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Alta resolução hibridação fluorescente In Situ em embriões da drosófila e tecidos usando amplificação de sinal Tyramide
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High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

Alta resolução hibridação fluorescente In Situ em embriões da drosófila e tecidos usando amplificação de sinal Tyramide

DOI:
10.3791/56281-v

•

14:21 min

•

October 19, 2017

•

, , ,
1The Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:09PCR Amplification of cDNA Templates from Plasmids
  • 03:43In vitro Transcription to Generate Antisense Probes
  • 05:25Drosophila Tissue Collection and Fixation
  • 07:51In Situ Hybridization
  • 09:05Probe Detection
  • 11:05Antibody Detection using Tyramide
  • 12:01Results: Robust Detection of RNA in Whole Drosophila Embryos and Dissected Tissues
  • 13:02Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

O protocolo descrito de RNA em situ hibridização permite a detecção de RNA em toda Drosophila embriões ou tecidos dissecados. Usando placas de 96 poços da microplaca e amplificação do sinal de tyramide, transcrições podem ser detectadas no throughput, sensibilidade e alta resolução e a um custo relativamente baixo.

Tags

Fluorescent In Situ HybridizationDrosophilaRNATyramide Signal AmplificationSubcellular DistributionHigh-throughput96-well PlatePCRBacterial CulturePlasmid DNAEthanol PrecipitationCentrifugation

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