Name: Utilizzo di un sistema di tracciamento 3D automatizzato per registrare singoli e banchi di pesci zebra adulti (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-12-05T16:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 3 s
Description: Scopri un sistema di tracciamento 3D automatizzato per analizzare i movimenti di pesci zebra adulti e banchi. Questo metodo computazionale consente di studiare caratteristiche cinematiche, spaziali e sociali con precisione.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Gli autori non hanno riconoscimenti.

<ol><li>Brennan, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+behavioural+assays+of+translational+relevance+for+the+study+of+psychiatric+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Zebrafish behavioural assays of translational relevance for the study of psychiatric disease.</a> Rev. Neurosci. 22, 37-48 (2011).</li>
<li>Kabashi, E., Brustein, E., Champagne, N., Drapeau, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+models+for+the+functional+genomics+of+neurogenetic+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim.+Biophys.+Acta%22%5BJournal%5D)">Zebrafish models for the functional genomics of neurogenetic disorders.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1812, 335-345 (2011).</li>
<li>McCollum, C. W., Ducharme, N. A., Bondesson, M., Gustafsson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+toxicity+screening+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Birth.+Defects.+Res.+C.+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Developmental toxicity screening in zebrafish.</a> Birth. Defects. Res. C. Embryo Today. 93, 67-114 (2011).</li>
<li>Kurta, A., Palestis, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+ethanol+on+the+shoaling+behavior+of+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Dose-Response%22%5BJournal%5D)">Effects of ethanol on the shoaling behavior of zebrafish (Danio rerio).</a> Dose-Response. 8, 527-533 (2010).</li>
<li>Sison, M., Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+performance+altering+effects+of+MK-801+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral performance altering effects of MK-801 in zebrafish (Danio rerio).</a> Behav. Brain Res. 220, 331-337 (2011).</li>
<li>Delcourt, J., Denoël, M., Ylieff, M., Poncin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Video+multitracking+of+fish+behaviour%3A+a+synthesis+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Fish+Fish%22%5BJournal%5D)">Video multitracking of fish behaviour: a synthesis and future perspectives.</a> Fish Fish. 14, 186-204 (2013).</li>
<li>Zhu, L., Weng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catadioptric+stereo-vision+system+for+the+real-time+monitoring+of+3D+behavior+in+aquatic+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Catadioptric stereo-vision system for the real-time monitoring of 3D behavior in aquatic animals.</a> Physiol. Behav. 91, 106-119 (2007).</li>
<li>System for 3D monitoring and analysis of motion behavior of targets. US patent. , 8306260 (2012).</li>
<li>Cachat, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+neurophenotyping+of+adult+zebrafish+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional neurophenotyping of adult zebrafish behavior.</a> PLoS ONE. 6, e17597(2011).</li>
<li>Maaswinkel, H., Zhu, L., Weng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immediate+and+the+delayed+effects+of+buspirone+on+zebrafish+%28Danio+rerio%29+in+an+open+field+test%3A+a+3-D+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The immediate and the delayed effects of buspirone on zebrafish (Danio rerio) in an open field test: a 3-D approach.</a> Behav. Brain Res. 234, 365-374 (2012).</li>
<li>Maaswinkel, H., Le, X., He, L., Zhu, L., Weng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissociating+the+effects+of+habituation%2C+black+walls%2C+buspirone+and+ethanol+on+anxiety-like+behavioral+responses+in+shoaling+zebrafish.+A+3D+approach+to+social+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Dissociating the effects of habituation, black walls, buspirone and ethanol on anxiety-like behavioral responses in shoaling zebrafish. A 3D approach to social behavior.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 108, 16-27 (2013).</li>
<li>Maaswinkel, H., Zhu, L., Weng, W. The advantages of a 3D-automatic recording system for the study of shoaling behavior in zebrafish. 10th International Conference Zebrafish Development and Genetics, Madison, , (2012).</li>
<li>Maaswinkel, H., Zhu, L., Weng, W. An automatic recording system to quantify antagonistic interactions between zebrafish. Abstract. 10th International Conference Zebrafish Development and Genetics, Madison, , (2012).</li>
<li>Spence, R., Gerlach, G., Lawrence, C., Smith, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+behaviour+and+ecology+of+the+zebrafish%2C+Danio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Rev.+Camb.+Phil.+Soc%22%5BJournal%5D)">The behaviour and ecology of the zebrafish, Danio rerio.</a> Biol. Rev. Camb. Phil. Soc. 83, 13-34 (2008).</li>
<li>Krause, J., Hartmann, N., Pritchard, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+nutritional+state+on+shoal+choice+in+zebrafish%2C+Danio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Behav%22%5BJournal%5D)">The influence of nutritional state on shoal choice in zebrafish, Danio rerio.</a> Anim. Behav. 57, 771-775 (1999).</li>
<li>Speedie, N., Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alarm+substance+induced+behavioral+responses+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Alarm substance induced behavioral responses in zebrafish (Danio rerio).</a> Behav. Brain Res. 188, 168-177 (2008).</li>
<li>Gebauer, D. L., Pagnussat, N., Piato, A. L., Schaeffer, I. C., Bonan, C. D., Lara, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+anxiolytics+in+zebrafish%3A+similarities+and+differences+between+benzodiazepines%2C+buspirone+and%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Effects of anxiolytics in zebrafish: similarities and differences between benzodiazepines, buspirone and.</a> 99, 480-486 (2011).</li>
<li>Paull, G. C., Filby, A. L., Giddins, H. G., Coe, T. S., Hamilton, P. B., Tyler, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dominance+hierarchies+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29+and+their+relationship+with+reproductive+success%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">Dominance hierarchies in zebrafish (Danio rerio) and their relationship with reproductive success.</a> Zebrafish. 7, 109-117 (2010).</li>
<li>Engeszer, R. E., Ryan, M. J., Parichy, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learned+social+preference+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Learned social preference in zebrafish.</a> Curr. Biol. 14, 881-884 (2004).</li>
