et lors de l’enregistrement de plusieurs poissons simultanément, un enregistrement en 2D peut être très trompeur lorsqu’on étudie les configurations spatiales du groupe. Un autre avantage du système est qu’il corrige la réfraction de la lumière, laquelle, si elle n’est pas corrigée, peut entraîner des erreurs de mesure importantes dans sa configuration actuelle. Le récipient d’observation contenant les poissons zèbres est positionné dans la chambre d’observation.La chambre contient également une caméra, un miroir suspendu à environ 45 degrés au-dessus du récipient et des barres lumineuses à LED. Avant l'enregistrement, étalonnez le système afin de déterminer les positions des parois du récipient et de la surface de l'eau, ainsi que le facteur d'échelle des images enregistrées, tout en corrigeant l'erreur générée par la réfraction de la lumière lors de son passage de l'eau à l'air. Une fois l'étalonnage terminé, une prise d'essai doit être effectuée avec un poisson factice.Un recalibrage doit être effectué si les positions du miroir ou de la caméra sont incorrectes ou s'il y a des problèmes de suivi. Pour commencer une session d'enregistrement, placez le récipient d'observation rempli d'eau jusqu'aux repères dans la chambre d'observation. Les pieds du récipient doivent être insérés dans les trous de positionnement.Positionner les récipients de manière à ce que les parois translucides ou opaques soient orientées vers le côté éloigné et vers la droite, depuis le point de vue de la caméra. Ensuite, allumer les lumières dans le compartiment, puis introduire les poissons dans le récipient et fermer les rideaux. Ouvrir le module d'enregistrement et l'image des vues frontale et supérieure du récipient apparaîtra à l'écran.Initialement, l'image acquise peut ne pas être idéale et pourrait donc nécessiter quelques ajustements afin d'obtenir un contraste suffisant entre le poisson et le fond. Pour régler l'image, sélectionnez le contrôle de la caméra, puis dans la fenêtre des paramètres généraux qui s'ouvre, désactivez les cases indiquées ici, et ajustez ensuite l'obturateur et le gain de manière à ce que l'image ne soit pas surexposée. Ensuite, sur le côté gauche de la fenêtre de contrôle de la caméra, sélectionnez l'équilibre des blancs couleur, puis dans la nouvelle fenêtre, désactivez la case « Auto » et réglez les valeurs de rouge et de bleu afin d'obtenir le meilleur contraste de couleur dans les vues frontale et supérieure.Plusieurs réglages peuvent être nécessaires une fois les ajustements terminés. À partir du menu principal du module d'enregistrement, sélectionnez l'emplacement des données pour créer ou choisir un dossier. Chaque enregistrement doit avoir son propre dossier, qui doit être un sous-dossier du dossier de l'expérience.Appuyez maintenant sur démarrer l'enregistrement et saisissez un nombre entier correspondant à la durée de l'enregistrement en minutes, puis appuyez sur OK et la session d'enregistrement expérimental commencera. Une fois les enregistrements terminés, copiez et collez les données du conteneur animal et les sous-dossiers de données de correspondance depuis le dossier d'étalonnage vers les dossiers créés précédemment. Pour commencer la reconstruction du trajet, ouvrez le module de trajectoire du logiciel. Ensuite, appuyez sur emplacement des données afin de sélectionner le dossier qui a été créé avec le module d'enregistrement.Ensuite, appuyez sur le bouton de configuration du système pour ouvrir d'abord la fenêtre des paramètres, puis réglez les seuils de couleur pour la vue supérieure et inférieure. Une valeur initiale appropriée est 1000. Ensuite, sélectionnez les seuils dimensionnels pour la vue supérieure et inférieure.Une taille de départ appropriée pour un poisson zèbre de taille moyenne est de 10, utilisez 20 pour un grand poisson et 5 pour un petit poisson. Plus ces seuils sont élevés, moins le logiciel risque de détecter du bruit. Toutefois, avec une valeur trop élevée, il se peut qu’il ne puisse pas détecter le poisson.Il peut devenir nécessaire de réajuster ces seuils ultérieurement au cours de l'expérience. Pour le seuil de taille supérieur, une valeur de 3000 est généralement suffisante. Pour la longueur spécifique, conservez la valeur prédéfinie de 220.Le nombre de poissons correspond au nombre de poissons présents dans le réservoir d'observation. Le nombre maximal de points fait référence au nombre total d'images ; enregistrez ou retenez ce nombre, puis appuyez sur OK. Ensuite, sélectionnez l'acquisition du fond.La fenêtre suivante demandera de remplir les champs « de » et « à ». Après avoir chargé l'arrière-plan, ajustez les trois boîtes rouges à l'aide de la souris ; ces boîtes indiquent les zones dans lesquelles le logiciel recherche le poisson. Réduisez au minimum la boîte située à gauche.