Name: 少年ラット用マイルド外傷性脳損傷の新規モデル (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 36 s
Description: 学ぶ 少年ラットにおける軽度外傷性脳損傷モデルの構築方法。ウェイトドロップ法を用いて、臨床的に関連性の高い脳震盪症状を誘導し、行動学的評価と治療介入研究への応用可能性を示します。

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著者は、技術支援を提供してくれたIrene Ma、Rose Tobais、およびJong Rhoに感謝します。MJEには、カルガリー大学小児科、アルバータ小児病院財団(ACHF)、アルバータ小児病院研究所(ACHRI)から資金提供を受けました。RMのポスドクフェローシップは、ACHFによって提供されました。

注：全ての実験は、動物管理のカナダ人評議会に合わせて実施し、カルガリー大学、動物ケア倫理委員会によって承認された。 1.繁殖と動物の準備<ol><li>標準繁殖プロトコルに従って、社内標準の実験動物のサプライヤーや品種の仔から妊娠ラットを注文。 </li><li>暗サイクル：食物および水を自由摂取アクセスハウスのすべての動物を、温度制御されたラット収容室（21℃）で、そのは、12：12時間の明に維持されている。 </li><li>子犬は生後21日目（P21）に到達すると、3または4の同性グループで母親と家から子犬を離乳させる。 </li></ol>軽度外傷性脳損傷（MTBI）装置の2.セットアップ<ol><li>所望の質量（ 例えば、150グラム）の手順、ミル重みの開始前。安全に釣り糸が第ことを可能にする重量の上端に金属ループを取り付ける重みにXED。 </li><li>鋭利なカミソリの刃でスズ箔のスコア。得点スズ箔は、ラットの体重をサポートしていますが、重量が頭部衝撃後のラットの加速に干渉しないことを確認してください。 </li><li>それはピンと張っているように、コレクションのスポンジ（38×25×15 cm 3）で（ 図1）を含むテープ透明なプラスチック（38のx 27 xは27センチメートル3）からなるU字形の段階にスコア化スズ箔。 </li><li>透明なプラスチック製のガイドチューブの下の正しい位置にU字型のプラスチック製のステージを置く。 </li><li>クランプスタンド付きの場所にプラスチック製のガイドチューブ（X 1.5メートル2.2センチメートル径）を持ち、それが3.5センチメートル得点スズ箔の上になるようにガイドチューブを配置する。 </li><li>体重の底が自由に2.5センチメートル得点スズ箔の上にハングアップすることを確実に重量に金属ループを通して釣り糸を取り付けます。 </li><li>確実にクランプスタンドに釣り糸を添付。 注：ハマグリに重みをテザリングラットは、コレクションスポンジへの影響）から落下している間スズ箔上2.5センチメートルの高さでのpスタンドは再ヒットを防ぎます。 </li><li>釣り糸でプラスチック製のガイドチューブを通して体重を引き上げ、1.0メートルで、六角レンチピンで所定の位置にそれを保持する。 </li></ol> MTBIの3誘導<ol><li>ラットは、手続きの部屋にP30の移動ケージに達すると。 </li><li>イソフルランチャンバー内にラットを置き、足や尾ピンチに非応答になるまで軽くラットを麻酔。 </li><li>すばやく落錘のパスで直接その頭を放ちスズ箔上のラットの胸ダウンを置く。 図2を参照してください。ラットが移動したり、ウェイクアップ、それが得点スズ箔上に配置することができる前に、足や尾ピンチに非応答するまで、イソフルラン室に戻り、再び開始するために開始されます。 </li><li>重量はプラスチック製のガイドチューブを垂直に落下し、頭の上にラットを打つできるように、アレンキーピンを引き。目Eラットは急速に仰臥位で180°回転し、土地を受けることになる。 </li><li>すぐに収集スポンジからラットを削除し、綿先端アプリケーターでラットの頭部への局所リドカインを適用します。 </li><li>市販の加熱パッド上にそれを設定することによって加熱されるクリーンケージ内の仰臥位でラットを置きます。 </li><li>ストップウォッチを使用して、またはデジタルタイマーは、「時間から右へ」を取得する。タイム·トゥ·右は、麻酔から覚ますと発生しやすい位置に仰臥位から​​フリップやウォーキングを開始するために、ラットに要する時間である。 </li><li>それは通常の動作（グルーミング、ウォーキング、探検など ） を回復した後にそのホームケージにラットを返す。 </li><li>繰り返しますMTBIを必要とする追加の各ラットについて3.2から3.8を繰り返します。 </li><li>繰り返しのMTBI実験のために複数の時点で同じラットに手順を繰り返します。 </li></ol>シャム傷害の4誘導<ol><li>軽くアネスト岩田それは足や尾のピンチに非応答になるまで、イソフルランでラットをhetize。 </li><li>すばやく落錘のパスで直接その頭を放ちスズ箔上のラットの胸ダウンを置く。 </li><li>プラスチック製のガイドチューブからアレンキーピンを引いたことなく、スズ箔からラットを取り出し、綿先端アプリケーターでラットの頭部への局所リドカインを適用します。 </li><li>市販の加熱パッド上にそれを設定することによって加熱されるクリーンケージ内の仰臥位でラットを置きます。 </li><li> 「時間から右へ」を取得するためにストップウォッチやデジタルタイマーを使用してください。 </li><li>それは通常の動作（グルーミング、ウォーキング、探検など ） を回復した後にそのホームケージにラットを返す。 </li></ol>ビームによるMTBI 5.実証試験8ウォーキング <ol><li>手続き部屋にMTBIまたは偽傷害の戻り動物の誘導後24時間。 </li><li>クリーン保持ケージにラットを転送と家庭ケージのオープンエンド部分はビームの狭い側を向くように165センチメートルテーパービームの狭い最後にラットのホームケージを置く。 注：テーパービーム165センチです。ビームの中心プラットフォームは、ワイド端で6センチ狭い端1.75センチ幅を有する。中心ビームが時ラットの足スリップ安全性を提供する棚部（幅2cmとセンタービーム2以下cm）を有している。テスト中にビームから落ちる可能性ラットへの傷害の危険を減らすために、ビーム下のフォームパッドを配置します。 </li><li>テーパー梁のワイド端でビデオカメラを置き、位置/ビデオを見て研究者が明らかにテーパービームの全長のためにラットの動きを見ることができることを保証するためにビデオカメラをズーム。 </li><li>テーパー梁のワイド端にラットを置き、そのホームケージにビームを歩いて渡ることをお勧めします。ラットがテーパー状ビームを横切ると、レイに少なくとも60秒間そのホームケージにラットを残すターゲットの場所をのnForce。これは試験＃1であり、分析には含まれていません。 </li><li>上のビデオカメラの電源を入れ、ラットは、ビーム歩行タスクを4回追加（ホームケージで60秒の強化期間を維持する）を完了することができます。ラットはすべての試験を完了すると、そのホームケージにラットを返す。 </li><li>スコアに、発生し、時間/期間は、個々の試験のために、ビームを横断する後肢の足-スリップの数を記録。各ラットについて、ビームを横切るように後肢足グラスと時間の平均数を計算するためにこのデータを使用する。 </li></ol>