<li>Mathur, P., Guo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+zebrafish+as+a+model+to+understand+mechanisms+of+addiction+and+complex+neurobehavioral+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Dis%22%5BJournal%5D)">Use of zebrafish as a model to understand mechanisms of addiction and complex neurobehavioral phenotypes.</a> Neurobiol. Dis. 40, 66-72 (2010).</li>
<li>Tropepe, V., Sive, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+zebrafish+be+used+as+a+model+to+study+the+neurodevelopmental+causes+of+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Can zebrafish be used as a model to study the neurodevelopmental causes of autism.</a> Genes Brain Behav. 2, 268-281 (2003).</li>
<li>Echevarria, D. J., Hammack, C. M., Pratt, D. W., Hosemann, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+behavioral+test+battery+to+assess+global+drug+effects+using+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Comp.+Psychol%22%5BJournal%5D)">A novel behavioral test battery to assess global drug effects using zebrafish.</a> Int. J. Comp. Psychol. 21, 19-34 (2008).</li>
<li>Seibt, K. J., Piato, A. L., Luz Oliveira, da, Capiotti, R., Vianna, K. M., R, M., Bonan, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antipsychotic+drugs+reverse+MK-801+induced+cognitive+and+social+interaction+deficits+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain.+Res%22%5BJournal%5D)">Antipsychotic drugs reverse MK-801 induced cognitive and social interaction deficits in zebrafish (Danio rerio).</a> Behav. Brain. Res. 224, 135-139 (2011).</li>
<li>Zou, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+dose+MK-801+reduces+social+investigation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Low dose MK-801 reduces social investigation in mice.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 90, 753-757 (2008).</li>
<li>Ng, M. C., Hsu, C. P., Wu, Y. J., Wu, S. Y., Yang, Y. L., Lu, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+MK-801-induced+impairment+of+inhibitory+avoidance+learning+in+zebrafish+via+inactivation+of+extracellular+signal-regulated+kinase+%28ERK%29+in+telencephalon%5BTitle%5D)+AND+%22Fish+Physiol.+Biochem%22%5BJournal%5D)">Effect of MK-801-induced impairment of inhibitory avoidance learning in zebrafish via inactivation of extracellular signal-regulated kinase (ERK) in telencephalon.</a> Fish Physiol. Biochem. 38, 1099-1106 (2012).</li>
<li>Sison, M., Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associative+learning+performance+is+impaired+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29+by+the+NMDA-R+antagonist+MK-801%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Associative learning performance is impaired in zebrafish (Danio rerio) by the NMDA-R antagonist MK-801.</a> Neurobiol. Learn. Mem. 96, 230-237 (2011).</li>
<li>Swain, H. A., Sigstad, C., Scalzo, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+dizocilpine+%28MK-801%29+on+circling+behavior%2C+swimming+activity%2C+and+place+preference+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotox.+Teratol%22%5BJournal%5D)">Effects of dizocilpine (MK-801) on circling behavior, swimming activity, and place preference in zebrafish (Danio rerio).</a> Neurotox. Teratol. 26, 725-729 (2004).</li>
<li>Vezzani, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetics+of+MK-801+and+its+effect+on+quinolinic+acid-induced+seizures+and+neurotoxicity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharmacol.+Exp.+Ther%22%5BJournal%5D)">Kinetics of MK-801 and its effect on quinolinic acid-induced seizures and neurotoxicity in rats.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 249, 278-283 (1989).</li>
<li>Green, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+high-throughput+neurophenotyping+of+zebrafish+social+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Automated high-throughput neurophenotyping of zebrafish social behavior.</a> J. Neurosci. Methods. 210, 266-271 (2012).</li>
<li>Rung, J. P., Carlsson, A., Rydén Markinhuhta, K., Carlsson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((+%28%2B%29-MK-801+induced+social+withdrawal+in+rats%3B+a+model+for+negative+symptoms+of+schizophrenia%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neuro-psychopharmacol.+Biol.+Psych%22%5BJournal%5D)"> (+)-MK-801 induced social withdrawal in rats; a model for negative symptoms of schizophrenia.</a> Prog. Neuro-psychopharmacol. Biol. Psych. 29, 827-832 (2005).</li>
<li>Gururajan, A., Taylor, D. A., Malone, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabidiol+and+clozapine+reverse+MK-801-induced+deficits+in+social+interaction+and+hyperactivity+in+Sprague-Dawley+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Cannabidiol and clozapine reverse MK-801-induced deficits in social interaction and hyperactivity in Sprague-Dawley rats.</a> J. Psychopharmacol. 226, 1317-1332 (2012).</li>
<li>Burket, J. A., Cannon, W. R., Jacome, L. F., Deutsch, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MK-801%2C+a+noncompetitive+NMDA+receptor+antagonist%2C+elicits+circling+behavior+in+the+genetically+inbred+Balb%2Fc+mouse+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res.+Bull%22%5BJournal%5D)">MK-801, a noncompetitive NMDA receptor antagonist, elicits circling behavior in the genetically inbred Balb/c mouse strain.</a> Brain Res. Bull. 83, 337-339 (2010).</li>
<li>Saunders, J. A., Gandal, M. J., Roberts, T. P., Siegel, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NMDA+antagonist+MK801+recreates+auditory+electrophysiology+disruption+present+in+autism+and+other+neurodevelopmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">NMDA antagonist MK801 recreates auditory electrophysiology disruption present in autism and other neurodevelopmental disorders.</a> Behav. Brain Res. 234, 233-237 (2012).</li>
<li>Brosda, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+and+parametrical+investigation+of+prepulse+inhibition+of+startle+and+prepulse+elicited+reactions+in+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Pharmacological and parametrical investigation of prepulse inhibition of startle and prepulse elicited reactions in Wistar rats.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 99, 22-28 (2011).</li>
<li>Wong, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analyzing+habituation+responses+to+novelty+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Analyzing habituation responses to novelty in zebrafish (Danio rerio).</a> Behav. Brain Res. 208, 450-457 (2010).</li>
<li>Maximino, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parametric+analyses+of+anxiety+in+zebrafish+scototaxis%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Parametric analyses of anxiety in zebrafish scototaxis.</a> Behav. Brain Res. 210, 1-7 (2010).</li>
<li>Blaser, R. E., Rosemberg, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measures+of+anxiety+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29%3A+dissociation+of+black%2Fwhite+preference+and+novel+tank+test%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Measures of anxiety in zebrafish (Danio rerio): dissociation of black/white preference and novel tank test.</a> PloS One. 7, e36931(2012).</li>
</ol>

