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January 24, 2020
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हमारी विधि शुष्क नेत्र रोग के लापता विश्वसनीय पशु मॉडल प्रदान करता है जो सभी लैक्रिमल ग्रंथियों और दोहराने इंजेक्शन इंजेक्शन की हमारी विधि के लिए तीव्र या पुरानी धन्यवाद हो सकता है। यह तकनीक मज़बूती से व्यापक रूप से चर आकार की ग्रंथियों के लिए अल्ट्रासाउंड मार्गदर्शन का उपयोग कर अवर लैक्रिमल ग्रंथि के लिए Concanavalin A बचाता है और बेहतर लैक्रिमल ग्रंथि इस विधि को एक पूर्ण दृष्टिकोण बनाने के लिए । यह मॉडल जलीय कमी वाली शुष्क नेत्र रोग को प्रेरित करने के लिए एक सरल, अनुकूलित, गैर-शल्य चिकित्सा साधन प्रदान करता है।
यह दवा प्रभावकारिता और रोग रोगविज्ञान का अध्ययन करने के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है। पीछे के चीरे की पहचान करना और अल्ट्रासाउंड स्थानीयकरण का उपयोग करना पहली बार में चुनौतीपूर्ण हो सकता है। इन दोनों चरणों के लिए अल्ट्रासाउंड स्थानीयकरण में सहायता करने के लिए सभी फर को हटाना महत्वपूर्ण है।
प्रक्रिया का प्रदर्शन वी हुआंग, मेरी प्रयोगशाला से एक स्नातक छात्र होगा । कान के पालि के साथ एक आराम से सिर की स्थिति को देख कर हल्के गतिन की पुष्टि करने के बाद, पहली आंख में परिरक्षक मुक्त लिडोकेन के 25 माइक्रोलीटर लागू करने के लिए एक माइक्रोपिपेट का उपयोग करें और पलकों के बीच एक लचीला तार ढक्कन वीक्षक रखें। 0.3 संदंश का उपयोग करके, इसके शीर्ष पर निकटान झिल्ली को समझें और इसे कॉर्निया पर बढ़ाएं।
26 गेज तेज सुई का उपयोग करके, 1:100, 000 वें एपिनेफ्रीन के साथ लिडोकेन 1%इंजेक्ट करें, जो कि निकैटिंग झिल्ली के आधार में है। झिल्ली पर एक मध्यम ब्लब बनना चाहिए। फिर वीक्षक निकालें और बाईं निकासी झिल्ली में एक समान इंजेक्शन बनाएं।
लगभग पांच मिनट के बाद, ढक्कन वीक्षक को वापस साथी आंखों में रखें और इसके शीर्ष पर निकटाटिंग झिल्ली को वापस लेने के लिए 0.3 संदंश का उपयोग करें। वेस्टकॉट कैंची का उपयोग करके, अपने आधार पर निकटाटिंग झिल्ली को काट लें और वीक्षक को हटा दें। इसके बाद आंख पर सामयिक एंटीबायोटिक मरहम रखें।
बेहतर लैक्रिमल ग्रंथि इंजेक्शन के टटोलना के लिए, sedation की पुष्टि के बाद, पूर्व कक्षीय और खोपड़ी क्षेत्र में फर से कतरनी और किसी भी अवशिष्ट फर को पूरी तरह से हटाने के लिए depilatory क्रीम का उपयोग करें । दो मिनट के बाद क्रीम को हटा दें और उचित आंखों पर 1% परिरक्षक-मुक्त लिडोकेन के 25 माइक्रोलीटर लागू करें। ऊपरी पलक एवर्ट करें और ग्रंथि के पालपेब्रल हिस्से को चिह्नित करने वाले प्रोट्यूबेंस तक पीछे के कक्षीय रिम पर कोमल मध्यीय दबाव लागू करें।
27 गेज सुई से लैस ठीक दांतेदार संदंश और एक ट्यूबरक्यूलिन सिरिंज का उपयोग करना, सीधे एक ट्रांसकोंक्टिवल दृष्टिकोण के माध्यम से ग्रंथि में प्रवेश करना जो सुई को ऊतक में दो मिलीमीटर आगे बढ़ाता है और इंजेक्शन के तुरंत बाद Concanavalin A या Con A.A.के 500 माइक्रोग्राम समाधान के 100 माइक्रोलीटर इंजेक्ट करता है, जो पीछे के तीक्ष्ण से फैलने के लिए कक्षीय बेहतर लैक्रिमल ग्रंथि का कारण बनता है। बंद घुमावदार संदंश का उपयोग करना, खोपड़ी में बोनी खोलने तक क्षेत्र को इंडेंट करें और सुई प्लेसमेंट के लिए मील का पत्थर के रूप में सेवा करने के लिए त्वचा में एक इंडेंटेशन छोड़ने के लिए संदंश के साथ और मामूली दबाव लागू करें। चीरा में एक चौथाई इंच के बारे में इंडेंटेशन निशान पर त्वचा के लिए एक 27 गेज सुई लंबवत से लैस एक ट्यूबरकुलिन सिरिंज डालें और इंजेक्शन साइट और बोनी कक्षीय रिम के बीच मध्य बिंदु के लिए लक्ष्य पार्श्व कैंथस की ओर पीछे और बाहरी रूप से सुई को पुनः निर्देशित करें।
