Name: Un modèle murin de la moelle épinière cervicale blessures à étude post-lésionnelle respiratoire neuroplasticité (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-05-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: Découvrez un modèle murin de lésion cervicale pour étudier la neuroplasticité respiratoire post-lésionnelle chez le rat. Cette méthode chirurgicale permet d'évaluer l'activité phrénique et les stratégies de réparation.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ce travail est soutenu par un financement du programme de l&#39;Union européenne septième cadre (FP7/2007-2013) sous convention de subvention n ° 246556 (projet RBUCE-UP européenne), HandiMedEx attribué par l&#39;Office d&#39;investissement public français. Marcel Bonay a été soutenue par la Chancellerie des Universités de Paris (Legs Poix), le Fonds de Dotation Recherche en Santé Respiratoire, et le Centre d&#39;Assistance Respiratoire à Domicile d&#39;Île de France (CARDIF)

Ce protocole a été approuvé par le comité d&#39;éthique de la chaise RBUCE-UP d&#39;excellence (Université de Paris Sud, accord de subvention n ° 246556) et l&#39;Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines. 1. Préparation des instruments chirurgicaux stérilisés <ol><li> Nettoyer les instruments chirurgicaux avec détergent de laboratoire. </li><li> Autoclave les instruments avant la chirurgie. </li><li> Dans une session chirurgicale, stériliser les outils en plaçant les pointes dans un stérilisateur à billes à chaud pendant 10 minutes à 180 ° C entre deux interventions chirurgicales. </li></ol> 2. Préparation des médicaments <ol><li> Préparer 2 x 1 ml seringues pour les médicaments pré-anesthésique cocktail et post-opératoires médicaments. </li><li> Selon le poids du rat, préparer une seringue à médicaments pré-anesthésique: Carprofen (5 mg / kg), la buprénorphine (50 ug / kg), Baytril (5 mg / kg) et de dexmédétomidine (0,5 mg / kg). Compléter le volume à 1 ml avec Ringer lactate. </li><li> Préparez à l&#39;une autre seringue pour l&#39;inversion des médicaments pré-anesthésique: atipamézole (500 ug / kg). </li></ol> 3. Anesthésie du Rat <ol><li> Administrer par voie sous cutanée à l&#39;animal la solution de médicaments pré-anesthésiques décrites à l&#39;étape 2.2. Ensuite, mettez le dos de l&#39;animal en cage et attendre jusqu&#39;à ce que l&#39;effet sédatif apparaît. </li><li> Placez le rat dans une chambre fermée remplie de 5% d&#39;isoflurane dans 100% O 2, et attendre jusqu&#39;à ce que le rythme respiratoire ralentit (environ 30 secondes). Ensuite, retirez le rat de la chambre et le placer sur la table de l&#39;intubation. </li></ol> 4. Orotrachéale intubation <ol><li> Allongez l&#39;animal sur son dos, puis fixer la tête en plaçant une sangle attachée à ses dents de devant à la table. </li><li> Avec une lumière de fibre optique, la lumière l&#39;espace thoracique. Ensuite, placez un laryngoscope (ou une coutume fait un, Jou et al. 20 pour plus de détails) dans la bouche de l&#39;animal. Visualiser les cordes vocales. </li><li> Glissée et placer un guide orotrachéal dans la trachée (entre les cordes vocales). Faites glisser le tube orotrachéal (16 G de taille de cathéter) sur le guide. </li><li> Retirer le guide et vérifier avec un miroir laryngé placé à l&#39;extrémité du tube oro-trachéale pour la présence d&#39;humidité, ce qui confirme la position appropriée du tube dans la trachée et non dans l&#39;œsophage. </li><li> Connectez le tuyau à un ventilateur de rongeur (683 rongeur ventilateur, Harvard Apparatus) et ajuster la concentration d&#39;isoflurane à 2% (100% O 2). </li><li> Fixer le tube orotrachéal avec du ruban adhésif