Hans Maaswinkel, Liqun Zhu e Wei Weng sono dipendenti di xyZfish, Ronkonkoma NY, che produce il sistema di tracciamento utilizzato in questo articolo.

La procedura sperimentale qui mostrata consente di registrare singoli pesci zebra, coppie di pesci zebra (ad esempio per studiare l'accoppiamento o l'aggressività) e banchi di pesci zebra (come mostrato nell'esempio rappresentativo). Il sistema è particolarmente adatto per ottenere contemporaneamente informazioni sulla distribuzione 3D (verticale e orizzontale), sulle caratteristiche cinematiche (ad es. velocità, accelerazione, angolo di sterzata) e sui parametri sociali (ad es. coesione sociale). Di seguito, elenchiamo alcune questioni importanti da considerare quando si pianificano gli esperimenti.
A seconda della procedura sperimentale, possono essere studiati diversi sistemi comportamentali. Ad esempio, per esplorare la neofobia (cioè la paura per nuovi ambienti) la registrazione dovrebbe essere avviata immediatamente dopo aver introdotto il pesce zebra nella vasca di osservazione (dopo aver aspettato solo pochi secondi che l'acqua si calmasse per diminuire il rumore), senza previa assuefazione11,17,37. D'altra parte, alcuni argomenti di ricerca potrebbero richiedere che il pesce zebra sia ben abituato, ad esempio quando si studiano gli effetti dei feromoni di allarme16. Quando si studiano gruppi di pesci zebra, lo sperimentatore dovrebbe essere consapevole che, sebbene il software riduca al minimo il cambio di tag, in questo momento non è possibile seguire i singoli pesci zebra per tutto il tempo. Anche questo non è importante per gli studi di branco in cui l'enfasi è sulla coesione sociale, ma sarebbe cruciale quando si esplora l'aggressività o l'accoppiamento. La riassegnazione manuale dei tag è un'opzione, ma può richiedere molto tempo.
Il colore delle pareti del contenitore di osservazione e della camera di osservazione può avere una grande influenza sul comportamento del pesce zebra. Ad esempio, è stato descritto che le pareti bianche inducono risposte di avversione36, 37. Quando provi colori diversi, tieni a mente due cose: 1) è importante che la parete frontale (cioè la parete più vicina alla telecamera) rimanga trasparente e che anche un coperchio (se ne viene utilizzato uno) deve essere trasparente; 2) Quando si seleziona un colore mai utilizzato prima, determinare prima se il contrasto tra zebrafish e sfondo è appropriato per la registrazione. Eseguire un test. La modifica delle impostazioni della fotocamera per la registrazione (guadagno, otturatore, rosso e blu, come spiegato nei passaggi 2.5 e 2.6) e delle impostazioni per la ricostruzione della traiettoria (ad esempio, le soglie di colore e dimensione, come spiegato nei passaggi 3.3, 3.5, 3.11 e 3.12) può fare una grande differenza. Ancora una volta, l'esperienza con il sistema farà molto per decidere cosa è possibile.
A seconda dello scopo dell'esperimento, potrebbe essere desiderabile una sorgente luminosa con caratteristiche diverse (ad es. spettro, intensità). Le barre LED possono essere facilmente sostituite. Assicurati che la luce raggiunga ogni parte del contenitore.
Se l'esperimento richiede che il pesce zebra rimanga nel contenitore di osservazione per diverse ore, assicurarsi di fornire aerazione. Un tubo dell'aria può essere fissato all'angolo posteriore destro utilizzando una clip. Verificare sullo schermo del computer che la clip non interferisca con la registrazione, ad es. che il pesce zebra non è mai nascosto alla vista. Nelle figure 2A e 2B la clip nera può essere vista nella vista dall'alto. Idealmente, l'aerazione dovrebbe essere fornita prima o tra le registrazioni, ma non durante la registrazione per evitare rumore. Si noti inoltre che l'attivazione o la disattivazione di una forte aerazione potrebbe spaventare il pesce zebra.
Se l'esperimento richiede di tenere il pesce zebra nel contenitore per tutta la notte, è utile coprire la camera di osservazione con un coperchio trasparente per evitare che il pesce zebra salti fuori (che è un evento molto comune). Se il coperchio non viene rimosso prima della registrazione (per non disturbare il pesce zebra), considerare i seguenti due punti: 1) assicurarsi che le immagini speculari delle sorgenti luminose non ostruiscano la registrazione (ad esempio spostando le sorgenti luminose o scegliendo un coperchio che rifletta la luce solo in minima parte); 2) considerare che il coperchio potrebbe appannarsi se utilizzato durante la notte, tanto più che in questo caso deve essere prevista anche l'aerazione; Un modo per ridurre questo problema è scegliere un coperchio con piccoli fori.
Per alcuni esperimenti potrebbe essere essenziale determinare il comportamento di base del pesce zebra prima di somministrare un farmaco. In questo caso, il farmaco può essere aggiunto tra una sessione e l'altra per mezzo di un tubo (simile al tubo di aerazione discusso sopra).
Sebbene l'attenzione si sia concentrata sulla registrazione del pesce zebra (Danio rerio), anche altre specie ittiche possono, naturalmente, essere registrate con il sistema. È stato utilizzato per studiare i comportamenti dei pesci rossi (giovani) (Carassius auratus), del barbo tigre (Barbus tetrazona) e della coda di spada verde (Xiphophorus helleri).
Infine, va notato che sono principalmente possibili altre dimensioni delle vasche di osservazione. Tuttavia, sarebbe necessario riconfigurare il sistema e trovare un buon equilibrio tra risoluzione spaziale e temporale quando si utilizzano contenitori di osservazione molto più grandi. Inoltre, la forma del contenitore deve essere cuboide. Il numero di zebrafish o di altri soggetti sperimentali è teoricamente illimitato; Tuttavia, lo scambio di tag aumenta con il numero di soggetti.