<ol><li>DeWitt, D., Perez-Polo, R., Hulsebosch, C., Dash, P., Robertson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+in+the+development+of+rodent+models+of+mild+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Challenges in the development of rodent models of mild traumatic brain injury.</a> Journal of Neurotrauma. 30, 688-701 (2013).</li>
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</ol>

競合する金銭的利益は存在しません。

トランスレーショナル妥当性が高い基礎科学研究を効果的に育成するには、信頼性の高いモデリングシステムが必要です。発生の増加と大衆メディアに対応して、mTBI と脳震盪の調査は多くの分野で優先事項となっています。しかし、研究が増加しているにもかかわらず、治療戦略と治療オプションの改善は段階的なものにすぎません 3。この進歩の欠如は、採用されているモデリング システムと実際の損傷の病因との間の不一致が部分的に原因である可能性があります。研究の大部分は、重要な生体力学的力と適切な損傷後の症状を再現できなかったげっ歯類モデルを利用しました。mTBI の現在の人間の定義では、損傷は鈍的外傷に関連する加速力と減速力に起因すると指定されています 10。したがって、ここで説明する修正された体重低下技術は、スポーツ関連の怪我や自動車事故で特定された生体力学的力を模倣して、拘束されていない動物の頭に急速な回転加減を引き起こす一瞥衝撃を使用するため、mTBIおよび脳震盪の研究に理想的なモデルです。さらに、このモデルは、深刻な医学的および社会経済的問題として浮上している現象である反復性 mTBI の検査に簡単に適応できます。研究によると、げっ歯類は死亡率を最小限に抑えながら、一連の 10 の異なる mTBI にさらされる可能性があります 7。最後に、この方法は安価で迅速に実行できるため、多くの治療化合物や治療レジメンのハイスループット検査が可能になります。 
他の手続き手法と同様に、プロトコルの特定の側面は、信頼できる結果を生成するために特に重要です。 まず、錫箔に効果的にスコアリングする必要があります。錫箔に適切にスコアリングが付けられていない場合、ちらりと見る衝撃中に重量によって与えられる力は、幼いラットを錫箔を通して収集スポンジに推進するのに十分ではありません。このような状況では、ラットは開始位置(錫箔の上で胸を下ろす)に留まり、mTBIは、望ましい回転の加速と減速ではなく、静止した頭に衝撃を与える重量による鈍的外傷から生じます。第二に、mTBIおよび偽損傷の誘導中、各ラットに適用される麻酔薬のレベルは一定でなければなりません。右までの時間が mTBI のマーカーとして使用されるという事実により、研究者は、mTBI を受けた動物と偽の損傷を受けた動物が同様のレベルの麻酔薬にさらされていることを確認するように努める必要があります。 他の多くの外傷性脳損傷処置に対するこの技術の主な利点は、麻酔のレベルと期間が短いことです。ただし、幼いラットは、損傷が誘発される前にステージで目覚めないように、つま先や尻尾のつまみに反応しない必要があります。最後に、一貫した損傷の病因を維持するためには、ラットの頭の位置が特に重要です。理想的には、体重は頭の背側の中心に影響を与える必要があります。脳幹と小脳に影響を与えると死亡率と発作活動の増加に関連しているため、体重の経路を頭の尾側/後部に近づきすぎないように注意する必要があります。 
損傷誘発の生体力学的病態生理学と検査された行動転帰に基づいて、修正された体重低下技術は、小児の mTBI および脳震盪の調査のための信頼できるモデルであると思われます。この新しいモデルの予備研究では、いくつかの基本的な分子および構造の変化が評価されていますが、この損傷の病因を持つ mTBI に脳がどのように反応するかを確認するには、 7 の将来の研究が必要になります。細胞およびエピジェネティックレベルで発生する神経解剖学的および生物学的変化の詳細な分析は、モデルの妥当性と翻訳的適用性を高めるでしょう。標的薬物療法の生成を刺激することに加えて、mTBI および脳震盪に反応して脳内で発生する病態生理学的変化を理解することは、損傷後の転帰を予測する能力を持つ臨床バイオマーカーに関連する研究も導くでしょう。

