Het gebruik van een Murine Model van Psychosociale Stress tijdens de Zwangerschap als een Translationeel Relevant Paradigma voor Psychiatrische Stoornissen bij Moeders en Zuigelingen

Ons protocol is belangrijk omdat het een nieuw paradigma vertegenwoordigt voor het evalueren van de effecten van chronische stress, met name psychosociale stress, op zwangerschapsuitkomsten. In dit protocol stellen we zwangere muizen op een onvoorspelbare manier bloot aan verschillende psychosociale beledigingen van verschillende intensiteiten. Eerdere diermodelparadigma’s gebruikten fysieke stressoren of een beperkt aantal stressoren die herhaaldelijk werden toegediend, wat niet de ervaring van vrouwen tijdens de zwangerschap weerspiegelt.

Ons chronische psychosociale stressmodel overwint deze beperkingen. Deze methode heeft brede gevolgen voor verschillende onderzoeksgebieden, waaronder geestelijke gezondheid van moeders en negatief onderzoek naar de ontwikkeling van zuigelingen, en meer in het algemeen, voor het begrijpen van de ontwikkelingsoorsprong van volwassen ziekten door ongunstige intra-uteriene voorvallen. Voordat u elke stressor in het CGS-paradigma start, brengt u de CGS-groepsmuizen uit de behuizingsruimte naar de ruimte die is aangewezen voor CGS.

Stel de muizen bloot aan verschillende stressoren na een 11-daags stressorregime dat loopt van zwangerschapsdag 6,5 tot 17,5. Om de muizen bloot te stellen aan vreemde voorwerpen, verdeel je willekeurig zes knikkers of zes Legos van verschillende vormen in een schone statische kooi met muisbedden zonder de muizennesten. Plaats alle muizen uit één thuiskooi twee uur in de statische kooi met vreemde voorwerpen en breng de muizen vervolgens terug naar hun thuiskooi.

Om de muizen bloot te stellen aan roofdiergeur, plaatst u een centimeter dik vuil strooisel van vrouwelijke ratten in een schone statische kooi zonder muizenbedden of nestjes. Plaats alle muizen uit één thuiskooi twee uur in de statische kooi met vuil rattenbedden en breng de muizen vervolgens terug naar hun thuiskooi. Om de muizen bloot te stellen aan een kooikanteling, plaatst u alle muizen uit één thuiskooi in een schone statische kooi met muisbedden zonder de muizennesten.

Houd de kooi twee uur lang schuin tegen de muur en breng de muizen vervolgens terug naar hun thuiskooi. Om de muizen bloot te stellen aan frequente perkbeurten, plaatst u alle muizen uit één thuiskooi in een schone statische kooi met muizenbedden zonder de muizennesten. Verplaats de muizen elke 10 minuten voorzichtig naar een andere schone kooi en vervang het muizenbed.

Breng de muizen na twee uur terug naar hun thuiskooi. Om de muizen bloot te stellen aan het verwijderen van beddengoed, plaatst u alle muizen uit één thuiskooi twee uur lang in een lege, schone statische kooi zonder muizenbedden of nestjes en keert u de muizen vervolgens terug naar hun thuiskooi. Om de muizen bloot te stellen aan beweging op een shaker, plaatst u alle muizen uit één thuiskooi in een schone statische kooi met muizenbedden zonder de muizennesten.

Plaats de statische kooi bovenop een wederkerige laboratorium shaker ingesteld op 140 slagen per minuut gedurende twee uur en breng de muizen vervolgens terug naar hun thuiskooi. Om de muizen ‘s nachts aan lichten bloot te stellen, plaatst u alle muizen uit één thuiskooi in een schone statische kooi met muizenbedden zonder de muizennesten. Houd de lichten ‘s nachts aan om de donkere cyclus te verstoren.

Breng de muizen de volgende dag terug naar hun thuiskooi. Om een muis bloot te stellen aan nieuwe kooigenoten, breng je de muis over in een schone statische kooi met muisbedden met twee onbekende vrouwelijke muizen. Laat de muis ‘s nachts in de statische kooi met de onbekende kooigenoten.

Op de volgende dag keerde de muis terug naar zijn thuiskooi met bekende kooigenoten. Om de muizen bloot te stellen aan nat strooisel, verzadigt u het muizenbed in een statische kooi met schoon water dat op 24 graden Celsius wordt gehouden. Plaats alle muizen uit één thuiskooi ‘s nachts in de statische kooi met nat beddengoed.

Breng de muizen de volgende dag terug naar hun thuiskooi. Nadat het stressorregime op zwangerschapsdag 17.5 is voltooid, moeten alle experimentele muizen zich voorbereiden op parturition en downstream functionele beoordelingen. Het blootstellen van zwangere vrouwelijke muizen aan CGS veroorzaakt veranderingen in chronische stressrelevante parameters, zoals vermindering van de gewichtstoename tijdens de zwangerschap en verhoogde bijniergewichten in de vroege postpartumperiode.

Belangrijk is dat CGS-moeders postpartumafwijkingen en maternale neuro-endocriene functie vertonen, zoals blijkt uit verhoogde serumcorticosteronspiegels na een nieuwe acute belediging. Bovendien vertonen CGS-moederdammen veranderingen in de moederzorg, zoals blijkt uit een toename van de mate van fragmentatie van maternale signalen die door de pups worden ontvangen. De gemiddelde duur van likken / verzorgen periodes wordt verminderd, terwijl het gemiddelde aantal periodes is verhoogd, wat wijst op tal van korte episodes van verzorgend gedrag.

Sucrose-voorkeur is ook depressief bij CGS-dammen in vergelijking met controledammen, wat wijst op de aanwezigheid van anhedonia. Ten slotte vertonen de CGS-dammen ook verhoogd angstgerelateerd gedrag, gemeten door een vermindering van de tijd die in de open kwadranten van de EZM wordt doorgebracht in vergelijking met controledammen. Bij de nakomelingen resulteert blootstelling aan CGS in de baarmoeder in een verminderde gewichtstoename tijdens de postnatale periode van postnatale dag 7 tot 21, hoewel er bij de geboorte geen verschillen zijn.

Deze vermindering van de gewichtstoename is aanwezig bij nakomelingen van beide geslachten. Bij het proberen van deze procedure, het opstellen van een schema voor het verkrijgen van getijde zwangerschappen en het consequent implementeren van de hele serie, zijn variabele onvoorspelbare psychosociale stressoren van cruciaal belang. Deze techniek kan helpen bij het beantwoorden van interessante vragen zoals kan psychosociale stress van moeders seksespecifieke effecten hebben op de placentafunctie of de ontwikkeling en het gedrag van nakomelingen?

En kunnen deze effecten worden omgekeerd of gewijzigd door farmacologische interventie of postnatale moederzorg?