Medicine
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
יצירת מודל של סרטן שד גרורתי Orthotopic מאתר וביצוע מאתר כריתה רדיקלית
Chapters
Summary November 29th, 2018
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
אנחנו מציגים את orthotopic מאתר השד סרטן ומודל כריתה רדיקלית בטכנולוגיה ביולומינסנציה לכמת את נטל הגידול לחקות התקדמות סרטן השד אנושי.
Transcript
שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום סרטן השד על איך לחקות את התקדמות סרטן השד האנושי וטיפול במודל העכבר. היתרון העיקרי של מודל זה של סרטן השד העכבר הוא שיש לו שיעור גידול גבוה לאחר השתלה אורתוטופית שיעור הישנות מקומי נמוך לאחר כריתת שד. התחל על ידי אישור חוסר תגובה לצביטת בוהן בעכבר נקבה הרדמה והדבקת איברי החיה ללוח כירורגי.
שימוש במטליות כותנה סטריליות מעקרות את האזור הכירורגי עם כלורהקסידין, יוד ו-75% אתנול. ולעשות חתך בעור חמישה מילימטר באמצע קיר החזה האחורי. לאחר מכן להרים את הצד הימני של העור הסמוך החתך ולהשתמש מספריים מיקרודיסקציה סטרילית כדי לנתק את העור מקיר החזה.
להפוך את העור כדי לחשוף את כרית שומן חלבי מספר 2 הנכון ולהשתמש מזרק אינסולין מיליליטר אחד מצויד מחט 28.5-מד להזריק בזהירות 20 microliters של השעיה תא סרטן דרך הפצע לתוך כרית השומן. החזק את המחט בתוך כרית השומן במשך חמש שניות כדי לאפשר את תערובת חלבון התא הסרטני gelatinous להתחזק לפני הסרת המחט, וסגירת החתך עם תפרים סטריליים 5-0 nonabsorbable. לאחר מכן מניחים את החיה בכלוב נקי עם ניטור עד חקירה מלאה.
כדי לבצע את כריתת השד שמונה ימים לאחר חיסון סרטן להכין את העכבר לניתוח כפי שהוכח רק, ולעשות חתך בעור חמישה מילימטר שני מילימטרים משמאל הצלקת הכירורגית מחיסון התא הסרטני. הרחב את החתך לכיוון השורש של ההמשך כדי להסיר את הגידול, ואת העור, כולל הצלקת הכירורגית, ואת הנגע במגע עם הגידול, ואת אגן בלוטות הלימפה בבית הזרע שבו בדרך כלל אין בלוטות הלימפה גלויים נמצאים בזמן כריתת השד. ואז לסגור את פגמי העור עם תפרים סטריליים 5-0 nonabsorbable בצורה של Y.And להחזיר את החיה לכלוב שלה עם ניטור עד כה מלאה.
לכמית גרורות ריאות 21 ימים לאחר החיסון להזריק 150 מיליגרם לקילוגרם של D-לוציפרין IP 15 דקות לפני המתת חסד. ולהשתמש מספריים מאיו מעוקל כדי לפתוח את העור ואת צדת באמצע הבטן. לחץ על הכבד עד הסרעפת ניתן לדמיין, לחתוך את הסרעפת ואת הצלעות הדו צדדיות מן caudad כדי צפלד.
הפוך את קיר בית החזה הקדמי כדי לחשוף את הריאות ולהרים את הריאות כדי לזהות את הוושט החזי, שנראה כמו כבל המחבר את הריאות לעמוד השדרה. חותכים את הוושט עם מספריים microdissection ולהשתמש מדפים כדי למשוך את הריאות הדו-צדדיות ואת הלב לכיוון caudad. לאחר מכן חותכים את קנה הנשימה ואת כלי הדם העיקריים לשיא הריאה ב cephalad וממקמים את הריאות לתוך צלחת פטרי 10 ס"מ עבור הדמיה bioluminescent.
השתמש במספריים כדי להסיר את הלב מרמת הריאה. החל משמונה ימים לאחר כרית שומן חלב סרטן חיסון התא הביולומינציה בריאות הוא עמוק יותר וקטן יותר מאשר ההיתוך העיקרי המשקף את נטל הגידול העיקרי בעכברים חיים. מדידת גודל הגידול עם calipers מאפשר הערכה של נפח הגידול במקום.
מודל זה של כריתת שד מאפשר גם ניטור נטל גידול גרורתי סדרתי מבלי להמתת חום לבעלי החיים. את נטל הגידול של גרורות הריאה ניתן לכמת גם על ידי הדמיה לשעבר vivo, אבל המגבלה היא כי העכברים חייבים להיות המתת דם. הישרדות עכבר לאחר טיפול כירורגי יכול גם להיות במעקב כנקודת קצה קלינית לתרגום.
לאחר התפתחותה טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום סרטן השד לחקור לא רק פיתוח תרופות חדשות, אלא גם מחקר סרטן השד בכלל.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.