中等度から重度の外傷性脳損傷（TBI）の生成のための多くの広く使用されている方法があるが、非常に少数の技術は穏やかな誘導するために開発されており、げっ歯類における頭部外傷を閉じた。軽度の外傷性脳損傷（MTBI）は1を組み合わせた中等度および重度の脳損傷の3倍一般的であるという事実のために、MTBIの信頼性モデルは、病態生理、神経生物学および行動の結果、および治療 ​​戦略に関する研究を促進するために必要とされる。たとえば、200の上にありました、過去10年間で、現在の動物モデル2の制限などの理由では、TBI 3の治療のための臨床薬物試験を失敗した。モデリングシステムはトランスレーショナルリサーチ研究のために生成される場合、調査結果の適用が実装モデルの妥当性に依存している。 MTBI /脳震盪の研究のために、信頼性の高い動物モデルは、生体力学的な力のresponを模倣していないだろう傷害の病因のためsibleするだけでなく、臨床的に関連する人口によって報告されたものと一致する症状を誘発するだろう。子供はMTBI特に高い危険にさらされているので、また、最適なモデリングシステムは、成人同等に加えて、若い少年げっ歯類に適用可能である。 選手がmTBIsまたは震とう脳損傷を負っているような状況の生体力学的分析は怪我のために最も重要な予測因子は、急速なヘッド加速と高速の影響4であることを示している。現在TBIの誘導のために用いられるげっ歯類モデルの大部分は、ヘッド5（総説については2を参照）のほとんど又は全く動きを可能にする。ここで概説モデルは、被験者の頭と体に加速/減速力を加える180°回転し、自由落下を伴う物理的に拘束されていない幼若ラットの頭部に高速のインパクトを実現します。 Tここでは、MTBIの誘導のため、この修正された重量損失の技術に関連する2つの主要な利点である。まず、モデルは（6を参照の行動の結果の完全な説明のために）は、脳への明白な損傷を与えることなく、症状のような震とう臨床的に関連を生成します。また、この修正された重量ドロップ技術が異質な成果をポスト震とう症候群の臨床報告と一致して生成します。 MTBIの影響が有意であるが、複数のアウトカム指標に検討したときにMTBIを経験したげっ歯類の間に実質的な変動がある。第二に、この方法は、反復MTBI 7の研究を可能にします。既存のTBIモデルの大部分は重篤な傷害を負わせるように、全体の皮質への広範​​な損傷を与えることなく、反復的なTBIを研究するために第二の損傷、およびほぼ不可能を誘導することがしばしば困難である。 したがって、寄り付きために改変重量ドロップ技術を使用する主な根拠MTBIのctionはより密接に脳震盪と少年集団における反復的なTBIの病態生理と症状を表してけがを生成することである。スポーツに関連するMTBIの発生率の増加により、落下し、自動車事故、特に小児期に、MTBIのこのユニークなげっ歯類モデルが簡単に複数のヒットに適用することができ震とうのような脳損傷の研究のための貴重なツールと研究者を提供していますパラダイム。

<table><tbody><tr><td>真鍮の重量</td><td>ギンズバーグ科学</td><td>7-2500-2</td><td>ベースに金属ループを取り付ける必要があります</td></tr><tr><td>アルミホイル</td><td>アルカン</td><td></td><td>ほとんどの食料品店で入手可能</td></tr><tr><td>マスキングテープ</td><td></td><td></td><td>市販&nbsp;</td></tr>実験室クランプスタンド<tr><td>によって構築された</td><td>U字型プラスチックスタンド</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>シグマ-アルドリッチ</td><td>Z190357</td><td></td></tr><tr><td>プラスチックガイドチューブ</td><td></td><td></td><td>金物店で構築または購入することができます</td></tr><tr><td>釣り糸</td><td>釣り人 10lb&nbsp;</td><td></td><td>スポーツ用品販売店から購入&nbsp;</td></tr><tr><td>イソフルラン</td><td>パートナーズ オブ カナダ</td><td>DIN 02237518</td><td>吸入麻酔局所</td></tr><tr><td>リドカイン (30ml)</td><td>アストラ ゼネカ</td><td>DIN 0001694</td><td>キシロカイン ゼリー 2%&nbsp;</td></tr><tr>市販の<td>綿棒</td><td></td><td></td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>ヒーティングパッド - 3ヒートセッティング</td><td></td><td></td><td>市販&nbsp;</td></tr><tr><td>ストップウォッチ</td><td>スポーツライン</td><td>L303</td><td>スポーツ用品取扱店から購入&nbsp;</td></tr><tr><td>ビデオカメラ</td><td>ソニー</td><td>HDR-CX260V</td><td></td></tr><tr><td>スプレイグ ドーリー ラット</td><td>チャールズリバーラボラトリ</td>ーズ <td>SAS SD 40</td><td>チャールズリバーラボラトリーズから注文したオスとメス、そして社内で飼育された子犬</td></tr><tr><td>研究所で建設された</td><td>平均台</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

