Name: ניתוח בזמן אמת לחץ-נפח של אוטם אקוטי בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-07-02T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 28 s
Description: חקור אופיון לחץ-נפח בזמן אמת באוטם אקוטי בעכברים. שיטה זו מאפשרת הערכת תפקוד חדר שמאל וזיהוי מנגנונים מגנים מוקדמים במחקר קרדיולוגי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים להכיר את מקורות המימון הבאים: אחר-Stiftung Kröner Fresenius (Tienush Rassaf); הנס und Stiftung פישר גרטי (Tienush Rassaf), מענק של הפקולטה לרפואה, אוניברסיטת דואיסבורג-אסן, גרמניה (Tienush Rassaf, מישל לארס); ארנסט-und ברטה Grimmke-Stiftung (כריסטוס Rammos).

כל הניסויים הושלמה בשנת בהתאם ותאימות עם כל התקנות הרלוונטיות (' הוועידה האירופית למען הגנה של חוליות החיות לשימוש נסיוני, אחרים מדעי למטרות (הוראה 2010/63/האיחוד האירופי), טיפול בבעלי חיים היה בהתאם להנחיות מוסדיים. כל הניסויים בוצעו עם עכברים C57BL/6JRj זכר בגיל 6 חודשים.
1. הכנה
<ol><li>להכין מיקרוסקופ כירורגי, כרית חימום, כמו גם בדיקה רקטלית כדי לפקח על טמפרטורת הגוף. לנקות ולחטא את כל כלי כירורגי.</li>
	<li>להכין 2 חתיכות של 10 ס מ חוט משי 5-0 כלי מצדו, 5 ס מ של חוט פוליפרופילן 6-0, 2 מ מ צינור סיליקון מצדו של LCA.</li>
	<li>להכין את cuvette כיול של קטטר PV על ידי חימום זה מראש עד 37 ° C ולהכין µL 100 המילטון מזרק מלא עם 15% נתרן כלורי (NaCl) H2O לכיול מלוחים.</li>
	<li>המקום PV קטטר (3 ס"מ, 1.4 F) ב- 37 מעלות שחומם מראש 0.9% NaCl H2O (saline) לפחות 30 דקות לפני המדידה. ןקתהל הקטטר נתוני הרכישה וחבר את ההתקן ממיר דיגיטלי/אנלוגי. חיבור שני ההתקנים למחשב.</li>
	<li>להגדיר את התוכנה. לבצע כיול לחץ מונחה תוכנה וכיול מוליכות כנדרש עפ"י תוכנה מונחה זרימת העבודה8.</li>
</ol>2. שיכוך כאבים והרדמה
<ol><li>עזים ומתנגד העכבר באמצעות הזרקת בקרום הבטן קטמין 100 מ"ג/ק"ג משקל גוף, חריגות השירותים הווטרינריים הידרוכלוריד 10 מ"ג/ק"ג משקל גוף. בתחילת אני / R הניתוח, לנהל את הגוף 0.05 מ"ג/ק"ג. משקל הבופרנורפין intraperitoneally לשמור על שיכוך כאבים.</li>
	<li>לאחר 10 דקות, לבצע צנרור אנדוטרכאליות באמצעות צנתר (iv) 20 גרם תוך ורידי, לאוורר את העכבר עם 40% חמצן (O2), איזופלוריין 2% (v). להגדיר פרמטרים אוורור מתאים (למשל, 220 µL נפח פעימה, 150/דקה בשביל עכבר C57BL/6JRj 25-30 גר').</li>
	<li>לפקח באופן רציף הגוף טמפרטורה באמצעות בדיקה רקטלית. הדקו את העכבר על הצלחת מחוממת עם הראש והצביע לעבר החוקר. טמפרטורת גוף נורמלית העכבר הוא 36.5-38 מעלות צלזיוס לשמור על טמפרטורת הגוף בתוך 1 תואר על ידי התאמה של צלחת מחוממת לטמפרטורה.</li>
</ol>3. השמאלי צנתור חדרית
<ol><li>לחטא החזה והצוואר עם שלושה מתחלפים קרצוף betadine ו- 70% אלכוהול.  המתן חיטוי העור להתייבש. להסיר את שיער החזה באמצעות מערכת גילוח בעלי חיים קטנים.</li>
	<li>לבצע 10 מ מ האורך החציוני חתך של 5 מ מ מתחת לשפה התחתונה כלפי עצם החזה בעזרת מספריים כירורגיים קטנים.</li>
	<li>לנתח חלק בלוטת submandibular ויה בוטה הכנה באמצעות מלקחיים ימינה ושמאלה. הפרד בין רקמת שריר, שומן באזור paratracheal נכון לחשוף את הקומונה נכון העורק הראשי. לגייס ולהפריד את הכלי עבור אורך כולל של 5-10 מ מ של רקמת חיבור באמצעות הכנה זהירה בוטה לצד הספינה עם מלקחיים כפופות. הערה: להימנע מניפולציה מכני של התועה או הגוף בעורק הראש כל הזמן כמו זה יכול לגרום לחץ. דם, איטי.</li>
	<li>עוברים חוטי המשי מוכן שני תחת הכלי. מאתרים ומפסיקים כלי דיסטלי עם קשר הדוק ולמקם קשר רופף על האזור חשוף proximal שמאפשר מעבר של הקטטר.</li>
	<li>לתקן את החוטים של הקשר (צמודה) הגולגולת ליד ראשו של העכברים ליישם מתח האור על הכלי כפי זה יקל על החדרת הקטטר. במקום מלחציים וסקולרית עוצר דימום על הספינה מקורב מקורב של קשר רופף הפיכה לחסום את זרימת הדם.</li>
	<li>לבצע חתך בצורת טריז proximal את הקשר הגולגולת כדי לפתוח את הכלי עם מספריים מיקרו 1 מ"מ. הערה: טיפה קטנה של דם יציין ביצוע נאות של שלב זה.</li>
	<li>הכנס את הצנתר בקפידה עבור 10 מ"מ. התחל הקלטה של קטטר נתונים. הערה: מתיחה החתך עם מלקחיים יכול להקל את התהליך הזה.</li>
	<li>לחלץ את הצבת כלי הדם. להוסיף 1-2 טיפות של תמיסת מלח החתך כדי להקל על התנועה קטטר. המשך החדרת הקטטר עבור בערך עוד 10 מ"מ. אחרי שעברו את הקשר צינתור עם קצה החיישן, להדק את הקשר בזהירות רק מספיק כדי למנוע דם ריפלוקס לצד החלקים דק יותר של הקטטר ללא ופוגע התנועה קטטר. הערה: גודל החיישן בקצה הקטטר מונע ריפלוקס של דם כאשר מחלץ את הצבת כלי הדם.</li>
	<li>בעדינות המשך החדרת הקטטר עד לחץ ניתוח מראה לחץ דם עורקי פרופיל המציין כי הצנתר הממוקמים באבי העורקים (איור 3 א). הערה: הצנתר להגיע את שסתום אבי העורקים תסומן באמצעות התנגדות אור ותנועה מסונכרן הדופק של הקטטר.</li>