Il pesce zebra è diventato un modello importante per la ricerca biologica e farmacologica1-3. Il monitoraggio dei modelli di movimento e di distribuzione spaziale dei singoli pesci zebra e dei banchi di pesci zebra è inestimabile. Gli studi più vecchi applicano la quantificazione manuale basata sulle immagini registrate4. Ora, i sistemi di tracciamento video automatico 2D sono comunemente usati5. Tuttavia, poiché il pesce zebra e molti altri animali acquatici e non acquatici si muovono in uno spazio tridimensionale, l'interesse per i sistemi 3Dsta crescendo6. Il sistema 3D descritto è stato pubblicato per la prima volta nel 20077. Per dettagli tecnici e confronti con altri sistemi vedere8. Il vantaggio fondamentale di questo sistema rispetto ad altri sistemi è che acquisisce due (opzionalmente tre) viste sincrone e indipendenti utilizzando un sistema di mirroring e che utilizza un protocollo di calibrazione a due fasi. Nella prima fase, viene calibrata la geometria 3D dell'impianto stereo (formato dalla fotocamera e dagli specchi). Nella seconda fase, vengono corretti gli errori non lineari introdotti dalla rifrazione della luce. Quando si studiano gli animali acquatici, l'impatto della rifrazione della luce può essere considerevole se non corretto. Altri sistemi finora pubblicati (anche gli sviluppi più recenti9) omettono la procedura di calibrazione in due fasi. Per dettagli tecnici sull'identificazione degli oggetti, l'occlusione con tracciamento multi-oggetto, il rumore jigging, ecc. Si rimanda il lettore alle pubblicazioni originali8,9. Il sistema è stato validato per lo studio delle risposte comportamentali ansioso-simili10,11, allo shoaling8,11,12 e, in uno studio preliminare, per il comportamento antagonista nel pesce zebra13. È stato testato anche per altre specie ittiche (pesce rosso8, coda di spada, barbo tigre) e per topi9.
Di seguito vengono descritti i protocolli per la calibrazione e per l'utilizzo del sistema e vengono presentati i risultati di un esperimento che testa gli effetti dell'antagonista non competitivo MK-801 sul pesce zebra in branco come esempio rappresentativo per dimostrare il tipo di dati che possono essere ottenuti con il sistema.
Sia nell'ambiente naturale che negli acquari, il pesce zebra di solito nuota nei banchi14. Le preferenze di allevamento sembrano dipendere da diversi fattori, come l'allevamento, il sesso e la disponibilità di cibo14,15. È interessante notare che la distanza tra i singoli pesci zebra in un branco si riduce quando sono presenti segnali di potenziale pericolo, come i feromoni di allarme16 o la novità11. Il paradigma dello shoaling viene quindi utilizzato anche per testare farmaci ansiolitici17. Le gerarchie di dominanza18 e l'apprendimento sociale19 sono aspetti affascinanti del comportamento del pesce zebra. A causa del suo carattere comportamentale sociale altamente sviluppato, il pesce zebra è diventato anche di interesse per la ricerca sull'autismo20,21.
MK-801 è stato segnalato per alterare il comportamento sociale nel pesce zebra5,22,23, che ricorda i suoi effetti sui mammiferi24. Tuttavia, MK-801 ha anche molti altri effetti su altri comportamenti (come il comportamento di nuoto, l'evitamento inibitorio e la preferenza di luogo25-27). Pertanto, è fondamentale, negli esperimenti iniziali, ottenere quante più informazioni possibili dalle osservazioni di base. Ciò fornirà la base per la progettazione di esperimenti più mirati.
Indagine sull'apparato di registrazione e sul software
Nella sua configurazione attuale, il contenitore di osservazione (25 cm x 25 cm x 18 cm, L x P x A), che contiene il pesce zebra, è posizionato nella camera di osservazione (91 cm x 46 cm x 56 cm, L x P x A). La camera contiene anche una telecamera, uno specchio sospeso a circa >45° sopra il contenitore e barre luminose a LED. La Figura 1 mostra un diagramma semplificato. La telecamera registra sia la vista frontale che la vista dall'alto (specchio) per costruire le traiettorie 3D del pesce zebra determinando le sue coordinate x, y e z. Ai fini dell'orientamento, i vettori di coordinate sono presentati nell'angolo anteriore sinistro del contenitore di osservazione (posizione rispetto alla telecamera), che corrisponde ai vettori presentati nelle viste 3D (ad es. Figura 15) generate dal Path Reconstruction Module (vedi più avanti). La frequenza di campionamento dipende dalla fotocamera e dal computer. Nei nostri esperimenti è di circa 40 fotogrammi/sec (fps). La risoluzione spaziale dei fotogrammi registrati è di 640 x 480 pixel (questa configurazione è stata scelta come equilibrio ottimale tra risoluzione spaziale e temporale). È richiesto Windows XP o superiore.
Prima della prima registrazione, il sistema deve essere calibrato per determinare le posizioni delle pareti del contenitore e della superficie dell'acqua, per determinare il fattore di scala dei fotogrammi registrati e per regolare l'errore considerevole generato dalla rifrazione della luce quando passa dall'acqua all'aria. In linea di principio, la calibrazione deve essere eseguita solo durante l'installazione iniziale e dopo che parti della configurazione, come la fotocamera o lo specchio, sono state spostate o sostituite. Tuttavia, è buona norma verificare di tanto in tanto se la calibrazione è ancora corretta e ricalibrare, se necessario.
Il software è composto da tre moduli. Il Recordings Module registra i fotogrammi (due fotogrammi di esempio sono mostrati nella Figura 2). Il modulo Traiettoria ricostruisce i percorsi di ogni zebrafish. Il modulo di elaborazione dati calcola una serie di parametri cinematici e spaziali standard. Ai fini di ulteriori analisi, i dati possono essere importati in fogli di calcolo o software statistici.