少年ラット用マイルド外傷性脳損傷の新規モデル

A Novel Model of Mild Traumatic Brain Injury for Juvenile Rats

小児期がスポーツ関連の脳震盪、自動車事故、転倒による軽度の外傷性脳損傷(mTBI)の主要なリスク期間であるという証拠が増えているにもかかわらず、この重要な発達の側面について、mTBIの信頼できる動物モデルはこれまで開発されていませんでした。修正されたウェイトドロップ技術は、自由に動くげっ歯類の頭にちらりと見える衝撃を利用して、脳に加速、減速、回転力を伝達します。幼若ラットに適用すると、この修正された体重減少技術は、脳震盪後の症状を代表する臨床的に関連性のある行動転帰を誘発しました。 この技術は、死亡率が非常に低く、迅速に適用できる手順であるため、治療薬のハイスループット研究に最適です。さらに、この手順は閉じた頭に軽度の損傷を伴うため、反復性脳損傷の研究に容易に使用できます。この技術の単純な性質と、損傷の病態生理学の臨床的に関連性のある生体力学により、修正された体重減少技術は、さまざまな行動、分子、および遺伝学的研究で使用できるmTBIの信頼性の高いモデルを研究者に提供します。

上述の修正された重量ドロップ手法は幼若ラットにおける軽度の外傷性脳損傷（MTBI）の誘導のために信頼できる方法である。 150グラムの影響の重みを利用して、この技術は、成功して50〜120グラムの範囲幼若ラットに適用されている。また、手順が簡単に反復MTBIの研究のために同じ動物で繰り返すことができる。 （ 図3）シングルMTBIの展示の時間から右への増加を経験すると思われる動物は起床時に唖然とするが、それらは急速に正常な活動を再開し、シャム損傷動物からの視覚的に区別できない。傷害がかすめる影響に関連するすべての痛みがなくなり、穏やかな、局所リドカインであることを考えると、必要な唯一の鎮痛薬である。鎮痛剤は、一般的な炎症性および回復プロセスを妨害することが知られているように、この研究のために重要である。明白な症状がないため、ビーム歩行タスクがに信頼性があるMTBIの誘導を検証するために使用することができるオール。それは、MTBIを経験していないすべての動物は、ビーム歩行タスク上の欠損を示すことが、注意することが重要であるが、偽の負傷と少年ラットと比較した場合、グループとして、MTBIを持つ少年ラットは、かなり多くの後肢の足-スリップを実証する（ 図4）。 この修​​正された重量ドロップ技術のもう一つの重要な特徴は、傷害の誘導中幼若ラットに適用される拘束の欠如である。急速な回転加速と減速が続くヘッドにかすめる打撃を提供することにより、このモデルは、より密接にMTBIと脳震盪に起因する生体力学的な力を表している。この手順は、若年ラットまたは成体マウスに適用した場合、死亡率は極めて低い（202分の7幼若動物〜3.4％の死亡率）、及び頭蓋骨骨折および頭蓋内の出血は6,7非常に稀である。さらに、このモデルは、臨床的に関連SYを生成mptomology。シングルMTBIを経験した少年げっ歯類は、抑う ​​つ様行動の増加実行機能の欠損、および変更された社会的相互作用6,9と一緒に、バランスとモーター行動の赤字を示した。同様に、成体マウスは、時間7で回復する軽度のバランスと協調赤字を表示します。最後に、このモデルを用いてMTBIの誘導が最小限の麻酔薬を必要とする外科的調製を含むか、頭蓋骨に穴を掘るしない。結果は、したがって、手術や麻酔薬によってトリガ交絡炎症や免疫学的効果によってバイアスされていません。さらに、急速な回復時間と開放創の欠如は、げっ歯類がMTBIを体験した直後に発生する追加試験パラダイムの開始を可能にします。 <img alt="図1" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51820/51820fig1highres.jpg" width="500"> 図1： &gt; すべての適切な寸法のU字型のプラスチックステージと収集スポンジの Cのアートゥーン表現。10cmの距離は、幼若ラットを確保するために、コレクションスポンジとプラスチックステージの上面との間に維持されなければならない180を完了するのに十分な時間がある°回転。 <img alt="図2" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51820/51820fig2highres.jpg" width="500"> 図2：傷害誘導プラットフォームの（A）写真表現。ヘッドが直接落錘以下になるように幼若ラットを獲得スズ箔上の胸ダウンに配置される。傷害誘導プラットフォームの（B）側面図。MTBIの誘導に使用される量（C）写真デモ。 アップロード/ 51820 / 51820fig3highres.jpg "幅=" 500 "/&gt; 図3：MTBIの出品に有意な増加を受けているシングルMTBIと偽の負傷を経験した若年ラット（* P &lt;0.01）ラットを経験した時から右への幼若ラットの間での平均の違いのグラフィカル表現仰臥位から​​身を正すのに必要な時間の長さ。 <img alt="図4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51820/51820fig4highres.jpg" width="500"> 図4：シングルMTBIと偽の負傷を経験した若年ラット（* p &lt;0.05）を経験した若年ラットによるビームウォーキングタスクに展示後肢足-スリップの平均数のグラフ表示。

