Journal
/
Genetics
/
Forberedelse og gen modifikation af ikkemenneske primat hæmatopoietisk stamceller og stamceller
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Preparation and Gene Modification of Nonhuman Primate Hematopoietic Stem and Progenitor Cells

Forberedelse og gen modifikation af ikkemenneske primat hæmatopoietisk stamceller og stamceller

DOI:
10.3791/58933-v

•

11:16 min

•

February 15, 2019

•

, , , , , , ,
1Stem Cell and Gene Therapy Program,Fred Hutchinson Cancer Research Center, 2Department of Medicine,University of Washington, 3Department of Pathology,University of Washington

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:42Bone Marrow Hemolysis (Day -1)
  • 02:44CD34-enriched Cell Quality Control (Day -1)
  • 05:10CD34+ Hematopoietic Stem and Progenitor Cell (HSPC) Gene Modification and Overnight Recovery (Day 0)
  • 06:33Cell Harvest and Infusion Preparation (Day 1)
  • 07:42Liquid Culture Quality Control (Days 1-5)
  • 09:19Results: Representative HSPC Identification and Analysis
  • 10:34Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Målet med denne protokol er at isolere rettighedsbegrebet primat CD34+ celler fra PRIMES knoglemarv, gen-redigere disse celler med lentiviral vektorer og forberede et produkt til infusion til den autologe vært. Den samlede protokol længde er ca. 48 h.

Tags

Nonhuman PrimateHematopoietic Stem CellsProgenitor CellsGene TherapyBone MarrowCell IsolationCD34Magnetic Cell SortingFlow CytometryCell Culture

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Udvælgelsesafhængig og uafhængig generering af CRISPR / Cas9-medierede Gene Knockouts i Pattedyrceller

Forberedelse af prøver og analyser af RNASeq-baseret genekspression Data fra zebrafisk

En standardmetode til at undersøge ejendommen mutagenicitet som en funktion af punkt Mutation reparation katalyseret af CRISPR/Cas9 og SsODN i humane celler

Immunfarvning for DNA ændringer: beregningsmæssige analyse af Konfokal billeder

Generation af en gen-forstyrret Streptococcus mutans stamme uden Gene kloning

Højeffektive gen afbrydelse af Murine og menneskelige hæmatopoietisk stamceller ved CRISPR/Cas9

At udforske Root Microbiome: udtrække bakteriel Fællesskabets Data fra jord, rhizosfære og rod Endosphere

En Fast og kvantitativ metode til posttranslationel modifikation og Variant aktiveret kortlægning af peptider til genomer

En kombinatorisk encellede tilgang til at karakterisere de molekylære og Immunophenotypic heterogenitet af menneskelige stamceller og stamfader populationer

Isolation, karakterisering og mikroRNA-baseret genetisk modificering af menneskelige Dental follikel stamceller

Read Article