Étant donné que la vue latérale est utilisée uniquement pour l'étalonnage, appuyez maintenant sur le bouton démarrer la génération des trajectoires et la reconstruction du trajet commencera. Idéalement, l'étiquette doit être placée sur l'image du poisson ; si elle est souvent mal positionnée, ouvrez la fenêtre d'information. Ici, nous observons un cas idéal où seuls les contours du poisson sont visibles.Dans le cas d'un bruit excessif, appuyez sur arrêter dans le menu principal et choisissez de nouveaux seuils de couleur et de taille. Vérifiez également si les cadres rouges peuvent être légèrement réduits. Par exemple, en haut, afin d'exclure le bruit généré par les mouvements de l'eau, observez la trajectoire sur l'écran 3D.En cliquant avec le bouton droit de la souris, le chercheur peut choisir entre la rotation et les translations de la configuration 3D. Pour commencer le traitement des données, ouvrez le module de traitement des données, sélectionnez le projet dans la barre d'outils, puis dans le menu déroulant, choisissez nouveau et saisissez un nom d'expérience. Ensuite, sélectionnez modifier le projet.Ensuite, ajouter au projet suivi d'un nouveau groupe et indiquer un nom pour le groupe expérimental. Sélectionner maintenant le groupe expérimental dans la fenêtre de droite. Remarquer que la barre d'outils va changer.Sélectionnez le groupe d'édition, puis ajoutez au groupe, puis de nouvelles mesures. Une fenêtre de navigateur s'ouvrira. Ensuite, ouvrez le dossier créé lors de l'enregistrement et sélectionnez le sous-dossier trajectoires, puis le fichier de points lissés.Dans l'exemple présenté ici pour le groupe A, six fichiers ont été chargés et pour le groupe B, quatre fichiers. Pour commencer l'analyse, sélectionnez le fichier lissé par point dans la fenêtre de droite. Ensuite, sélectionnez le traitement des données et les paramètres uniques dans le menu déroulant.À titre d'illustration, sélectionnez le gel de durée. Une fenêtre s'ouvrira pour spécifier le gel en fonction du seuil de vitesse et du seuil de durée, afin de vous familiariser avec le programme. Essayez d'autres exemples tels que la distribution de la distance parcourue en profondeur, qui permet de déterminer le nombre de niveaux de profondeur et la fréquence d'explosions.Lorsque vous sélectionnez cette option, le traitement par lots utilisant un seuil par défaut d'environ 200 extrémités sera calculé dans ce contexte. Par défaut signifie que des délimiteurs ont été définis. Par exemple, la distribution en profondeur est actuellement calculée pour trois niveaux de profondeur et la distribution angulaire est calculée pour quatre sections.Après la génération des paramètres, une nouvelle fenêtre s'ouvre pour demander l'emplacement et le nom du fichier à créer. Ces données seront enregistrées au format CSV et peuvent être importées dans d'autres logiciels. Ici, la figure A montre un exemple typique de cadre de contrôle.Poissons-zèbres, tandis que la figure B montre un cadre type pour des poissons-zèbres traités au MK 801, enregistré durant une session matinale. Remarquez que les poissons-zèbres témoins se trouvaient près du fond et proches les uns des autres. En revanche, les poissons-zèbres traités au MK 801 se situaient près de la surface et nageaient à une distance appréciable les uns des autres.Ici, deux trajectoires représentatives de poissons-zèbres contrôles et de poissons-zèbres traités avec 10 micromolaire de MK 801 sont présentées pour une session matinale et pour une session après-midi. Sur cette figure, les distances sociales moyennes pour les témoins et les poissons traités avec 10 micromolaire de MK 801 sont présentées pour les deux sessions, et ici les chronologies des distances interindividuelles moyennes sont affichées pour les deux groupes.Ici, à la figure A, on observe la répartition des poissons zèbres sur 10 niveaux de profondeur égaux durant la session du matin, et en B, la répartition lors de la session de l'après-midi. On voit ici la répartition temporelle au sein des quatre zones radiales des groupes expérimentaux. L'encart montre la position de ces zones du centre vers la périphérie, et ici nous observons la répartition temporelle dans les quatre quadrants des groupes expérimentaux.L'encart montre l'emplacement des quadrants. Les lignes doubles représentent les murs blancs, les lignes simples représentent les murs transparents. La caméra se trouve à gauche de l'encart IE, la plus proche des quadrants un et quatre.Les astérisques noirs indiquent les comparaisons entre les groupes de la session du matin et les astérisques gris pour celles de l'après-midi. Enfin, les composantes X, Y, Z de la distance parcourue par le poisson zèbre pendant les sessions du matin et de l'après-midi sont présentées ici. La moyenne et l'erreur type de la moyenne sont indiquées.Lorsque vous travaillez avec le système, souvenez-vous que les données ne sont pas meilleures que l'enregistrement lui-même ; assurez-vous donc que le système est correctement étalonné et que les paramètres de la caméra sont optimaux. Le reste est simple et ne demande qu'à se familiariser avec les différentes étapes.

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