chirurgical. </li></ol> 5. Chirurgie rachidienne <ol><li> Placer l&#39;animal en décubitus ventral sur une plaque chauffée chirurgical, avec le nez pointant à un angle de 90 ° pour le chirurgien. Maintenir la température du corps d&#39;environ 37,5 ° C pendant toute la chirurgie. </li><li> Raser les cheveux avec une tondeuse entre les omoplates et enlever les poils avec de la gaze. </li><li> Nettoyer la peau avec de la bétadine, puis avec 70% d&#39;alcool. Répétez cette étape 3x. </li><li> Une pincée de pointe est effectuée avant début de la chirurgie pour assurer une profondeur d&#39;anesthésie adéquate. &#160; Ensuite, effectuer une incision de la peau rostro-caudale latérale avec des ciseaux entre les omoplates. </li><li> Couper le acromiotrapezius muscle rostro-caudale en suivant le tendon d&#39;éviter tout saignement. Puis dissocier le muscle rhomboïde pour accéder aux muscles de SpinaliS (autour de la vertèbre). </li><li> Rétracter le muscle épineux de C1 à C3 vertèbre. La vertèbre C2 est l&#39;une d&#39;une apophyse proéminent. </li><li> Nettoyez le muscle autour de la partie dorsale de la vertèbre en utilisant des cotons-tiges stériles. </li><li> Commencer à retirer soigneusement l&#39;apophyse de C2 avec un rongeur. Ensuite, continuer méticuleusement jusqu&#39;à la moelle épinière dorsale est exposé. Assurez-vous que la laminectomie est une laminectomie dorsale hémi. Prêtez une attention particulière à la dure qui entoure la moelle épinière, et les artères à proximité de cette zone. </li><li> Avec # 55 pince, disséquer rostro-caudale la dure long C2, à côté de continuer latéralement de chaque côté rostral et caudal. </li><li> Éponger le liquide céphalo-rachidien. </li><li> Faire une coupe latérale sous la dorsale cervicale nombre de racines 2 avec les microciseaux. Vérifier avec un micro scalpel que l&#39;étendue de la lésion est suffisamment proche pour atteindre la ligne médiane de la moelle épinière (voir la figure 2A pour une vue dorsale de la blessure). Si non, alors une autre coupe pourrait être faite pour compléter la blessure. En cas de saignement, utiliser des cotons-tiges stériles. Attention de ne pas aller du côté opposé, sinon, l&#39;animal ne sera pas récupérer de la blessure et aura une insuffisance respiratoire. </li><li> Suturer les muscles comme une couche protectrice et suturer la peau. Nettoyer la plaie avec de la gaze stérile Betadine saturé. </li><li> Tournez-off le vaporisateur isoflurane et injecter les médicaments d&#39;inversion (Atipamézole [500 ug / kg, im]), vérifier la température du corps. </li><li> Quand l&#39;animal commence à respirer contre le ventilateur,débrancher le tube trachéal du ventilateur, puis retirez le tube orotrachéal. Placez l&#39;animal dans une cage chauffée pour la récupération. </li></ol> 6. Soins post-opératoire Après la chirurgie, les animaux sont surveillés en permanence pour assurer le meilleur environnement possible pour la récupération. Antibiotiques (Baytril, 5 mg / kg), anti-inflammatoire (Carprofen, 5 mg / kg) et la buprénorphine (50 ug / kg) médicaments sont donnés toutes les 12 h pour les 2 premiers jours post-opératoires pour prévenir les infections et réduire l&#39;apparition de la douleur post-opératoire. Les rats ont accès ad libitum à la nourriture et de l&#39;eau douce (ou de l&#39;eau gélifiée pour le 1er jour post-opératoire). Fluides sous-cutanés peuvent être utilisés pour prévenir la déshydratation sur les premiers jours post-opératoires. Le poids corporel et la consommation de nourriture sont contrôlés tous les jours. Leur environnement est enrichi tout au long de l&#39;expérience et du temps post-traumatique (double logement, des tubes dans leurs cages).