修正されたウェイトドロップ技術は、若年ラットの軽度の外傷性脳損傷の誘発に使用される簡単で費用対効果の高い手順です。この新しい技術は、軽度の外傷性脳損傷 (mTBI) と脳震盪の研究を前進させる臨床的に関連する症状を生み出します。

Despite growing evidence that childhood represents a major risk period for mild traumatic brain injury (mTBI) from sports-related concussions, motor ...

本手順の全体的な目的は、若齢ラットに軽度外傷性脳損傷を誘発することである。まず、損傷誘発プラットフォームを準備する。次に、麻酔をかけたラットを、目盛り付きのアルミホイルの上に腹側を上にして配置する。設置後、重りを落下させて頭部に接線方向の打撃を加えます。その後、動物を仰臥位に置き、正位に戻るまでの時間を記録します。翌日、ウォーキングビームテストを用いてパフォーマンスを測定します。この手法の他の手法に対する主な利点は、動物への麻酔時間が極めて短いことです。また、閉鎖性頭部外傷であるため、同一の動物に対して数回の傷害を繰り返し与えることができ、さらに臨床的意義の高い回転成分を伴う傷害を再現できます。このモデルは、不均一な形式で臨床的に関連のある症状を誘発するため、小児の脳震盪や軽度外傷性脳損傷の治療への応用が期待されます。本手順の実演は、当研究室の技術者であるIrene Maとharlene hahaが行います。当研究室の学部生が担当しました。軽度外傷性脳損傷装置を設置するために、透明プラスチック製のU字型ステージを作製します。動物が落下した際に受け止めるため、ステージの底にスポンジを配置してください。次に、鋭いカミソリでアルミホイルに切れ目を入れます。切れ目を入れたアルミホイルがラットの体重を支えつつ、衝撃後の加速を妨げないようにしてください。切れ目を入れたアルミホイルをステージの上にテープで固定し、ピンと張った状態にして、ガイドチューブの下の正しい位置に配置します。ガイドチューブを、アルミホイルの3.5 cm上に配置します。次に, 釣り糸を重りの上端に取り付けます。重りをガイドチューブの中に入れ、重りがホイルの2.5 cm上に吊り下げられるように糸を固定します。この高さに設定することで、ラットが確実に複数回の衝撃を受けるのを防ぎます。釣り糸をクランプスタンドに取り付けます。釣り糸を使用して重りをプラスチック製ガイドチューブ経由で引き上げ、0.5 metersの高さに配置した六角レンチピンで固定します。まず、麻酔下にあるラットの鎮静深度を確認し、ラットを胸側が下になるようにホイルの上に置き、頭部が落錘の落下経路に直接来るように迅速に配置します。準備が整ったら、アレンキーピンを抜き、落錘がプラスチック製ガイドチューブを通って垂直に落下するようにします。衝撃を受けると、ラットは急速に180度回転し、仰臥位で着地します。直ちにラットを回収用スポンジから取り出し、綿棒を使用してラットの頭部にリドカインを局所的に塗布します。次に、清潔で加温されたケージの中でラットを仰向けに安置します。動物が麻酔から覚醒し、仰向けから腹ばいの姿勢に変わるまで観察してください。これを偽手術 injured コントロール群の書き込み時間として記録します。動物を麻酔し、先に示した通りにステージ上に配置します。次に、アレンキーピンを引かずにラットをアルミホイルから取り出し、頭部にリドカインを局所塗布します。