	<li>כאשר חווה התנגדות מנסה לקדם את דרך שסתום אבי העורקים, להוציא הקטטר שוב 5 מ מ ו מראש עד LV צנתור יצויין לשינוי בניתוח PV כפי הלחץ הדיאסטולי תגיע 0 - 20 מ מ כספית (איור 3B). הערה שינויים באמצעי ניטור לאשר עוד יותר שמאלה חדרית השמה של קצה חיישן (איור 3C). להדק את הקשר proximal צמוד יותר כדי למנוע תנועה קטטר.</li>
</ol>4. איסכמיה/פגיעה Reperfusion ניתוח
<ol><li>לבצע חתך מתוך החזה סימטרית לכיוון השחי השמאלי באורך כולל של 15 מ מ. להמשיך עם הכנה בוטה של השכבות שני שרירים עד הצלעות, ניתן לאבחן.</li>
	<li>פתח את החזה דרך החתך בין הצלע השמאלית השלישית והרביעית. השתמש ווים כירורגית כדי לגשת אל הכפורת. נכרות את קרום הלב מעל ללב. לפני שתמשיך עם LCA מצדו, חכה 30 s מבלי לגעת החיה כדי לרשום נתונים PV עבור ניתוח חוקי.</li>
	<li>להתאים את LCA המתעוררים תחת auricle שמאל וירידה בצד השמאלי של הלב אל השיא. להשתמש בתפר פוליפרופילן 6-0 כדי להקיף את העורק עם לולאה 2 מ מ מתחת auricle השמאלי. למקם צינורית סיליקון קטן מתחת לתמונה ומניחים על קשר הדוק לעיל. הערה: שריר הלב דיסטלי נהיה אפור משמש בקרה חיובית LCA סגר6. אני / R בניתוח יש לבצעו בתוך 5 דקות בנפרד מיתר החוקר ההפעלה.</li>
	<li>חותכים את התפר-1 מ מ אורך. לשחרר את הווים כירורגי, לסגור באופן ידני את שכבות שריר מעל החתך. לחכות 45 דקות תוך כדי הקלטה ברציפות PV נתונים.</li>
	<li>אחרי 45 דקות, לפתוח מחדש את החתך ולהסיר את צינור סיליקון כדי לגרום פגיעה reperfusion. נתוני הרשומה עבור עוד 20 דקות. הערה: שינוי צבע אדום כפי שנראה לפני איסכמיה מציינת פגיעה reperfusion מוצלחת.</li>
</ol>5. כיול
הערה: הכיול של מערכת קטטר PV כולל 4 שלבים הכרחיים, שניים מהם יש לבצע לאחר המדידה. כיול יש לחזור לאחר בכל ניסוי כדי להבטיח תוצאות בתוקף.
<ol><li>לבצע כיול לחץ וכיול מוליכות לפני הניסוי כפי שמתואר בשלב 1.5.</li>
	<li>לבצע כיול מלוחים כאשר הקטטר עדיין מניחים החדר השמאלי לאחר סיום הניסוי עצמו. בתרגום נכון ומוחלף לרוחב של העורק הראשי באזור מוכן. להזריק 10 µL 25% NaCl ב H2O דרך המילטון מזרק בזמן ההקלטה.</li>
	<li>לחשב את כיול באמצעות רכישת התוכנה על-ידי הדגשת השלב עולה בתעלת נפח (איור 5C). חזור על תהליך זה סה"כ 3 פעמים. למנוע אובדן דם לאחר החילוץ מזרק באמצעות מלחציים כלי הדם במהירות לדחוס הניקוב.</li>
	<li>לבצע כיול עוצמת הקול לכיול אמצעי אחסון נתוני הרכישה על ידי ניתוח של אמצעי אחסון סטנדרטית. השג µL כ-500 העכבר דם לב לנקב בעזרת מזרק 1 mL heparinized מעט (למשל, µL 5 לכל הפארין IE 200). . תחזיר את הקטטר PV 10-15 מ מ כדי למנוע נזק את הקטטר.</li>
	<li>למלא את הדם שהושג לתוך cuvette כיול מחומם מראש 37 ° C (איור 5A). הימנע בועות כמו זה עלולים להפריע התוצאות. להוסיף את הטיפ קטטר לתוך כל טוב של רשומות נתונים. לקבל עיקול רגיל על-ידי ניתוח מונחה תוכנה (איור 5B). חזור על התהליך עבור סכום כולל של 3 פעמים.</li>
	<li>המתת חסד עכברים על ידי דימום למוות או נקע בצוואר הרחם בזמן הרדמה איזופלוריין מספיק נשמר כל הזמן.</li>
</ol>6. ניתוח נתונים
<ol><li>לאחר השלמת השלבים כיול, לבצע ניתוח נתונים מונחה תוכנה. לכן, הדגש בסעיף המתאים (לפחות עשרה מחזורים) בתוך המקטע נתח של זרימת העבודה PV ולבצע ניתוח בסיסית. אל תכלול מחזורים עם סטיות עקב אוורור או מניפולציה במידת הצורך (דמות תלת-ממד).</li>
	<li>לבצע ניתוח בסיסית PV לפני חלוף שסתום אבי-העורקים (לחץ הדם בלבד), מיד לפני ואחרי LCA סגר. המשך על-ידי עריכת ניתוח בסיסית PV, במרווחים של 5 דק. בזמן איסכמיה, לאחר פגיעה reperfusion. בסוף הניסוי, לבצע ניתוח של נתוני הלחץ לאחר נסיגה של הקטטר מן החדר השמאלי (לחץ עורקי).</li>
	<li>ניתוח לפחות 10 מחזורים רצופים כדי להימנע משגיאה הדגימה. כאשר חווים הפרעות חזקה של שהושג ערכים עם האיוורור, הפרעה ארעית של איוורור לכל היותר 5 s יכול להיחשב.</li>
	<li>השתמש בפרמטרים הבאים מחושבים ניתוח בסיסית (איור 3D) כדי לאפיין LV פונקציה:<ol>
<li>נפח פעימה (µL)</li>
		<li>שבריר פליטה: קו אמצעי אחסון / דיאסטולי נפח (%)</li>
		<li>תפוקת הלב: קו אמצעי האחסון * קצב הלב (µL/דקה)</li>
		<li>אינדקס הלב: הלב פלט לגוף פני השטח (µL/(min*cm²)</li>
		<li>קו עבודה: שטח הפנימית של עקומת PV (מ מ כספית * µL)</li>
		<li>מרב הלחץ (Pmax); כלומר לחץ (Pmean)</li>
		<li>מקסימום dP/dt (מ מ כספית/s) כפרמטר של הפונקציה סיסטולית LV</li>
		<li>מין dP/dt (מ מ כספית/s) כפרמטר לתאימות LV</li>
		<li>קבוע הזמן של הרפיה isovolumetric: טאו (ms)</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Sanchis-Gomar, F., Perez-Quilis, C., Leischik, R., Lucia, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+coronary+heart+disease+and+acute+coronary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of coronary heart disease and acute coronary syndrome.</a> Annals of Translational Medicine. 4 (13), 256(2016).</li>