<ol><li>Frankel, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+in+spinal+cord+injury%3A+a+fifty+year+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Spinal+Cord%22%5BJournal%5D)">Long-term survival in spinal cord injury: a fifty year investigation.</a> Spinal Cord. 36, 266-274 (1998).</li>
<li>Ramer, M. S., Harper, G. P., Bradbury, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+spinal+cord+research+-+a+refined+strategy+for+the+International+Spinal+Research+Trust%5BTitle%5D)+AND+%22Spinal+Cord%22%5BJournal%5D)">Progress in spinal cord research - a refined strategy for the International Spinal Research Trust.</a> Spinal Cord. 38, 449-472 (2000).</li>
<li>Zimmer, M. B., Nantwi, K., Goshgarian, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+spinal+cord+injury+on+the+respiratory+system%3A+basic+research+and+current+clinical+treatment+options%5BTitle%5D)+AND+%22J+Spinal+Cord+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of spinal cord injury on the respiratory system: basic research and current clinical treatment options.</a> J Spinal Cord Med. 30, 319-330 (2007).</li>
<li>Mantilla, C. B., Sieck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromuscular+adaptations+to+respiratory+muscle+inactivity%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Neuromuscular adaptations to respiratory muscle inactivity.</a> Respir Physiol Neurobiol. 169, 133-140 (2009).</li>
<li>Goshgarian, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+crossed+phrenic+phenomenon+and+recovery+of+function+following+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The crossed phrenic phenomenon and recovery of function following spinal cord injury.</a> Respir Physiol Neurobiol. 169, 85-93 (2009).</li>
<li>Nantwi, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recovery+of+respiratory+activity+after+C2+hemisection+%28C2HS%29%3A+involvement+of+adenosinergic+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Recovery of respiratory activity after C2 hemisection (C2HS): involvement of adenosinergic mechanisms.</a> Respir Physiol Neurobiol. 169, 102-114 (2009).</li>
<li>Sandhu, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+recovery+following+high+cervical+hemisection%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Respiratory recovery following high cervical hemisection.</a> Respir Physiol Neurobiol. 169, 94-101 (2009).</li>
<li>Lane, M. A., Lee, K. Z., Fuller, D. D., Reier, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+circuitry+and+respiratory+recovery+following+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Spinal circuitry and respiratory recovery following spinal cord injury.</a> Respir Physiol Neurobiol. 169, 123-132 (2009).</li>
<li>Seeds, N. W., Akison, L., Minor, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+plasminogen+activator+in+spinal+cord+remodeling+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Role of plasminogen activator in spinal cord remodeling after spinal cord injury.</a> Respir Physiol Neurobiol. 169, 141-149 (2009).</li>
<li>Alilain, W. J., Horn, K. P., Hu, H., Dick, T. E., Silver, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+regeneration+of+respiratory+pathways+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Functional regeneration of respiratory pathways after spinal cord injury.</a> Nature. 475, 196-200 (2011).</li>
<li>Vinit, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+spinal+cord+injuries+and+respiratory+insufficiency%3A+a+revolutionary+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Sci+%28Paris%22%5BJournal%5D)">Cervical spinal cord injuries and respiratory insufficiency: a revolutionary treatment.</a> Med Sci (Paris. 28, 33-36 (2012).</li>
<li>Kastner, A., Gauthier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+rodents+an+appropriate+pre-clinical+model+for+treating+spinal+cord+injury%3F+Examples+from+the+respiratory+system%29%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Are rodents an appropriate pre-clinical model for treating spinal cord injury? Examples from the respiratory system).</a> Exp Neurol. 213, 249-256 (2008).</li>
<li>Vinit, S., Lovett-Barr, M. R., Mitchell, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+hypoxia+induces+functional+recovery+following+cervical+spinal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Intermittent hypoxia induces functional recovery following cervical spinal injury.</a> Physiol Neurobiol. 169, 210-217 (2009).</li>
<li>Porter, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Path+of+the+Respiratory+Impulse+from+the+Bulb+to+the+Phrenic+Nuclei%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">The Path of the Respiratory Impulse from the Bulb to the Phrenic Nuclei.</a> J Physiol. 17, 455-485 Forthcoming.</li>
<li>Nicaise, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phrenic+motor+neuron+degeneration+compromises+phrenic+axonal+circuitry+and+diaphragm+activity+in+a+unilateral+cervical+contusion+model+of+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Phrenic motor neuron degeneration compromises phrenic axonal circuitry and diaphragm activity in a unilateral cervical contusion model of spinal cord injury.</a> Exp Neurol. 235, 539-552 (2012).</li>
<li>Goshgarian, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+crossed+phrenic+phenomenon%3A+a+model+for+plasticity+in+the+respiratory+pathways+following+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">The crossed phrenic phenomenon: a model for plasticity in the respiratory pathways following spinal cord injury.</a> J Appl Physiol. 94, 795-810 (2003).</li>
<li>Vinit, S., Gauthier, P., Stamegna, J. C., Kastner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+cervical+lateral+spinal+cord+injury+results+in+long-term+ipsilateral+hemidiaphragm+paralysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">High cervical lateral spinal cord injury results in long-term ipsilateral hemidiaphragm paralysis.</a> J Neurotrauma. 23, 1137-1146 (2006).</li>
<li>Fuller, D. D., Johnson, S. M., Johnson, R. A., Mitchell, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cervical+spinal+sensory+denervation+reveals+ineffective+spinal+pathways+to+phrenic+motoneurons+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Chronic cervical spinal sensory denervation reveals ineffective spinal pathways to phrenic motoneurons in the rat.</a> Neurosci Lett. 323, 25-28 (2002).</li>