ラットを清潔で加温されたケージ内の仰臥位に置き、記録時間を記入します。最後に、ラットが正常な行動に回復したことを確認してホームケージに戻し、次の対照動物で同様の操作を繰り返します。脳損傷の導入から24時間後、動物を処置室に戻します。ラットを清潔な保持ケージに移し、ラットのホームケージを設置します。テーパービームの幅が狭い方の端に、ケージの開口部をビームの広い側に向けて配置します。テーパービームの中央には、安全性を確保するための小さな段差があるプラットフォームが設けられています。ビデオカメラをビームの幅が広い端に設置し、ビームの全長が見えるまで焦点を調整します。準備ができたら、ラットをテーパー状ビームの幅が広い端に置き、ホームケージに向かってビーム上を歩くよう促します。ラットがビームを渡りホームケージに入ったら、少なくとも60秒間休ませてください。標的場所を強化するため、これは試行回数1回目であり、分析には含まれません。次に、ビデオカメラの電源を入れ、ホームケージでの62回目の強化期間を維持しながら、ラットにビームウォーキングタスクをさらに数回完了させます。ラットがすべての試行を完了したら、ホームケージに戻し、次の個体をテストしてください。試験中に動物がビームから落下した場合は、すぐに拾い上げ、落下した位置に再度配置してください。データのスコアリングについて。試験後、個々の試行ごとに、後肢の足の滑り回数とビームを横切るまでの合計時間を記録します。このデータを使用して、各動物および試験群の平均値を算出します。このグラフは、単回の脳損傷を受けた若齢ラットと偽手術コントロール群との間における、右方向への回転（write scores）に要した時間の平均差を比較したものです。損傷を受けたラットでは、仰臥位から自力で回転するまでに要する時間が有意に増加しました。ここでは、単回損傷を受けた若齢ラットにおけるビームウォーキング課題での後肢の足すべりの平均回数を示しています。擬似損傷（シャム）ラットと比較して、本手順後に損傷を受けた動物は、対照群よりもビーム上での足すべりが有意に多く認められました。その後、遊び療法などのその他の非侵襲的な介入を検討し、そのような介入が、子供たちが脳震盪後に経験する社会的欠損の一部を実際に改善できるかどうかを判断することができます。このビデオを視聴することで、若齢げっ歯類において軽度外傷性脳損傷を安全に誘発し、検出する方法について十分に理解することができます。この手法は、複数の時点で繰り返し実施することが可能です。

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軽度外傷性脳損傷の覚醒閉鎖頭部損傷モデルを用いたシナプス可塑性変化の評価

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ウェイトドロップ法により改変され磁気共鳴画像法により証明された合併症のない軽度外傷性脳損傷モデルの開発

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学ぶ 少年ラットにおける軽度外傷性脳損傷モデルの構築方法。ウェイトドロップ法を用いて、臨床的に関連性の高い脳震盪症状を誘導し、行動学的評価と治療介入研究への応用可能性を示します。

少年ラット用マイルド外傷性脳損傷の新規モデル

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