Medicine
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Hjerterespons på β-adrenergisk stimulation bestemt af trykvolumen loop analyse
Chapters
Summary May 19th, 2021
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Her beskriver vi en hjertetryksvolumen loop analyse under stigende doser af intravenøst infunderes isoproterenol at bestemme den iboende hjertefunktion og β-adrenergic reserve i mus. Vi bruger en modificeret åben brysttilgang til trykvolumensløjfemålingerne, hvor vi inkluderer ventilation med positivt endeudløbstryk.
Transcript
Vores åbne bryst tilgang, hvor vi inkluderer ventilation med positivt endeudløbstryk, er signifikant til at vurdere og analysere hjertefunktion in vivo, og stigningen i beta-adrenergic stimulation. Proceduren kan bruges til at behandle både baseline parametre for belastning-uafhængig hjertefunktion, og beta-adrenergic reserve i genetisk modificerede mus eller ved interventioner. Efter at have bekræftet manglende reaktion på pedalrefleks, desinficere venstre bagside af bedøvet mus med 70% ethanol og foretage et snit for at udsætte venstre låråre.
Blast epigastriske arterie og vene med en cautery. For bedre at se lårbenet vene, synsfeltet er spændt af en sutur gennem maven. Derefter placeres en sutur distal til kateteret adgang, for at ligate lårbenet vene.
Pass en sutur under lårbenet vene, og forberede en knude kranie til punkteringsstedet. Punktere lårbenet vene med en forberedt mikro rør fastgjort til en 1-milliliter sprøjte og fastgør røret inde i fartøjet med den knyttede sutur. For at modvirke væsketab skal du bruge en automatisk sprøjtepumpe til at indgyde 0,9% natriumchlorid, suppleret med 12,5% albumin, ved en 15 mikroliter infusionshastighed og fugte det eksponerede væv med forvarmet 0,9% natriumchlorid.
For at få adgang til brystkassen skal du skylle brystkassen med 70% ethanol og indslide huden lige under xiphoidprocessen. Rent ud adskille brystmuskler fra brystvæggen, og bruge sammenkædninger til at løfte xiphoid proces for at tillade brystvæggen, der skal skæres, indtil mellemgulvet er fuldt synlig. Incise mellemgulvet nedefra for at eksponere hjerte apex, og bruge sammenkædninger til forsigtigt at fjerne perikardium.
Udfør en begrænset costotomi i venstre side, og passere en sutur under ringere kaval vene at tillade downstream preload reduktion. Brug en 25 gauge kanyle, forsigtigt punktere hjerte spids, og erstatte kanylen med et tryk-volumen kateter, indtil alle elektroder er inden for ventrikel. Derefter justeres kateterets position forsigtigt, indtil rektangulære formede sløjfer opnås.
For at opnå trykvolumen loop målinger, udføre en online analyse af hjertefunktion parametre af interesse, og vente, indtil en steady-state hjertefunktion er opnået. Stop åndedrætsværnet ved endeudløbspositionen, og registrer basisparametrene. Efter 3 til 5 sekunder skal du bruge sammenkædninger til at løfte suturen under den ringere kavalåre for at opnå forbelastningsrelaterede parametre og tænde for ventilatoren.
Vent mindst 30 sekunder på den anden okklusion, indtil de hæmodynamiske parametre er stabiliseret. Når målingen er opnået under basale forhold, monteres en isoproterenolbelastet sprøjte på sprøjtepumpen. Vent mindst to minutter, indtil en ny steady-state hjertefunktion er observeret.
Før du stopper åndedrætsværnet ved ende-udløbspositionen, og baselineparametrene registreres. Efter 3 til 5 sekunder løftes suturen under den ringere kaval vene for at opnå preload uafhængige parametre og vent mindst 30 sekunder på den anden okklusion. Monter derefter sprøjten, der indeholder den næste isoproterenolkoncentration, og gentag basislinjen og forudindlæs uafhængige parametre optagelser.
For at udføre en parallelledningskalibrering skal du efter den sidste isoproterenoldosisresponsmåling forbinde en sprøjte fyldt med 15% natriumchloridopløsningen til lårbenstelen og forsigtigt indgyde 5 mikrolitere af hypertonisk opløsning, indtil trykvolumensløjfen forskydes lidt til højre. Vent, indtil sløjferne vender tilbage til steady-state, før du stopper åndedrætsværnet ved udgangen af udløb, og straks injicere en 10 mikroliter bolus på 15% natriumchlorid. Kontroller derefter, om trykvolumensløjfen stort set er blevet udvidet og flyttet til højre.
For at udføre et lednings-til-volumen-forhold skal du vente 5 minutter, indtil den hypertoniske saltvands bolus er helt fortyndet, før kateteret fjernes, og ved hjælp af en 1 milliliter sprøjte, der er udstyret med en 21 gauge kanyle for at fjerne mindst 600 mikroliter blod fra venstre ventrikel af det bankende hjerte. Overfør derefter blodet til et forvarmet kalibreringslabuvette i et 37-graders vandbad med cylindre af kendt volumen, og læg trykvolumenkatetret centralt i hver cylinder for at tillade optagelse af ledningsføringen. Ved hjælp af denne åbne brysttryk-volumen-loop målemetode, hvis kateteret er korrekt placeret i ventrikel, en fuld hjertecyklus vil blive repræsenteret ved en rektangulær-formet tryk-volumen-loop.
Som illustreret begynder systole med en fase af isovolumetric sammentrækning, hvor begge hjerteklapper er lukket. Når ventrikulært tryk, overstiger aortatrykket, åbner aortaklappen, og blodet pumpes ind i aortaen under udslyngningsfasen. Efterfølgende, når aortatrykket overstiger ventrikulært tryk, lukker aortaklappen, og diastole begynder.
Under isovolumetric afslapning, ventrikulært tryk falder, indtil atrietrykket overstiger ventrikulært tryk, og mitralventilen åbner. Passiv diastolisk påfyldning, karakteriseret ved det end-diastoliske trykvolumenforhold, finder derefter sted, indtil den næste hjertecyklus begynder. Da det er i stand til at bestemme hjertefunktion uafhængigt af preload, kan trykvolumenanalyse give detaljeret indsigt i hjertefunktion i hjertekontraktilitet.
For eksempel fremkaldte isoproterenol i denne analyse en signifikant effekt på hver målt hjertefunktion og hjertekontraktilitetsparameter. I modsætning hertil blev der observeret en reduktion i de diastoliske parametre som reaktion på stigende isoproterenolkoncentrationer. Præcis kateter placering i venstre ventrikel, er afgørende for at opnå reproducerbare sløjfer uden artefakter.
For at optimere kateteret placering, foretrækker vi den åbne bryst tilgang. Efter PV loop målinger, allometrisk endlyse kan bestemmes, og væv kan isoleres, at identificere molekylære og histopatologiske ændringer, forårsaget af behandlinger, og eller genetiske modifikationer. Denne teknik baner vejen for at analysere beta-adrenergic reserve i musemodeller under normale og patologiske forhold og kan bruges som skabelon til test af andre stimuli.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