<li>Dougherty, B. J., Lee, K. Z., Lane, M. A., Reier, P. J., Fuller, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+the+spontaneous+crossed-phrenic+phenomenon+to+inspiratory+tidal+volume+in+spontaneously+breathing+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Contribution of the spontaneous crossed-phrenic phenomenon to inspiratory tidal volume in spontaneously breathing rats.</a> J Appl Physiol. 112, 96-105 (2012).</li>
<li>Jou, I. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+rat+intubation+using+a+new+oropharyngeal+intubation+wedge%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Simplified rat intubation using a new oropharyngeal intubation wedge.</a> J Appl Physiol. 89, 1766-1770 (2000).</li>
<li>Fuller, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graded+unilateral+cervical+spinal+cord+injury+and+respiratory+motor+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Graded unilateral cervical spinal cord injury and respiratory motor recovery.</a> Respir Physiol Neurobiol. 165, 245-253 (2009).</li>
<li>Vinit, S., Windelborn, J. A., Mitchell, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipopolysaccharide+attenuates+phrenic+long-term+facilitation+following+acute+intermittent+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Lipopolysaccharide attenuates phrenic long-term facilitation following acute intermittent hypoxia.</a> Respir Physiol Neurobiol. 176, 130-135 (2011).</li>
<li>Ahmad, F., Wang, M. Y., Levi, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermia+for+Acute+Spinal+Cord+Injury-A+Review%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Hypothermia for Acute Spinal Cord Injury-A Review.</a> World Neurosurg. , (2013).</li>
<li>Lovett-Barr, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+intermittent+hypoxia+induces+respiratory+and+somatic+motor+recovery+after+chronic+cervical+spinal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Repetitive intermittent hypoxia induces respiratory and somatic motor recovery after chronic cervical spinal injury.</a> J Neurosci. 32, 3591-3600 (2012).</li>
<li>Minor, K. H., Akison, L. K., Goshgarian, H. G., Seeds, N. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+injury-induced+plasticity+in+the+mouse--the+crossed+phrenic+phenomenon%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Spinal cord injury-induced plasticity in the mouse--the crossed phrenic phenomenon.</a> Exp Neurol. 200, 486-495 (2006).</li>
<li>Baussart, B., Stamegna, J. C., Polentes, J., Tadie, M., Gauthier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+upper+cervical+spinal+contusion+inducing+a+persistent+unilateral+diaphragmatic+deficit+in+the+adult+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">A new model of upper cervical spinal contusion inducing a persistent unilateral diaphragmatic deficit in the adult rat.</a> Neurobiol Dis. 22, 562-574 (2006).</li>
<li>Golder, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breathing+patterns+after+mid-cervical+spinal+contusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Breathing patterns after mid-cervical spinal contusion in rats.</a> Exp Neurol. 231, 97-103 (2011).</li>
<li>Lane, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+function+following+bilateral+mid-cervical+contusion+injury+in+the+adult+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Respiratory function following bilateral mid-cervical contusion injury in the adult rat.</a> Exp Neurol. 235, 197-210 (2012).</li>
<li>Vinit, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axotomized+bulbospinal+neurons+express+c-Jun+after+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Axotomized bulbospinal neurons express c-Jun after cervical spinal cord injury.</a> Neuroreport. 16, 1535-1539 (2005).</li>
<li>Guenther, C. H., Windelborn, J. A., Tubon, T. C., Yin, J. C., Mitchell, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+atypical+PKC+expression+and+activity+in+the+phrenic+motor+nucleus+following+cervical+spinal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Increased atypical PKC expression and activity in the phrenic motor nucleus following cervical spinal injury.</a> Exp Neurol. 234, 513-520 (2012).</li>
<li>Mantilla, C. B., Gransee, H. M., Zhan, W. Z., Sieck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motoneuron+BDNF%2FTrkB+signaling+enhances+functional+recovery+after+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Motoneuron BDNF/TrkB signaling enhances functional recovery after cervical spinal cord injury.</a> Exp Neurol. 247, 101-109 (2013).</li>
<li>Vinit, S., Darlot, F., Aoulaiche, H., Boulenguez, P., Kastner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+expression+of+c-Jun+and+HSP27+in+axotomized+and+spared+bulbospinal+neurons+after+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Distinct expression of c-Jun and HSP27 in axotomized and spared bulbospinal neurons after cervical spinal cord injury.</a> J Mol Neurosci. 45, 119-133 (2011).</li>
<li>Windelborn, J. A., Mitchell, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+activation+in+the+spinal+ventral+horn+caudal+to+cervical+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Glial activation in the spinal ventral horn caudal to cervical injury.</a> Respir Physiol Neurobiol. 180, 61-68 (2012).</li>
<li>Vinit, S., Stamegna, J. C., Boulenguez, P., Gauthier, P., Kastner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restorative+respiratory+pathways+after+partial+cervical+spinal+cord+injury%3A+role+of+ipsilateral+phrenic+afferents%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Restorative respiratory pathways after partial cervical spinal cord injury: role of ipsilateral phrenic afferents.</a> Eur J Neurosci. 25, 3551-3560 (2007).</li>
<li>Dougherty, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recovery+of+inspiratory+intercostal+muscle+activity+following+high+cervical+hemisection%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Recovery of inspiratory intercostal muscle activity following high cervical hemisection.</a> Respir Physiol Neurobiol. 183, 186-192 (2012).</li>
</ol>