<table><tbody><tr><td>Hardware di tracciamento AABT-3D</td><td>xyZfish</td><td>AABT II</td><td>Include fotocamera, scheda video, scomparto di osservazione con specchio e illuminazione</td></tr><tr><td>AABT-3D Attrezzatura di calibrazione</td><td>xyZfish</td><td>calib</td><td>Contiene pannello di calibrazione e specchio laterale</td></tr><tr><td>AABT-3D Contenitori di osservazione cubi</td><td>xyZfish</td><td></td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>AABT-3D Software di tracciamento</td><td>xyZfish</td><td>v.1.0</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Computer</td><td>opzionale</td><td>N/A</td><td>Windows XP o superiore</td></tr> <tr><td>(+)-MK-801 maleato di idrogeno</td><td>Sigma</td><td>M107</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Pompa ad aria</td><td>Fusion</td><td>500</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Tubo linea aria 3/16"</td><td>Lee' s Prodotti per acquari e animali domestici</td><td>14508</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Clip per raccoglitori medi</td><td>OfficeDepot</td><td>561339</td><td>Per collegare la linea aerea al contenitore di osservazione</td></tr></tbody></table>

utilizzo di un sistema di tracciamento 3d automatizzato per registrare singoli e banchi di pesci zebra adulti

Using an Automated 3D-tracking System to Record Individual and Shoals of Adult Zebrafish

Come molti animali acquatici, il pesce zebra (Danio rerio) si muove in uno spazio 3D. È quindi preferibile utilizzare un sistema di registrazione 3D per studiarne il comportamento. Il sistema di tracciamento video automatico presentato realizza ciò utilizzando un sistema a specchio e una procedura di calibrazione che corregge il notevole errore introdotto dal passaggio della luce dall'acqua all'aria. Con questo sistema è possibile registrare sia singoli che gruppi di pesci zebra adulti. Prima dell'uso, il sistema deve essere calibrato. Il sistema è composto da tre moduli: Registrazione, Ricostruzione del percorso ed Elaborazione dei dati. Vengono presentati i protocolli passo-passo per la calibrazione e l'utilizzo dei tre moduli. A seconda della configurazione sperimentale, il sistema può essere utilizzato per testare la neofobia, l'avversione bianca, la coesione sociale, le disabilità motorie, l'esplorazione di nuovi oggetti, ecc. È particolarmente promettente come strumento di primo passo per studiare gli effetti di farmaci o mutazioni sui modelli comportamentali di base. Il sistema fornisce informazioni sulla distribuzione verticale e orizzontale del pesce zebra, sulle componenti xyz dei parametri cinematici (come locomozione, velocità, accelerazione e angolo di virata) e fornisce i dati necessari per calcolare i parametri per le coesie sociali durante i test dei banchi.

Viene descritto l'uso di un sistema video automatico 3D in grado di tracciare singoli e gruppi di pesci zebra. Come esempio applicativo esploriamo gli effetti dell'antagonista del recettore NMDA MK-801 sui banchi di zebrafish.