एक बार सुई का हब पहुंच जाने के बाद, धीरे-धीरे आईएलजी इंजेक्शन के लिए कॉन ए के 1, 000 माइक्रोग्राम समाधान के 0.2 मिलीलीटर इंजेक्ट करें, कक्षा के निचले पूर्वकाल भाग के साथ आईएलजी की प्रमुखता का पता लगाने के लिए जानवर को देखें। त्वचा पर एक ऊर्ध्वाधर रेखा खींचने के लिए एक सर्जिकल मार्किंग पेन का उपयोग करें जहां आईएलजी ग्रंथि का सतही हिस्सा जाइगोमैटिक हड्डी पर अपने सतही विश्राम स्थल से कक्षा में अपने अधिक मध्यीय स्थान पर संक्रमण करता है। जाइगोमैटिक हड्डी के अंत की पहचान करने के लिए त्वचा पर लाइन के पार एक खड़ी आयोजित अल्ट्रासाउंड जांच झाडू।
आईएलजी संक्रमण तब होता है जहां ग्रंथि की छवि एक पहचानने योग्य मध्य सीमा के बिना एक परिसीमित हाइपरकोइक लाइन से एक में बदल जाती है। जब यह परिवर्तन देखा जाता है तो त्वचा पर खींची गई रेखा के लिए हैंडपीस की सापेक्ष स्थिति इंजेक्शन साइट होगी। एक बिंदु पर एक ग्रंथि में कांग्रेस एक जगह सिर्फ zygomatic चाप हड्डी के लिए मध्य ांक, zygomatic हड्डी हाइपरकोइक संकेत की गहराई के रूप में इंजेक्शन की वांछित गहराई सेट प्लस एक मिलीमीटर शूंय से सुई की ज्ञात लंबाई ।
शरीर के बाहर उजागर सुई की लंबाई गणना अंतर के बराबर होने तक धीरे-धीरे वापस लेने से पहले इंजेक्शन साइट पर ग्रंथि में सुई के बारे में 12 मिलीमीटर डालें। फिर 1, 000 माइक्रोग्राम कॉन ए सॉल्यूशन के 0.2 मिलीलीटर इंजेक्ट करें और अल्ट्रासाउंड द्वारा इंजेक्शन की सफलता की पुष्टि करें। आईएलजी को एक विशिष्ट हाइपरकोइक स्पेस प्रदर्शित करना चाहिए।
कॉन एक इंजेक्शन एक घने लिम्फोसाइटिक घुसपैठ की विशेषता वाले लैक्रिमल ग्रंथि में एक मजबूत भड़काऊ प्रतिक्रिया को प्रेरित करता है जो कम आंसू उत्पादन के साथ होता है। आंसू लैक्टोफेरिन के स्तर को दबा दिया जाता है जिसके परिणामस्वरूप एक समझौता कॉर्नियल और कंजक्टिव एपिथेलियम होता है और एक गुलाब बंगाल धुंधला हो जाता है। तीन कक्षीय एलजी ऊतकों के इंजेक्शन एक सुसंगत और एक समान सूखी नेत्र रोग राज्य पैदा करता है ।
कांग्रेस एक इंजेक्शन का एक सेट सूखी आंख रोग के बारे में एक सप्ताह तक चलने के नैदानिक मापदंडों के सभी के साथ 10 दिन से सामान्य पैदा करता है । अनुक्रमिक कांग्रेस एक इंजेक्शन के बारे में एक सप्ताह के अलावा सूखी आंखों की बीमारी की अवधि तदनुसार बढ़ा । इंजेक्शन के लगभग पांच सेट के बाद, सूखी नेत्र रोग राज्य अक्सर आगे इंजेक्शन की आवश्यकता के बिना स्थायी हो जाता है।
लैक्रिमल ग्रंथि संरचनाओं को इष्टतम स्थानीयकरण करना सबसे महत्वपूर्ण है। कपाल शरीर रचना विज्ञान के साथ परिचित और अल्ट्रासाउंड का उपयोग कर कौशल के साथ फर को हटाने सहित ठीक विस्तार करने के लिए ध्यान सभी परिणामों में सुधार । चूंकि इस सीधी तकनीक के लिए शार्प्स के उपयोग की आवश्यकता होती है, इसलिए सुई छड़ी चोटों को रोकने के लिए जांच को उचित सावधानी बरतनी चाहिए।
यह लेख कक्षीय लैक्रिमल ग्रंथि प्रणाली के सभी भागों में कॉन्सेवलिन ए इंजेक्शन द्वारा खरगोशों में तीव्र या पुरानी शुष्क नेत्र रोग को प्रेरित करने के लिए एक विधि के विकास का वर्णन करता है। यह विधि, पहले से रिपोर्ट किए गए लोगों से बेहतर है, औषधीय एजेंटों के अध्ययन के लिए उपयुक्त सूखी आंखों का एक प्रजनन योग्य, स्थिर मॉडल उत्पन्न करती है।
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Honkanen, R. A., Huang, L., Rigas, B. A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies. J. Vis. Exp. (155), e59631, doi:10.3791/59631 (2020).
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