Les auteurs déclarent qu&#39;ils n&#39;ont aucun intérêt financier concurrents.

Les difficultés techniques de Faire la blessure modèle C2 Le modèle murin de blessures C2 est un outil intéressant pour étudier la plasticité synaptique respiratoire post-lésionnelle. Cependant, les étapes nécessaires pour produire un modèle reproductible et fiable sont nombreux et chacun pourraient avoir une incidence sur les résultats de l&#39;étude. Par exemple, au cours du processus d&#39;intubation, un soin extrême doit être pris puisque le tube orotrachéal peut produir...

Traumatisme de la moelle épinière est une blessure courante observée dans la population humaine avec des incidences dramatiques, comme une paralysie permanente. Cependant, la gravité de la blessure est fonction du niveau et de l&#39;étendue du traumatisme initial. L&#39;insuffisance respiratoire est la principale cause de mortalité à la suite du col des blessures de la moelle épinière supérieure (SCI) 1. Actuellement, le seul traitement thérapeutique consiste à placer le patient sous assistance ventilatoire. Depuis quelques patients peuvent être sevrés de l&#39;assistance ventilatoire 2, en raison de la récupération spontanée qui se produit avec un retard post-lésionnelle, la nécessité de développer de nouvelles thérapies non invasives novatrices est urgent 3. Avoir un bon modèle pré-clinique normalisée pour étudier l&#39;effet d&#39;une SCI col de l&#39;utérus sur l&#39;insuffisance respiratoire et donc d&#39;étudier l&#39;application de stratégies thérapeutiques putatifs, est essentiel. Dans cet article technique, nous décrivons un modèle pré-clinique de murin spécifique of insuffisance respiratoire induite par une SCI partielle du col au niveau de C2. Ce modèle est actuellement utilisé par plusieurs laboratoires dans le monde (pour avis: 4-13). Cependant, de légères différences dans la procédure chirurgicale peuvent être observées entre les différents enquêteurs pour générer ce modèle murin de lésion cervicale particulier. L&#39;effet d&#39;une SCI C2 sur le débit respiratoire a été décrite pour la première en 1895 par Porter 14. Une hémi col de l&#39;utérus induit une désafférentation des motoneurones phréniques de leur entraînement central (situé dans le rVRG dans le tronc cérébral, la figure 1A) sur le côté ipsilatéral de blessures, conduisant à une activité du nerf phrénique silence et la paralysie du diaphragme ultérieure. Le côté opposé reste intact et permet à l&#39;animal de survivre. Contrairement différent SCI situé dans un segment vertébral inférieur (par exemple une blessure contusive au niveau de C4 15), l&#39;intégrité du noyau du motoneurone phrénique sur les deux côtés est préservée. Après une cervblessures C2 ical, une activité spontanée peut être observée sur le côté ipsilatéral (phrénique et le diaphragme) en raison d&#39;une activation de contralatérales voies synaptiques silencieuses qui ont traversé la ligne médiane de la moelle au niveau segmentaire C3-C6 (Les voies phrénique croisés, RPC, figure 1B) . L&#39;activation de la RPC, qui est, par définition, un hemisection C2 combiné avec un phrenicotomy controlatéral qui induisent une reprise ipsilatérale du nerf phrénique partielle, peut se produire de plusieurs heures à plusieurs semaines après la lésion 16-18. L&#39;effet bénéfique réel de cette voie RPC sur la reprise respiratoire est limitée 19 et une enquête plus approfondie et le traitement doit être développé pour améliorer l&#39;ampleur de la restauration spontanée 3. Ce protocole fournit un type puissant modèle murin pré-clinique pour étudier respiratoire plasticité post-lésionnelle à différents niveaux (physiologie respiratoire de motoneurones pré et phrénique, interneurones, moléculaire et cellular, la locomotion de l&#39;aile avant, par exemple) ainsi que d&#39;un modèle pour tester des stratégies thérapeutiques invasives et non-invasives visant à améliorer les voies respiratoires et la récupération locomotrice après une lésion cervicale C2 partielle de la moelle épinière.