Utilizzo di un sistema di tracciamento 3D automatizzato per registrare singoli e banchi di pesci zebra adulti

Like many aquatic animals, zebrafish (Danio rerio) moves in a 3D space. It is thus preferable to use a 3D recording system to study its behavior. The ...

L'obiettivo generale di questa procedura è studiare i modelli di movimento tridimensionali del pesce zebra o di altri animali acquatici e analizzarne le caratteristiche cinematiche, spaziali e sociali. Questo consente di rilevare comportamenti alterati dovuti a mutazioni genetiche o a fattori chimici e ambientali. Ciò viene ottenuto innanzitutto calibrando il sistema, operazione che corregge anche la notevole distorsione dell'immagine generata dalla rifrazione.Il secondo passaggio consiste nel registrare fotogrammi video con una risoluzione temporale relativamente elevata da almeno due angolazioni diverse simultaneamente. Successivamente, il software ricostruisce le traiettorie dei pesci. Vengono applicati algoritmi avanzati per ridurre l'effetto del rumore e per inferire la posizione di un pesce in caso di occlusione o raggruppamento.L'ultimo passaggio consiste nell'analizzare i dati ed eseguire l'analisi statistica di velocità, accelerazione, angolo di virata, distribuzione orizzontale e verticale nel contenitore di osservazione, distanze inter-individuali e altri parametri di interesse. In definitiva, il tracciamento 3D calibrato ad alta velocità è utile per studiare i deficit comportamentali nei zebrafish mutanti e gli effetti di farmaci su una varietà di sistemi comportamentali. Ai fini della scoperta di farmaci, un vantaggio del sistema è che consente lo studio del comportamento dei pesci in 3D.Questo è importante perché i pesci si muovono naturalmente in tutte e tre le dimensioni e, quando si registrano più pesci contemporaneamente, una registrazione in 2D può risultare molto fuorviante nell'analisi delle configurazioni spaziali del gruppo. Un altro vantaggio del sistema è che corregge la rifrazione della luce, che, se non corretta, può portare a errori di misurazione significativi nella configurazione attuale. Il contenitore di osservazione che contiene i pesci zebra è posizionato all'interno della camera di osservazione.La camera contiene inoltre una telecamera, uno specchio sospeso a circa 45 gradi sopra il contenitore e barre luminose a LED. Prima della registrazione, calibrare il sistema per determinare la posizione delle pareti del contenitore e della superficie dell'acqua, nonché il fattore di scala dei fotogrammi registrati, correggendo anche l'errore generato dalla rifrazione della luce nel passaggio dall'acqua all'aria. Al termine della calibrazione, è necessario effettuare una prova con un pesce fittizio.La ricalibrazione deve essere eseguita se le posizioni dello specchio o della telecamera non sono corrette o se si verificano problemi nel tracciamento. Per iniziare una sessione di registrazione, posizionare il contenitore di osservazione riempito fino ai segni con acqua all'interno della camera di osservazione. I piedini del contenitore devono essere inseriti nei fori di allineamento.Orientare i contenitori in modo che le pareti semitrasparenti o opache siano rivolte verso il lato lontano e verso destra, visto dalla telecamera. Successivamente, accendere le luci nel compartimento, quindi inserire il pesce nel contenitore e chiudere le tende. Aprire il modulo di registrazione e sullo schermo apparirà l'immagine della vista frontale e superiore del contenitore.Inizialmente, l'immagine acquisita potrebbe non essere ideale e potrebbe quindi richiedere alcune regolazioni per ottenere un contrasto sufficiente tra il pesce e lo sfondo. Per regolare l'immagine, selezionare il controllo della fotocamera, quindi nella finestra delle impostazioni generali che si apre, deselezionare le caselle mostrate qui, e regolare quindi l'otturatore e il guadagno in modo che l'immagine non risulti sovraesposta. Successivamente, sul lato sinistro della finestra di controllo della fotocamera, selezionare il bilanciamento del bianco a colori e, nella nuova finestra, deselezionare la casella auto e regolare i valori rosso e blu per ottenere il migliore contrasto cromatico sia nella vista frontale che in quella superiore.Potrebbero essere necessari diversi aggiustamenti anche dopo il completamento degli aggiustamenti. Dal menu principale del modulo di registrazione, selezionare la posizione dei dati per creare o selezionare una cartella. Ogni registrazione dovrebbe avere la propria cartella, che deve essere una sottocartella della cartella dell'esperimento.Ora premere "start recording" e inserire un numero intero per la durata della registrazione in minuti, quindi premere "ok" e la sessione di registrazione sperimentale avrà inizio. Al termine delle registrazioni, copiare e incollare i dati del contenitore animale e le sottocartelle dei dati di corrispondenza dalla cartella di calibrazione nelle cartelle precedentemente create. Per iniziare la ricostruzione del percorso, aprire il modulo di traiettoria del software. Quindi premere "data location" per selezionare la cartella creata con il modulo di registrazione.Successivamente, premere il pulsante di configurazione del sistema per aprire prima la finestra dei parametri, quindi regolare le soglie del colore per la vista superiore e inferiore. Un valore iniziale consigliato è 1000. Successivamente, selezionare le soglie dimensionali per la vista superiore e quella inferiore.Una dimensione iniziale adeguata per un pesce zebra di taglia media è 10, usare 20 per un pesce grande e 5 per un pesce piccolo. Più elevati sono questi valori soglia, minore sarà la probabilità che il software rilevi rumore. Tuttavia, con un valore troppo alto, potrebbe non essere in grado di rilevare il pesce.Potrebbe essere necessario ricalibrare queste