<li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMra1606915">Acute Myocardial Infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li>
<li>McNamara, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predicting+in-hospital+mortality+in+patients+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Predicting in-hospital mortality in patients with acute myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 68 (6), 626-635 (2016).</li>
<li>Kurian, G. A., Rajagopal, R., Vedantham, S., Rajesh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Role+of+Oxidative+Stress+in+Myocardial+Ischemia+and+Reperfusion+Injury+and+Remodeling%3A+Revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Oxidative+Medicine+and+Cellular+Longevity%22%5BJournal%5D)">The Role of Oxidative Stress in Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury and Remodeling: Revisited.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. , (2016).</li>
<li>Turer, A. T., Hill, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+and+rationale+for+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of myocardial ischemia-reperfusion injury and rationale for therapy.</a> American Journal of Cardiology. 106 (3), 360-368 (2010).</li>
<li>Totzeck, M., Hendgen-Cotta, U. B., French, B. A., Rassaf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+approach+to+remote+ischemic+preconditioning+and+ischemic+preconditioning+against+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Methods%22%5BJournal%5D)">A practical approach to remote ischemic preconditioning and ischemic preconditioning against myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of Biological Methods. 3 (4), (2016).</li>
<li>Respress, J. L., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3144600/">Transthoracic echocardiography in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (39), (2010).</li>
<li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nature Protocols. 3 (9), 1422-1434 (2008).</li>
<li>Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+catheterization+in+mice+to+measure+the+pressure+volume+relationship%3A+Investigating+the+Bowditch+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Cardiac catheterization in mice to measure the pressure volume relationship: Investigating the Bowditch effect.</a> Journal of Visualized Experiments. (100), e52618(2015).</li>
<li>Rossello, X., Hall, A. R., Bell, R. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+Langendorff+perfused+isolated+mouse+heart+model+of+global+ischemia-reperfusion+injury%3A+Impact+of+ischemia+and+reperfusion+length+on+infarct+size+and+LDH+release%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Pharmacology+and+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Characterization of the Langendorff perfused isolated mouse heart model of global ischemia-reperfusion injury: Impact of ischemia and reperfusion length on infarct size and LDH release.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics. 21 (3), 286-295 (2016).</li>
<li>Task Force on the management of ST-segment elevation acute myocardial infarction of the European Society of Cardiology (ESC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ESC+Guidelines+for+the+management+of+acute+myocardial+infarction+in+patients+presenting+with+ST-segment+elevation%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">ESC Guidelines for the management of acute myocardial infarction in patients presenting with ST-segment elevation.</a> European Heart Journal. 33 (20), 2569-2619 (2012).</li>
<li>Shigemitsu, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+due+to+left+main+coronary+artery+occlusion.+Therapeutic+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Japanese+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction due to left main coronary artery occlusion. Therapeutic strategy.</a> Japanese Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 50 (4), 146-151 (2002).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

