Journal
/
/
Подготовка хлоропласта суб отсеков от Arabidopsis для анализа белка локализации Immunoblotting или протеомики
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Preparation of Chloroplast Sub-compartments from Arabidopsis for the Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics
DOI:

10:28 min

October 19, 2018

, , , ,

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:01Harvesting of Arabidopsis Leaves
  • 02:26Purification of Crude Chloroplasts Using Differential Centrifugation
  • 03:30Purification of Intact Chloroplasts on Continuous Percoll Gradient
  • 04:51Lysis of Intact Chloroplasts Using a Hypotonic Buffer and Purification of Chloroplast Sub-Compartments on Discontinuous Sucrose Gradients
  • 06:05Washing and Concentration of Thylakoid and Envelope Membrane Systems
  • 07:09Results: Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics
  • 08:44Conclusion

Summary

Automatic Translation

Здесь мы опишем способ очистить нетронутыми хлоропластов Arabidopsis листья и их три основных суб отсеков (конверт, стромы и тилакоидов), с помощью сочетания дифференциального centrifugations, непрерывной Percoll градиенты, и разрывными сахарозы градиенты. Этот метод является ценным для subplastidial и внутриклеточных Локализация белков immunoblotting и протеомики.

Related Videos

Read Article