soglie in una fase successiva dell'esperimento. Per la soglia superiore di dimensione, un valore di 3000 è generalmente sufficiente. Per la lunghezza specifica, mantenere il valore preimpostato di 220.Il numero di pesci indica il numero di pesci nel serbatoio di osservazione. Il numero massimo di punti si riferisce al numero totale di fotogrammi; registrare o ricordare questo numero e premere Ok. Quindi selezionare acquisizione dello sfondo.Nella finestra successiva verrà richiesto di compilare i campi "da" e "a". Dopo aver caricato lo sfondo, regolare le tre caselle rosse utilizzando il mouse; queste caselle indicano le aree in cui il software ricerca il pesce. Ridurre al minimo la casella a sinistra.Poiché la vista laterale viene utilizzata solo per la calibrazione, premere ora il pulsante per iniziare a generare le traiettorie e avrà inizio la ricostruzione del percorso. Idealmente, il tag dovrebbe essere posizionato sull'immagine del pesce; se viene spesso posizionato in modo errato, aprire la finestra delle informazioni. Qui vediamo un caso ideale in cui sono visibili soltanto i contorni del pesce.In caso di rumore eccessivo, premere interrompi nel menu principale e scegliere nuove soglie di colore e dimensione. Verificare inoltre se le caselle rosse possono essere leggermente ridotte. Ad esempio, nella parte superiore, per escludere il rumore generato dai movimenti dell'acqua, osservare la traiettoria sullo schermo 3D.Facendo clic con il tasto destro del mouse, il ricercatore può scegliere tra rotazione e traslazione della configurazione 3D. Per iniziare l'elaborazione dei dati, aprire il modulo di elaborazione dati, selezionare il progetto sulla barra degli strumenti, quindi dal menu a discesa scegliere nuovo e inserire un nome per l'esperimento. Successivamente, selezionare modifica progetto.Quindi aggiungere al progetto seguito da un nuovo gruppo e inserire un nome per il gruppo sperimentale. Selezionare ora il gruppo sperimentale nella finestra di destra. Si noti che la barra degli strumenti verrà modificata.Selezionare modifica gruppo, quindi aggiungi al gruppo e poi nuove misurazioni. Verrà aperta una finestra del browser. Successivamente, aprire la cartella creata durante la registrazione e selezionare la sottocartella traiettorie e quindi il file dei punti smussati.Nell'esempio presentato qui per il gruppo A, sono stati caricati sei file e per il gruppo B quattro file. Per iniziare l'analisi, selezionare il file smussato nel punto nella finestra di destra. Quindi selezionare l'elaborazione dei dati e i parametri ad un singolo valore dal menu a tendina.A titolo illustrativo, selezionare il congelamento della durata. Si aprirà una finestra per specificare il congelamento in termini di soglia di velocità e soglia di durata, al fine di prendere familiarità con il programma. Provare altri esempi come la distribuzione della profondità della distanza percorsa, che consente di determinare il numero di livelli di profondità e la frequenza degli scatti.Quando si seleziona l'opzione, nell'ambiente specificato verrà eseguito un trattamento batch utilizzando una soglia predefinita di circa 200 punti finali. Per impostazione predefinita, ciò significa che sono stati impostati dei delimitatori. Ad esempio, attualmente la distribuzione in profondità viene calcolata per tre livelli di profondità e la distribuzione angolare viene calcolata per quattro sezioni.Dopo aver generato i parametri, verrà aperta una nuova finestra che richiederà il percorso e il nome del file da creare. Questi verranno salvati in formato CSV e potranno essere importati in altri software. Qui, la figura A mostra un esempio tipico di fotogramma di controllo.Il pesce zebra, mentre la figura B mostra un esempio tipico di fotogramma relativo a pesci zebra trattati con MK 801, entrambi registrati durante una sessione mattutina. Si noti che i pesci zebra di controllo si trovavano vicini al fondo e ravvicinati tra loro. Al contrario, i pesci zebra trattati con MK 801 si trovavano vicini alla superficie e nuotavano a notevole distanza l'uno dall'altro.Qui vengono presentate due traiettorie rappresentative per pesci zebra controlli e pesci zebra trattati con 10 micromolari di MK 801, rispettivamente per una sessione mattutina e per una sessione pomeridiana. In questa figura sono mostrate le distanze sociali medie per i controlli e per i pesci trattati con 10 micromolari di MK 801 per entrambe le sessioni, mentre qui vengono presentate le cronologie delle distanze inter-individuali medie per entrambi i gruppi.Qui, nella figura A, osserviamo la distribuzione dei pesci zebra su 10 livelli di profondità uguali durante la sessione mattutina e, in B, la distribuzione per la sessione pomeridiana. Qui si vede la distribuzione temporale nei quattro settori radiali dei gruppi sperimentali. L'inserto mostra la posizione di questi settori dal centro verso la periferia e qui osserviamo la distribuzione temporale nei quattro quadranti dei gruppi sperimentali.L'insetto mostra la posizione dei quadranti. Le linee doppie rappresentano pareti bianche, le linee singole rappresentano pareti trasparenti. La telecamera si trova a sinistra dell'insetto IE, più vicina ai quadranti uno e quattro.Gli asterischi neri indicano i confronti tra i gruppi della sessione mattutina e gli asterischi grigi quelli della sessione pomeridiana. Infine, qui sono mostrate le componenti X, Y, Z della distanza percorsa dai pesci zebra durante le sessioni mattutina e pomeridiana. Sono riportati la media e l'errore standard della media.Quando si lavora con il sistema, ricordare che i dati sono accurati solo quanto la registrazione; assicurarsi quindi che il sistema sia ben calibrato e che le impostazioni della telecamera siano ottimali. Il resto è semplice e richiede soltanto familiarità con i diversi passaggi.