PV ניטור של LV ספיקת הדם, אוטם שריר הלב חריפה משמשת שיטה להערכת בזמן אמת אין ויוו להלם קרדיוגני, תפקוד לקוי LV ב אני / R פציעה. PV צנתור יכול לספק קשת רחבה של פרמטרים לגבי LV בהתכווצות והתרחבות של הפונקציה. בנוסף הפרמטרים LV נפח זה התקבלו בדרך כלל ע י אקו או MRI (אמצעי אחסון קאמרית EF, נפח פעימה, תפוקת הלב), ניתוח PV היבולים פרופיל שלם יותר של פונקציית LV בכך בו-זמנית מדדים של LV סיסטולי ביצועים (contractility dP/dt, קו עבודה) ותאימות LV (-dP/dt, טאו) כפרמטר עבור הדיאסטולי.
כמו אי ספי...

מחלות לב וכלי דם הוא הגורם השכיח ביותר למוות התרבות המערבית1. אוטם אקוטי הוא אירוע קריטי, אשר קשורה עם תמותה גבוהה אקוטי וכרוני2. גם אם revascularization מושגת באמצעות חירום התערבות כלילית מלעורית (PCI), התמותה נותר גבוה, במיוחד בטווח 48 שעות הראשונות לאחר הופעת התסמינים אצל חולים עם אוטם אקוטי3. הלם קרדיוגני נגרם מירידה חריפה הפונקציה left (LV) חדרית הוא הגורם העיקרי לתמותה בבית חולים אלה מטופלים3. הפחתה זו מוקדם בתפקוד LV נגרם נזק שריר הלב בעקבות איסכמיה, פגיעה reperfusion. מה שנקרא איסכמיה/פגיעה reperfusion (אני / R) פגיעה מתווך על ידי שינויים metabolome הסלולר כגון דור מוגזמת של4,של מינים חמצן תגובתי5.
על מנת לחקור מנגנוני הגנה אפשרי שמוביל לירידה נזק שריר הלב באווירה פרה, מודלים אמינים העכבר חיוניים כולל שיטות להערכה של פוסט-אני/R LV פונקציה6. בהגדרה זו, אקו אקו7 ודימות תהודה מגנטית (MRI)6 נמצאים בשימוש נרחב עבור פונקציונלי phenotyping8,9. אולם, שיטות אלה אינם מתאימים להערכת חמורה בתפקוד LV ו בדום לב ב אוטם אקוטי מתמשך, לא ישירות להציג נתונים על LV לחץ. המנגנון Langendorff באמצעות הלב מבודד assay שמחוץ מספק מידע אודות pathomechanisms הבסיסית בשלב מוקדם אני / R פציעה10. שיטה זו היא מוגבל בשל יכולתו לשחזר ויוו מנגנונים גמישים כגון ויסות במערכת העצבים האוטונומית או ויסות הורמונלי, הומאוסטזיס חומצה בסיס. יש כיום אין שיטה זמין עבור phenotyping תפקודית מלאה של הלם קרדיוגני, שמאל חדרית בתפקוד במהלך המתמשך שריר הלב אני / R פציעה.
בגישה מסונכרן עם שילוב של לחץ-נפח (PV) צנתור, סגר ארעי כירורגי השמאלי הראשי עורקים (LCA) יכול להיות מועיל ומאתגרת מבחינה טכנית. ספיקת הדם extracardiac יציבה במהלך אני / R פגיעה הם חיוניים עבור תוצאות חוקי מאז אובדן הרדמה או דם לא יציב בכבדות יכול להשפיע על התוצאות. רומן הגישה עבור והמודינמיקה phenotyping של אני / R פגיעה באמצעות LV PV צנתור, ארעי LCA סגר יכול להביא תובנות חדשות להלם קרדיוגני ועל תפקוד LV חריפה אוטם שריר הלב, לשמש כשיטה לצורך ניתוח עתידי על cardioprotection.

