Quantificazione del DNA circolante specifico del maiale nel sangue di un modello di xenotrapianto

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22 settembre 2020

10.3791/61579-v

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Yangyang Deng^*¹^,² , Ming Zhou^*¹^,³ , Ying Lu¹ , Jiao Chen¹ , Zuhui Pu⁴ , Dongjing Yu¹^,⁵ , Yifan Dai⁶ , Yongqiang Zhan⁷ , Lisha Mou¹

¹Shenzhen Xenotransplantation Medical Engineering Research and Development Center, Institute of Translational Medicine, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital, ²Xianning Hospital of Traditional Chinese Medicine, ³Liver-biotechnology (Shenzhen) Co., Ltd., ⁴Department of Radiology, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital, ⁵Department of Life Sciences, University of Toronto, ⁶Jiangsu Key Laboratory of Xenotransplantation, Nanjing Medical University, ⁷Department of Hepatopancreatobiliary Surgery, Shenzhen University Health Science Center, Shenzhen University School of Medicine, First Affiliated Hospital of Shenzhen University, Shenzhen Second People's Hospital

^* These authors contributed equally

In questo protocollo sono stati progettati primer specifici suiini, sono stati costruiti frammenti di DNA specifici contenenti plasmidi e sono state stabilite curve standard per la quantificazione. Utilizzando primer specifici per specie, cpsDNA è stato quantificato da qPCR in modelli di trapianto di cellule da maiale a topo e modelli di trapianto di patch per arteria da maiale a scimmia.

Esplora altri video

quantificazione mediante qPCR

processamento di campioni di sangue

elettroforesi su gel di agarosio

preparazione della curva standard

primer specie specifici

monitoraggio del rigetto immunitario

kit di estrazione del DNA

Chapters in this video

0:04

Introduction

0:52

Isolating Genomic DNA

2:20

Verification of Primer Specificity

3:42

Standard Curve of cpsDNA

4:45

Quantitation of Circulating Pig-specific DNA

5:55

Results: PCR Validation of Porcine Specific Primers

6:51

Conclusion

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