using-an-automated-3d-tracking-system-to-record-individual-shoals

Research

Ricerca

JoVE Journal

Biology

Biologia

Utilizzo di un sistema di tracciamento 3D automatizzato per registrare individui e banchi di pesci zebra adulti

Il VisioTracker è un sistema automatizzato per l'analisi quantitativa di prestazioni visive dei pesci adulti e larve piccole basa sulla registrazione dei movimenti oculari. È dotato di un controllo completo sulle proprietà stimolo visivo e analisi in tempo reale, consentendo di alto-rendimento di ricerca in settori quali lo sviluppo del sistema visivo e la funzione, farmacologia, studi di circuiti neurali e l'integrazione senso-motoria.

VisioTracker, un approccio innovativo automatizzato di analisi oculomotoria

Il video descrive l'evitamento e il test della tigmotassi delle larve di pesce zebra. Il video esamina il comportamento delle larve di pesce zebra in risposta a uno stimolo visivo avversivo.

Saggio di evitamento e tigmotassi del pesce zebra: un metodo ad alto rendimento per esaminare il comportamento larvale in risposta a uno stimolo visivo avversivo

Il nostro laboratorio ha sviluppato un sistema di imaging automatizzato romanzo ad alta produttività che è utile per il rilevamento di diversi comportamenti differenti in 7 giorni di età zebrafish larve. Il sistema può essere usato per rilevare sottili cambiamenti nel comportamento dopo le larve sono stati esposti agli agenti tossici ambientali o farmaceutici.

Automatizzati high-throughput analisi comportamentali nelle larve Zebrafish

I pesci zebra sono un modello eccellente per studiare la funzione muscolare e le malattie. Durante l'embriogenesi precoce, il pesce zebra inizia contrazioni muscolari regolari producendo un comportamento ritmico di nuoto, che viene alterato quando il muscolo viene interrotto. Qui descriviamo una risposta evocata al tatto e un saggio di locomozione per esaminare le prestazioni di nuoto come misura della funzione muscolare.

Utilizzando risposta al tocco evocata e di locomozione saggi per valutare le prestazioni e sulla funzione muscolare in Zebrafish

Qui, presentiamo un protocollo per progettare e fabbricare un embrione di zebrafish arraying modello, seguita da una procedura dettagliata sull'uso di tale modello per throughput elevato zebrafish embrione arraying in una piastra a 96 pozzetti.

Un 3-dimensionale (3D)-stampato modello per High Throughput embrione di pesce zebra Arraying

Qui, presentiamo i metodi per lo studio di alto-rendimento di una serie della caverna messicano comportamenti e colorazione vitale di un sistema che mechanosensory. Questi metodi utilizzano script software libero e su misura, che forniscono un metodo pratico ed economico per gli studi dei comportamenti.

Rilevamento comportamentale e formazione immagine di Neuromast della caverna messicano

Descriviamo un protocollo comportamentale progettato per valutare come personalità di zebrafish influenza la loro risposta ai cambiamenti delle acque correnti e campi magnetici deboli. Pesci con la stessa personalità vengono separati in base al loro comportamento esplorativo. Quindi, si osserva il loro comportamento di orientamento rheotactic in un tunnel con un tasso di flusso debole e condizioni magnetiche diverse.

Valutare l'influenza della personalità sulla sensibilità ai campi magnetici in Zebrafish

Capace di recupero funzionale dopo lesioni del midollo spinale, il pesce zebra adulto è un sistema modello premier per chiarire i meccanismi innati di rigenerazione neurale. Qui, descriviamo la resistenza al nuoto e i saggi di comportamento del nuoto come letture funzionali della rigenerazione del midollo spinale.

Valutazione della resistenza al nuoto e del comportamento di nuoto nel pesce zebra adulto

Questo protocollo utilizza l'imaging a foglio luminoso per studiare la funzione contrattile cardiaca nelle larve di zebrafish e ottenere informazioni sulla meccanica cardiaca attraverso il monitoraggio cellulare e l'analisi interattiva.

Imaging a foglio luminoso 4D della contrazione cardiaca del pesce zebra

I compiti di preferenza sociale multi-camera sono stati adattati dai roditori al pesce zebra, facilitando lo studio del comportamento sociale negli organismi modello. Questo protocollo convalida un compito a basso costo a 3 camere in vasca aperta utilizzando webcam e software open source per misurare la preferenza sociale dei pesci zebra, rendendolo accessibile alla ricerca e all'insegnamento degli studenti universitari.

Alternativa a basso costo per esaminare la preferenza sociale nel pesce zebra (Danio rerio) utilizzando il compito a 3 camere in acquario libero libero

Scopri un sistema di tracciamento 3D automatizzato per analizzare i movimenti di pesci zebra adulti e banchi. Questo metodo computazionale consente di studiare caratteristiche cinematiche, spaziali e sociali con precisione.

Utilizzo di un sistema di tracciamento 3D automatizzato per registrare singoli e banchi di pesci zebra adulti

Esplora altri video