<table><tbody><tr><td>Betaisodona Loesung</td><td>Mundipharma</td><td>4162-1606/89x30mm</td><td>קוביית כיול Povidon-Iod</td></tr><tr><td></td><td>מכשירי Millar</td><td>910-1049</td><td>קוביית כיול</td></tr><tr><td>Contura גוזם שיער מקצועי</td><td>Wella</td><td>HS-60</td><td>מערכת גילוח לבעלי חיים קטנים</td></tr><tr><td>מחט ליקוי חמה 27G</td><td>BD</td><td>REF 305770</td><td>27G מחט</td></tr><tr><td>מלקחיים</td><td>FST</td><td>11203-25, 11069-08, 11616-15, 11506-12, 11051-10</td><td>מלקחיים כירורגיים</td></tr><tr><td>מלקחיים</td><td>Aesculap Braun</td><td>BN731R, BD 311R</td><td>מלקחיים כירורגיים</td></tr><tr><td>Foris FS2434</td><td>Eizo</td><td>0FTD2033</td><td>מוניטור</td></tr><tr><td>מזרק המילטון 100 ומיקרו; l מחט</td><td>המילטון</td><td>80621</td><td>100 ומיקרו; l מזרק עם מחט</td></tr><tr><td>מחומם שולחן OP לבעלי חיים קטנים</td><td>מכשיר הרווארד</td><td>15001</td><td>שולחן OP מחומם</td></tr><tr><td>הפרין-נטריום 25000</td><td>רציופארם</td><td>N68542.04</td><td>הפרין</td></tr><tr><td>קטמין 10% 100 מ"ג/מ"ל</td><td>בלה-פארם</td><td>FS1670041</td><td>קטמין</td></tr><tr><td>Labchart Pro 8 + Pro מודולים</td><td>מכשירי AD</td><td>MLS260/8</td><td>PV תוכנת ניתוח נתונים</td></tr><tr><td>LAS EZ</td><td>Leica</td><td>LAS EZ</td><td>מיקרוסקופ מצלמה</td></tr><tr><td>תוכנה Leica IC80 HD</td><td>Leica</td><td>IC80 HD</td><td>מיקרוסקופ</td></tr><tr><td>מצלמה Leica M80</td><td>Leica</td><td>M80</td><td>מיקרוסקופ</td></tr><tr><td>מיקרו-קצה קטטר</td><td>מתמר Millar מכשירים</td><td>SPR-839</td><td>PV קטטר MiniVent</td></tr><tr><td></td><td>הרווארד מכשיר</td><td>845</td><td>אוורור</td></tr><tr><td>MPVS אולטרה</td><td>מילר מכשירים</td><td>מכשיר לרכישת נתונים של צנתר PV</td> <td>PL3508B48/M</td></tr><tr><td>Octenisept</td><td>Sch&uuml; lke</td><td>20000832-A</td><td>חומר חיטוי</td></tr><tr><td>פלסטיפק 1 מ"ל</td><td>PD</td><td>REF 303172</td><td>מזרק 1 מ"ל</td></tr><tr><td>PowerLab 8/35</td><td>AD Instruments</td><td>PL3508</td><td>ממיר אנלוגי/דיגיטלי</td></tr><tr><td>Prolene 6-0</td><td>Ethicon</td><td>XNEH7814. P31</td> ערכת נסיגה <td>של תפר פוליפרופילן</td></tr><tr><td></td><td>FST</td><td>18200-20</td><td>נסיגה של סיטוס כירורגי</td></tr><tr><td>Seraflex 5-0</td><td>Naila</td><td>IC108000</td><td>תפר משי</td></tr><tr><td>קטן ומיקרו מספריים</td><td>FST Essen</td><td>14059-11, 15007-08, 14064-11</td><td>מספריים כירורגיים</td></tr><tr><td>צינור סיליקון קטן</td><td>Reichelt Chemietechnik</td><td></td><td>צינור לחסימת LCA</td></tr><tr><td>נתרן כלוריד</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>S7653</td><td>נתרן כלורי</td></tr><tr><td>טסטו 108</td><td>טסטו</td><td>5631080</td><td>מדחום רקטלי</td></tr><tr><td>מחשב שולחני Thinkcentre</td><td></td><td>מחשב</td><td></td> PC0EJS2V</tr><tr><td>Vasofix Safety 20G</td><td>בראון</td><td>4269110S-01</td><td>קטטר אינטובציה</td></tr><tr><td>Windows 10</td><td>Microsoft</td><td>KW9-00240</td><td>מערכת הפעלה</td></tr><tr><td>Xylazin 2% </td><td>סווה</td><td>6324464.00.00</td><td>קסילזין הידרוכלוריד</td></tr></tbody></table>

