نموذج الفئران قبل السريرية لدراسة نقص التروية-ضخ الاصابه في جراحه المجهرية الترميمية

إصابة الإقفارية-reperfusion هو السبب الرئيسي لفشل رفرف في الجراحة المجهرية الترميمية. يصف هذا الفيديو نموذج حيواني قبل السريرية لدراسة هذا الفيزيولوجيا المرضية. قد يسمح هذا النموذج الحر لرفرف الجلد استنادًا إلى الأوعية الظاهرية النسيجية السطحية في الجرذ بتقييم العلاجات والمركبات المختلفة لمواجهة الأضرار المتعلقة بإصابات الإقفار.

إعادة البناء المجهرية مثالية لمجموعة واسعة من العيوب. ومع ذلك، فإن هذه الإجراءات تضمن فترة إلزامية من نقص التروية تليها إعادة ضخ. وعادة ما تكون هذه الفترة جيدة التحمل، ويتجاوز معدل نجاح الإجراءات الجراحية الدقيقة 90٪، ومع ذلك، يمكن أن تكون آمنة تماما 73.7٪ فقط من اللوحات التي تتطلب مراجعة جراحية.

وبالإضافة إلى ذلك، في حالات إعادة زراعة إصابات الاصبع، ومعدل النجاح حوالي 60٪، وفي حالات إعادة زرع الأنسجة المركبة، والمعاناة من إصابات الإرداد زيادة النسب المئوية لإسقاط إصابة الإصابة منذ أن ينشط الإصابة المناعة الفطرية. ولذلك ، فإن دراسة هذه الظاهرة الفسيولوجية المرضية هي موضع اهتمام. لبدء هذا الإجراء، استخدم علامة جراحية لرسم رفرف طوله ثلاثة سنتيمترات في ستة سنتيمترات، مع التأكد من أن أحد جوانب الستة سنتيمترات يطابق خط البطن المتوسط.

بعد ذلك، قم بعمل شق جلدي ستة سنتيمترات عند خط الوسط في البطن، وشقين عموديين ثلاثة سنتيمترات، بالإضافة إلى واحد من ستة سنتيمترات موازية للشق الأول. للبدء في تشريح رفرف الجلد المعين ، استخدم المقص والملقط Adson لرفع رفرف. سحب بلطف رفرف من منطقة الجمجمة نحو منطقة الكودال.

تشريح pedicle رفرف دون لمسه أو عن طريق استيعاب adventitia أقل قدر ممكن لتجنب إتلاف جدار السفينة. استخدام 8-0 خياطة النايلون لocclude بواسطة الأربطة والأوعية السفح ، والأوعية الفخذية المحيطة الجانبي ، والأوعية الفخذية السدية القريبة. المشبك في pedicle الأوعية الدموية ومن ثم قطع عليه لبدء فترة نقص التروية ثماني ساعات.

استخدام محلول ملحي heparinized لثقب رفرف، ثم إزالة الدم الراكد من دوران الدقيقة. استخدام 10-0 خياطة النايلون لإجراء أنسوميوز الجراحية الدقيقة. بعد ثماني ساعات من نقص التروية ، قم بإعادة حقن الرفرف عن طريق إزالة المشابك الأوعية الدموية الدقيقة ، والتحقق من ال patcular الأوعية الدموية.

أولاً، تقييم تدفق الدم باستخدام مقياس تدفق الموجات فوق الصوتية في وقت العبور والمسبارات الجراحية الدقيقة. ضع الوعاء المستهدف في نافذة الاستشعار بالموجات فوق الصوتية لمسبار التدفق لتحديد حجم التدفق. عندما يتحقق اقتران جيد ويتم وضع السفينة في النافذة الصوتية دون أي توتر، انقر على زر السجل على الشاشة لتخزين البيانات.

بعد ذلك، استخدم 4-0 خياطة قابلة للامتصاص لإغلاق الجلد. لتقييم دوران الأوعية الدقيقة للرفرف، استخدم تحليل تباين البقع الليزرية. جعل تسجيل جديد لكل عينة ولكل دراسة متابعة عن طريق النقر على ملف، تسجيل جديد.

سيتم فتح نافذة جديدة تعرض لوحة الإعداد. هنا، قم بتحرير المعلومات الخاصة باسم المشروع والموضوع والمشغل واسم التسجيل. ضبط مسافة العمل عن طريق تحريك الليزر فيما يتعلق الأنسجة.

