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Alta resolução hibridação fluorescente In Situ em embriões da drosófila e tecidos usando amplificação de sinal Tyramide
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification
DOI:

14:21 min

October 19, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:09PCR Amplification of cDNA Templates from Plasmids
  • 03:43In vitro Transcription to Generate Antisense Probes
  • 05:25Drosophila Tissue Collection and Fixation
  • 07:51In Situ Hybridization
  • 09:05Probe Detection
  • 11:05Antibody Detection using Tyramide
  • 12:01Results: Robust Detection of RNA in Whole Drosophila Embryos and Dissected Tissues
  • 13:02Conclusion

Summary

Automatic Translation

O protocolo descrito de RNA em situ hibridização permite a detecção de RNA em toda Drosophila embriões ou tecidos dissecados. Usando placas de 96 poços da microplaca e amplificação do sinal de tyramide, transcrições podem ser detectadas no throughput, sensibilidade e alta resolução e a um custo relativamente baixo.

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