ניתוח בזמן אמת לחץ-נפח של אוטם אקוטי בעכברים

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

אוטם אקוטי יכול להוביל ספיקת לב חריפה בדום לב. הערכת ספיקת הדם חיונית על ההערכה של כל גישה טיפולית פוטנציאל נגד חריפה בתפקוד (LV) הימני חדרית. הנוכחי שיטות הדמיה (למשל., אקוקרדיוגרפיה, דימות תהודה מגנטית) יש מספר מגבלות מאז ישירות לא ניתן למדוד נתונים על LV לחץ. צנתור LV בעכברים שעברו עורקים סגר יכול לשמש שיטה עבור הערכה בזמן אמת של LV פונקציה.
בתחילת ההליך, עכברים היו מרדימים ואחריו צנרור אנדוטרכאליות. עבור LV צנתור, עורק התרדמה הימני היה חשוף דרך החתך התיכון-צוואר. הקטטר הציג והניח לתוך חלל LV. ניקור חזה שמאל נערך, השמאלי הראשי העורק הראשי (LCA) היה מאתרים. כדי לגרום פגיעה reperfusion, התפר שוחרר לאחר 45 דקות לחץ-נפח הנתונים נרשמה בכל עת.
מצדו של LCA גרם ירידה בתפקוד הסיסטולי LV, כפי שמעידים הפחתה 30% נפח פעימה, LV שבריר פליטה (EF), תפוקת הלב. מרבית dP/dt כפרמטר עבור LV contractility צומצם באופן משמעותי גם ו הדיאסטולי היה נפגעת קשות (מינימום dP/dt-40%). פגיעה reperfusion על פני תקופה של 20 דקות לא הובלת להחלמה מלאה של LV פונקציה.
ניתוח בזמן אמת לחץ-נפח שימש הליך חוקי עבור ניטור תפקוד הלב במהלך אוטם אקוטי בעכברים. שמירה על יציבה הרדמה בגישה כירורגית מתוקננת הייתה חיונית להבטיח תוצאות בתוקף. כמו השלב המוקדם של אוטם אקוטי הוא קריטי עבור תחלואה ותמותה, השיטה מוגדרים היטב יכול להיות מועיל עבור הערכה פרה של אסטרטגיות חדשות עבור cardioprotection.

לאחר צנתור LV, בוצעה הפיכה LCA מצדו למשך 45 דקות אחרי 10 דקות של פגיעה reperfusion. PV נתונים הוקלט בכלל פעמים (איור 1).
מיקום נכון של הקטטר PV אושר על ידי קבלת התרשים LV PV אופיינית (איור 2 א). LV הקטטר השמה הראה טווח הלחץ חדרית טיפוסי עם מינימום של 0 - 20 מ מ כספית ואילו השמה שווא של PV-הקטטר באבי העורקים היה מופיע עקומת לחץ הדם בעורק טיפוסי עם לחץ מינימלי של 30-60 מ ...

אוטם אקוטי בעכברים גורם לשינויים חריפה אבל שהיישום מאופיין הפונקציה left (LV) חדרית. צנתור LV בעכברים שעברו עורקים סגר משמשת שיטה עבור הערכה בזמן אמת של LV פונקציה.

