01:17Isolation of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells
02:00Tetramer-Associated Magnetic Enrichment of Antigen Specific B-Cells
03:58Staining of Antigen Specific Human B-Cells and Cell Sorting
04:56Single Cell RT-PCR
06:00Screening and Verification of Heavy and Light Chain Expressing Vectors
07:45Production of Monoclonal Antibodies
10:33Results: Detection of Relevant Antigen Specific B-Cells and Generation of Highly Discriminative Monoclonal Antibody from Donor Peripheral Blood Mononuclear Cells
Vi beskriver en metod för framställning av humana antikroppar specifika för antigen av intresse, start från sällsynta B-celler som cirkulerar i blod. Generation av dessa naturliga antikroppar är snabbt och effektivt, och antikroppar erhållits kan diskriminera mellan starkt relaterade antigener.