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Animal</td></tr><tr><td>Male Sprague Dawley Rat</td><td>Janvier</td><td></td><td>225-250 g</td></tr><tr><td colspan="4">Surgical Instruments</td></tr><tr><td>Student Dumont #5 forceps</td><td>Fine Science Tool</td><td>91150-20</td><td></td></tr><tr><td>Student Standard Pattern Forceps</td><td>Fine Science Tool</td><td>91100-12</td><td></td></tr><tr><td>Mayo-Stille Ciseaux</td><td>Fine Science Tool</td><td>14013-15</td><td></td></tr><tr><td>Curved Student Vannas Spring Scissors</td><td>Fine Science Tool</td><td>91500-09</td><td>Ciseaux à</td></tr><tr><td>ressort droits - Lames de 8 mm</td><td>Fine Science Tool</td><td>15025-10</td><td>Straight Blunt/Blunt</td></tr><tr><td>Friedman Pearson Rongeur</td><td>Fine Science Tool</td><td>16121-14</td><td></td></tr><tr><td>Couteau de dissection incurvé - Fine Tip</td><td>Fine Science Tool</td><td>10055-12</td><td></td></tr><tr><td>Porte-aiguille droit Olsen-Hegar</td><td>Outil de science fine</td><td>12002-14</td><td></td></tr><tr><td>Écarteur Weitlaner-Locktite</td><td>dentelé Outil de science fine</td><td>17012-11</td><td>2x3</td></tr><tr><td>Blunt Suture résorbable</td><td>Centravet</td><td>BYO001</td><td>Taille de suture 4-0</td></tr><tr><td colspan="4"><fort>Équipement</fort></td></tr><tr><td>Stérilisateur à billes chaudes Fine</td><td>Science Outil</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Cathéter&nbsp ;</td><td>Centravet</td><td>CAT188</td><td>16 G</td></tr><tr><td>Laryngoscope</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fil</td><td></td><td></td><td></td>de guidage</tr><tr><td>Miroir laryngé</td><td>Centravet</td><td>MIR011</td><td></td></tr><tr><td>Sonneurs lactiques</td><td>Centravet</td><td>RIN020</td><td></td></tr><tr><td>Seringue</td><td>Centravet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aiguille</td><td>Centravet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>O2</td><td>Air Liquid</td><td>I1001M20R2A001</td><td></td></tr><tr><td>683 Ventilateur Rongeurs 115/230V</td><td>Harvard Apparatus</td><td>55-0000</td><td></td></tr><tr><td>Vaporisateur autonome</td><td>WPI</td><td>EZ-155</td><td></td></tr><tr><td>Lit chauffant à ligne mince</td><td>WPI</td><td>EZ-211</td><td></td></tr><tr><td>Cartouche d’air</td><td>WPI</td><td>EZ-258</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Drugs</td></tr><tr><td>Carprofène</td><td>Centravet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rimadyl</td><td>Centravet</td><td>RIM011</td><td></td></tr><tr><td>Buprénorphine</td><td>Centravet</td><td>BUP001</td><td></td></tr><tr><td>Baytril</td><td>Centravet</td><td>BAY001</td><td></td></tr><tr><td>Dexmédétomidine</td><td>Centravet</td><td>DEX010</td><td></td></tr><tr><td>Atipamezole</td><td>Centravet</td><td>ANT201</td><td></td></tr><tr><td>Bétadine solution</td><td>Centravet</td><td>VET002</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Centravet</td><td>VET066</td><td></td></tr></tbody></table>

un modèle murin de la moelle épinière cervicale blessures à étude post-lésionnelle respiratoire neuroplasticité