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום המחקר הקרדיווסקולרי כגון זיהוי מנגנוני הגנה מוקדמים בהפרעה חריפה של שריר הלב. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שניתן לבצע אפיון המודינמי מתקדם בזמן אמת בעכברים העוברים אוטם שריר הלב ואחריו רפרפוזיה. אינטובציה אנדוטרכיאלית וניתוחי רפרפוזיה איסכמיה יבוצעו על ידי פיה סטוק, ביולוגית מהמעבדה שלנו.לאחר הרדמת החיה, הסר את שיער הצוואר והחזה באמצעות קוצץ חשמלי. לאחר מכן, נקו את העור עם שלושה קרצוף לסירוגין של בטדין ו-70% אלכוהול. כעת, בעזרת מספריים כירורגיים קטנים, בצע חתך חציוני אורכי של 10 מילימטר חמישה מילימטרים מתחת לשפה התחתונה ולכיוון עצם החזה.לאחר מכן, נתח בצורה בוטה את החלק השמאלי והימני של הבלוטה התת-לסתית באמצעות מלקחיים. לאחר מכן, הפרד את רקמת השריר והשומן באזור קנה הנשימה הימני כדי לגשת לעורק המושחת הימני. בעזרת מלקחיים מעוקלים, נתחו בזהירות את הכלי כדי לגייס ולהפריד חמישה עד 10 מילימטרים ממנו.הימנע תמיד מהזזת עצב הנרתיק בגוף המושחת, מכיוון שהדבר עלול להוביל ליתר לחץ דם חמור וברדיקרדיה. לאחר גיוס הכלי, העבירו את שני תפרי המשי המוכנים 5/0 מתחת לכלי. לאחר מכן קשרו את הכלי הדיסטלי באמצעות קשר הדוק, והניחו קשר רופף על התפר הפרוקסימלי שאליו יגיע הקטטר.לאחר מכן, הנח מהדק כלי דם המוסטט בקצה הפרוקסימלי של הכלי החשוף, פרוקסימלי לתפר. זה ישמש לחסימת זרימת הדם באופן הפיך. כעת, בעזרת מספריים, פתח את הכלי עם החתך בצורת טריז מילימטר אחד קרוב לקשר הגולגולת.יש לראות טיפת דם קטנה. לאחר מכן, מתחו את החתך והכניסו את הקטטר 10 מילימטרים לתוך הכלי. כעת, התחל לרשום את הנתונים שנאספו על ידי בדיקת הצנתר.לאחר מכן, חלץ את מהדק כלי הדם, ולאחר מכן הוסף טיפה אחת או שתיים של מי מלח לתוך החתך כדי לעזור להחליק את הקטטר עוד 10 מילימטרים במורד הכלי. לאחר מכן, הדק את הקשר כדי למנוע ריפלוקס דם לצד הצנתר מבלי לנעול את הקטטר במקומו. כעת, המשך בעדינות לקדם את הצנתר עד שניתוח הלחץ יראה פרופיל לחץ דם עורקי כאשר הצנתר הגיע לאבי העורקים.בשסתום אבי העורקים יש להרגיש גם התנגדות אור ותנועה מסונכרנת במשיכה. כאשר מנסים לקדם את הקטטר דרך המסתם האאורטלי, זה יכול לעזור למשוך אותו לאחור חמישה מילימטרים ולהתקדם שוב. צנתור תקין של החדר השמאלי יצוין על ידי שינוי בלחץ הדיאסטולי.כל שינוי בנפח הוא גם אינדיקטור לקידום החיישן לחדר השמאלי. ברגע שאתה בטוח שהקטטר נמצא בחדר השמאלי, הדק את הקשר הפרוקסימלי חזק יותר כדי למנוע ממנו לזוז. לאחר הצנתור, הכינו את האיסכמיה של 45 דקות.ראשית, חתכו את העור מעצם החזה הזנבית לבית השחי השמאלי. לאחר מכן המשך בהכנה הבוטה של שתי שכבות השרירים כדי לחשוף את הצלעות. לאחר מכן, פתח את בית החזה עם חתך בין הצלע השמאלית השלישית לרביעית.השתמש בווים כירורגיים כדי לגשת לקרום הלב, ולאחר מכן כרת את קרום הלב המכסה את הלב. לפני שתמשיך עם קשירת העורקים הכליליים הראשיים השמאליים, המתן 30 שניות מבלי לגעת בבעל החיים כדי לתעד נתוני לחץ ונפח לניתוח תקף. כעת, זהה את העורק הכלילי הראשי השמאלי.הוא יוצא מתחת לאורקל השמאלי ויורד בצד שמאל של הלב לכיוון הקודקוד. לאחר מכן, לולאה תפר פוליפרופילן 6/0 סביב העורק שני מילימטרים מתחת לאורקל השמאלי. לאחר מכן, הניחו צינור סיליקון קטן מתחת ללולאה ואבטחו אותו בעזרת קשר.אם שריר הלב הדיסטלי מתחיל להאפיר, אז העורק הכלילי הראשי השמאלי נסגר. כדי להמשיך, חתוך את התפר באורך מילימטר אחד, ולאחר מכן שחרר את הווים הכירורגיים וסגור ידנית את שכבות השריר מעל החתך. לאחר מכן המתן 45 דקות תוך רישום רציף של נתוני לחץ ונפח.לאחר 45 דקות, פתח מחדש את החתך והסר את צינור הסיליקון כדי לגרום לזלוף מחדש. לאחר מכן הקלט נתונים למשך 20 דקות נוספות. כאשר הלב חוזר להיות אדום, הרפרפוזיה מצליחה.לאחר תקופת הרפרפוזיה, שחרר את הקשר והוציא את הקטטר תוך הידוק מהיר של הקשר שוב כדי למנוע אובדן דם אם יש צורך בדם למחקרים נוספים. לאחר השלמת שלבי הכיול, המפורטים בפרוטוקול הטקסט, בצע ניתוח נתונים מונחה תוכנה. עבור נתוני הבסיס, הדגש לפחות 10 מחזורים שצולמו לפני מעבר הקטטר למסתם אבי העורקים.לפי הצורך, אל תכלול מחזורים עם סטיות עקב אוורור או מניפולציה. לאחר מכן, נתח 10 בלוקים של מחזור במרווחים של חמש דקות דרך האיסכמיה והרפרפוזיה. הפרמטרים השונים המחושבים בניתוח זה מספיקים לאפיון תפקוד החדר השמאלי.בסיום הניסוי, לאחר שהקטטר נסוג מהחדר השמאלי, בצע ניתוח סופי של נתוני הלחץ. בעקבות הפרוטוקול, לאחר צנתור החדר השמאלי, בוצעה קשירת עורק כלילי ראשי שמאלי הפיכה למשך 45 דקות ואחריה 20 דקות של רפרפוזיה. מיקום נכון של צנתר הנפח והלחץ אושר על ידי קבלת גרף הלחץ-נפח האופייני לחדר השמאלי.חסימה מוצלחת של העורק הכלילי הראשי השמאלי אושרה ויזואלית על ידי הלבנה של שריר הלב של החדר השמאלי הדיסטלי. לאחר חסימת העורק הכלילי הראשי השמאלי, נותחו נתוני לחץ ונפח במרווחים של חמש דקות. נתוני הלחץ לא הראו שינויים בלחץ הסיסטולי המקסימלי של החדר השמאלי, מה שמעיד על זלוף היקפי משומר והרדמה יציבה.ניתוח נפח החדר השמאלי גילה כי בשלב המוקדם של האיסכמיה, חלה ירידה משמעותית במקטע הפליטה ובנפח השבץ המוחלט. השינוי המקסימלי בלחץ, פרמטר של התכווצות החדר השמאלי, הראה ירידה של 30% בעכברים שעברו איסכמיה של שריר הלב. השינוי המינימלי בלחץ ירד משמעותית גם כן, מה שמצביע על פגיעה בהיענות החדר השמאלי.לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לאפיין את התפקוד הסיסטולי והדיאסטולי של החדר השמאלי בעכברים העוברים אוטם שריר הלב החריף באמצעות טכניקת קטטר נפחי לחץ.