تكبير رئيس الليزر أو التصغير نحو الأنسجة ذات الاهتمام. في إعداد الصورة، قم بتوحيد منطقة القياس عن طريق إدخال العرض والارتفاع المطلوبين. تعيين كثافة النقطة إلى عالية.

في إعداد التقاط الصورة، حدد معدل الإطار ومدة التسجيل. ثم انقر فوق الزر سجل لبدء التسجيل. يتم استبدال لوحة الإعداد من قبل لوحة التسجيل ويتم حفظ البيانات تلقائياً.

أخذ لقطات أثناء الإجراء لتمكين مزيد من المقارنة. بعد ذلك ، استخدم برنامج ImageJ لقياس مناطق البقاء على قيد الحياة ونخر عن طريق وضع مسطرة أولاً في موقع رفرف وأخذ صور التحكم للقياس العياني. في مربع الأدوات ImageJ، حدد خط مستقيم وارسم خطًا يزيد عن سنتيمتر واحد من المسطرة.

انقر على تحليل، تعيين مقياس، وفي مربع النص لمسافة معروفة، أدخل قيمة سنتيمتر واحد. انقر على أداة تحديد المضلع ورسم خطوط المضلع فوق رفرف لحساب المنطقة قابلة للحياة. انقر على تحليل ، وقياس للحصول على قيمة المنطقة.

ثم، ضع صلصة ما بعد الجراحة على الحيوان قبل السكن لمنع تشويه الذات. بعد سبعة أيام من الجراحة، تصوير المنطقة الجراحية لتمكين القياسات العيانية للمناطق البقاء على قيد الحياة ونخر. باستخدام تقنية تحليل تباين البقع الليزرية التي سبق وصفها، تصور الاختلافات في التسريب كميًا وتقييمها لتقييم دوران الأوعية الدقيقة للرفرف.

بعد التحليل العياني، وإزالة 4-0 الغرز، ورفع رفرف، واستخدام الموجات فوق الصوتية وقت العبور لإعادة تقييم تدفق الدم البطين الأوعية الدموية. إجراء أخذ عينات الأنسجة عن طريق تقسيم طولي رفرف إلى قسمين التي قياس 1.5 سنتيمتر في ستة سنتيمترات. مباشرة بعد إنشاء أنستوميوزات الجراحة الدقيقة، حصلنا على قيم تدفق الدم أعلى من الحد الأدنى من التدفقات الموصى بها في الأدب.

وهكذا، كانت جميع أنستوتوسات الجراحة المجهرية براءة اختراع بعد أسبوع واحد من الجراحة. مراقبة سوء الأداء المجهري لتدفق الدم أثناء الإهانة الإقفاري كان ممكناً مع تقنية تحليل تباين البقع الليزرية. وهذا يشمل فرط الضخ الفوري خلال reperfusion رفرف وperioperatively، والمناطق المختلفة مع أقل من القذف كان أعلى خطر نخر رفرف بعد الجراحة التي كانت في الواقع نخر بعد سبعة أيام من نهاية الدراسة.

منطقة البقاء على قيد الحياة رفرف بعد ثماني ساعات من نقص التروية و reperfusion لها في وقت لاحق كان حوالي 40٪ النتائج المنشورة سابقا تظهر اختلافات ذات دلالة إحصائية عندما يتم مقارنة هذا النموذج مع اللوحات حيث لا يتم إلحاق أي إهانة إقفاري. تذكر أن تشريح pedicle رفرف دون لمسه أو عن طريق استيعاب adventitia أقل قدر ممكن لتجنب إتلاف جدار السفينة، وكذلك تنفيذ أوعية جراحية مجهرية مناسبة من أجل تجنب المضاعفات الناجمة عن تقنية جراحية. خلال العملية، تسمح لنا تقنية الموجات فوق الصوتية في وقت العبور بتحديد كمية تدفق الدم من أنستوموزات الجراحة المجهرية وبالتالي التنبؤ بالتدفق.

بعد الجراحة، تحليل تباين بقع الليزر يسمح شبه استمرارية رسم الخرائط في الوقت الحقيقي من تدفق داخل اللوحات الحرة. وهي تقنية واعدة، ولكن هناك حاجة إلى مزيد من البحث. وقد وصف هذا الفيديو بروتوكول نموذج مناسب لتقييم العوامل العلاجية لمواجهة إصابة نقص التروية- reperfusion في مجال الجراحة المجهرية الترميمية.