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

Une lésion de la moelle épinière cervicale induit une paralysie permanente, et conduit souvent à une détresse respiratoire. À ce jour, aucun thérapeutiques efficaces ont été développées pour améliorer / améliorer l&#39;insuffisance respiratoire suite à une blessure cervicale haute de la moelle épinière (SCI). Ici, nous proposons un modèle pré-clinique murin de haute SCI au col de l&#39;utérus 2 (C2) niveau métamérique à étudier divers neuroplasticité respiratoire post-lésionnelle. La technique consiste en une lésion chirurgicale partielle au niveau de C2, qui va induire une hémiparalysie de la membrane due à une désafférentation des motoneurones phréniques des centres respiratoires situés dans le tronc cérébral. Le côté opposé de la blessure reste intacte et permet la récupération des animaux. Contrairement à d&#39;autres SIC qui affectent la fonction locomotrice (au niveau thoracique et lombaire), la fonction respiratoire ne nécessite pas la motivation de l&#39;animal et la quantification du déficit / récupération peut être facilement réalisée (diaphragme et l&#39;enregistrement du nerf phréniques, la ventilation du corps entier). Ce modèle C2 SCI pré-clinique est un modèle pré-clinique puissant, utile et fiable pour étudier divers événements de neuroplasticité respiratoires et non respiratoires à différents niveaux (moléculaires à la physiologie) et de tester différentes stratégies thérapeutiques putatifs qui pourrait améliorer la respiration en patients blessés médullaires.

Ampleur de la blessure Le succès et la reproductibilité de ce modèle expérimental particulier dépendent de l&#39;expérience de chaque manipulateur / chirurgien. La quantité suivante de récupération respiratoire (activité du nerf phrénique et le diaphragme d&#39;activité) à la suite d&#39;une blessure de C2 est en corrélation avec le restant ventrolatérale épargné substance blanche 21. Depuis la blessure est &quot;fait main&quot; et nécessite une certaine pratique ...

L&#39;insuffisance respiratoire est la principale cause de décès suite à une blessure de la moelle épinière cervicale. Avoir un modèle animal pré-clinique reproductible, quantifiable et fiable de l&#39;insuffisance respiratoire provoquée par une blessure cervicale partielle aidera à comprendre la neuroplasticité respiratoire et non respiratoire ultérieure et permettra de tester des stratégies de réparation putatifs.

Un modèle murin de la moelle épinière cervicale blessures à étude post-lésionnelle respiratoire neuroplasticité

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

L’objectif global de cette procédure est de produire un modèle animal préclinique quantifiable, fiable et reproductible d’insuffisance respiratoire et non respiratoire induite par une lésion de la moelle épinière cervicale. Pour ce faire, il faut d’abord préparer les instruments et les médicaments nécessaires à la procédure. La deuxième étape consiste à anesthésier l’animal, puis à l’intuber et à le connecter à un ventilateur pour rongeurs.Ensuite, la moelle épinière est exposée et la lésion de la colonne cervicale est induite. Après avoir recousu l’animal, l’anesthésie est retirée et des soins post-chirurgicaux appropriés sont fournis. En fin de compte, des techniques histologiques, ainsi que des enregistrements nerveux et musculaires, sont utilisés pour examiner l’étendue et les effets de la lésion cervicale.Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes, telles que la contusion du cordon de panel, est que la blessure est plus petite et bien définie. La démonstration de la procédure sera faite par un ingénieur de mon laboratoire. En préparation de la chirurgie, nettoyez et autoclavez les instruments chirurgicaux. Préparez également une seringue de de

a-murine-model-cervical-spinal-cord-injury-to-study-post-lesional

Research

Recherche

JoVE Journal

Medicine

Médecine

Une façon fiable et reproductible pour produire un col de l'utérus blessures unilatérale moelle épinière aide de l'impacteur Infinite Horizon est décrite. La méthode tire parti d'un cadre personnalisé conçu et pince pour stabiliser la colonne vertébrale. La procédure normalisée et biomécanique des blessures paramètres entraînent des blessures suffisantes et durables.