real-time-pressure-volume-analysis-acute-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מתארים כיצד לבצע הדמיית MRI ו-PET של לב העכבר. הפרוטוקול מותאם להערכת יעילות הטיפול במודלים של אוטם שריר הלב ואי ספיקת לב.

MRI ו-PET במודלים של עכברים של אוטם שריר הלב

מתואר מודל בעל יכולת שחזור גבוהה לאוטם שריר הלב בעכברים עם מניפולציות פולשניות מינימליות. ניתן לבצע את המודל בקלות, וכתוצאה מכך יכולת שחזור ושיעור הישרדות גבוהים. לפיכך, המודל המתואר יפחית את מספר בעלי החיים הנדרשים כמתבקש על ידי עקרון 3R (החלפה, עידון והפחתה).

נוהל כירורגי זעיר פולשנית של גרימת אוטם שריר הלב בעכברים

אי ספיקת לב היא הגורם המוביל לאשפוז וגורם עיקרי לתמותה. מודל של קשירה קבועה של העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי בעכברים מיושם כדי לחקור עיצוב מחדש של החדרים ותפקוד לקוי של הלב לאחר אוטם שריר הלב. מוצגת הטכניקה של מדידות המודינמיות פולשניות בעכברים.

קשירת קבע של העורק השמאלי קדמי יורד כלילית בעכברים: דגם של Remodelling אוטם שריר לב ופוסט-אי ספיקת לב

שיטה זו מתארת את השימוש בטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת קוונטית (MicroCT) כדי להעריך את המורפולוגיה הלבבית, התפקוד, הזלוף, חילוף החומרים והכדאיות עם חומר ניגוד יוד בעכברים עם איסכמיה של שריר הלב המושרה בניסוי. ניתן ליישם את הטכניקה להדמיה אורכית לא הרסנית בתפוקה גבוהה in vivo של מודלים שונים של בעלי חיים של מחלות לב אנושיות.

In vivo כמותי הערכת מבנה שריר הלב, תפקוד, זלוף ואת הכדאיות שימוש טומוגרפיה לב מיקרו שחושב

הערכת תוצאה אמינה ומדויקת היא המפתח לתרגום של טיפולים פרה-קליניים לתוך טיפול מרפאתי. המאמר הנוכחי מתאר כיצד להעריך שלושה פרמטרים התוצאה העיקרית רלוונטיות קלינית של ביצועי הלב ונזק במודל אוטם לבבי חריף חזיר.

הערכת התוצאה העיקרית במודל חזיר של באוטם שריר הלב

כאן אנו מתארים הליך כירורגי המראה כיצד להשיג הארכה קבועה של עורק שמאלי הקדמי כלילית בעכברים. מודל זה הוא בעל רלוונטיות גבוהה לחקור את הפתופסולוגיה של אוטם שריר הלב ואת התהליכים הביולוגיים המקביל.

מודל אוטם שריר הלב באמצעות הארכה קבועה של עורק שמאלי קדמי כלילי יורד

מאמר זה מדגים מודל ללמוד שיפוץ לב לאחר שריר הלב קריופגיעה בעכברים.

מודל לפציעה בהקפאה לחקור אוטם שריר הלב בעכבר

תחת הרדמה מספקת, לב העכבר הוחצן דרך החלל הבין-קוסטלי, ואוטם שריר הלב נגרם בהצלחה על ידי קשירת העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD) באמצעות חומרים הזמינים ברוב המעבדות.

שיטה פשוטה שונה להשראת אוטם שריר הלב בעכברים

כאן אנו מתארים שיטה פשוטה וניתנת לשחזור שיכולה לגרום לאוטם שריר הלב או לפגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים על ידי קשירה מדויקת של העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי באמצעות מיקרומניפולציה.

השראת אוטם שריר הלב ופגיעה באיסכמיה של שריר הלב בעכברים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מבט פרסטרנלי ארוך שונה ללוקליזציה מהירה ומדויקת של העורק היורד הקדמי השמאלי. גישה זו נועדה להיות פשוטה וידידותית יותר למשתמש תוך הקלה על בחינת שינויים דינמיים במאגר הזרימה הכלילי בעקבות איסכמיה של שריר הלב בעכברים.

הערכות דינמיות של שמורת הזרימה הכלילית לאחר רפרפוזיה של איסכמיה שריר הלב בעכברים

חקור אופיון לחץ-נפח בזמן אמת באוטם אקוטי בעכברים. שיטה זו מאפשרת הערכת תפקוד חדר שמאל וזיהוי מנגנונים מגנים מוקדמים במחקר קרדיולוגי.

ניתוח בזמן אמת לחץ-נפח של אוטם אקוטי בעכברים

גלה סרטונים נוספים