Un modèle de contusion unilatérale des blessures moelle épinière cervicale aide de l&#39;impacteur Infinite Horizon

Contrôlé blessures de lacération du col chez la souris

Le manque de compréhension des mécanismes de la moelle épinière lésion d'ischémie-reperfusion a empêché d'autres additifs pour empêcher la paraplégie suite à des opérations de l'aorte à haut risque. Ainsi, le développement de modèles animaux est impératif. Ce manuscrit démontre reproductible inférieure paralysie des extrémités après occlusion de l'aorte thoracique dans un modèle murin.

Reproductible paraplégie par l&#39;aorte thoracique occlusion dans un modèle murin de la moelle épinière ischémie-reperfusion

Lésion de la moelle épinière est une condition traumatique qui entraîne une morbidité grave et une mortalité élevée. Dans ce travail, nous décrivons en détail un modèle de contusion de blessure de la moelle épinière chez la souris suivie d'une transplantation de cellules souches neurales.

Neural Transplantation de cellules souches dans la partie expérimentale Modèle contusion de la moelle épinière des blessures

Cet article décrit une méthode permettant de générer une lésion par compression de la moelle épinière (LME) reproductible chez la souris néonatale. Le modèle fournit une plate-forme avantageuse pour étudier les mécanismes de plasticité adaptative qui sous-tendent la récupération fonctionnelle spontanée.

Un nouveau-né de la moelle épinière de souris Compression Modèle de lésion

Ici, nous démontrons la performance d’un modèle de blessures médullaires minime dans une souris adulte qui épargne la niche de canal central logement cellules souches neuronales endogènes (CNS). Nous montrons comment le dosage Neurosphère peut être utilisé pour quantifier l’activation et la migration des CNS primitifs et définitifs après une blessure.

Un dosage Neurosphère pour évaluer l’Activation endogène cellules souches neurales dans un modèle murin de minime de la moelle épinière

L'hémisection spinale thoracique de rat est un modèle valable et reproductible des dommages unilatéraux de moelle épinière pour étudier les mécanismes neurals de la récupération locomotrice et de l'efficacité de traitement. Cet article comprend un guide détaillé étape par étape pour effectuer la procédure d'hémisection et d'évaluer les performances locomotrices dans une arène de champ ouvert.

Chirurgie de l'hémisection de la moelle épinière thoracique et évaluation locomotrice à champ ouvert chez le rat

Des techniques mini-invasives et un dispositif de laboratoire simple améliorent la reproductibilité du modèle de lésion de la moelle épinière en réduisant les dommages opératoires chez les animaux de laboratoire et en permettant le maintien de la morphologie anatomique. La méthode est intéressante car les résultats fiables et la procédure reproductible facilitent les recherches sur les mécanismes de réparation des maladies.

Établissement d’un modèle de lésion médullaire par contusion chez la souris basé sur une technique mini-invasive

Le protocole actuel simulant le syndrome du cordon ombilical central (SCC) chez la souris a permis d’améliorer la répétabilité et de minimiser les dommages d’exploitation chez les animaux de laboratoire, évitant ainsi de perturber excessivement la structure anatomique. La stratégie de cette étude est avantageuse parce qu’elle permet de mener des recherches sur les mécanismes de blessure en produisant des résultats cohérents.

Etablissement d’un modèle de syndrome du cordon ombilical central chez la souris C57BL/6J

Les complications respiratoires sont la principale cause de décès chez les personnes atteintes d’une lésion de la moelle épinière cervicale (SCI). Les modèles animaux de SCIc sont essentiels pour les évaluations mécanistes et les études précliniques. Ici, nous introduisons une méthode reproductible pour évaluer la récupération fonctionnelle de l’activité du muscle du diaphragme (DIAm) après une hémisection spinale unilatérale C2 (C2SH) chez le rat.

Évaluation de la récupération fonctionnelle de l’activité du diaphragme eupnéique après une hémisection unilatérale de la moelle épinière cervicale chez le rat

Découvrez un modèle murin de lésion cervicale pour étudier la neuroplasticité respiratoire post-lésionnelle chez le rat. Cette méthode chirurgicale permet d'évaluer l'activité phrénique et les stratégies de réparation.

Un modèle murin de la moelle épinière cervicale blessures à étude post-lésionnelle respiratoire neuroplasticité

Explorer plus de vidéos