2,977 Views
•
06:39 min
•
June 13, 2021
DOI:
הפרוטוקול שלנו הוא משמעותי כי הוא מייצג פרדיגמה חדשה להערכת ההשפעות של מתח כרוני, במיוחד מתח פסיכו-סוציאלי, על תוצאות ההריון. בפרוטוקול זה, אנו חושפים עכברים בהריון לעלבונות פסיכו-סוציאליים שונים בעוצמות שונות באופן בלתי צפוי. פרדיגמות קודמות של מודל בעלי חיים השתמשו בלחצים פיזיים או במספר מוגבל של גורמי לחץ המנוהלים באופן חוזר ונשנה, אשר אינו משקף את החוויה של נשים במהלך ההריון.
מודל הלחץ הפסיכו-סוציאלי הכרוני שלנו מתגבר על מגבלות אלה. לשיטה זו השלכות רחבות על תחומי מחקר שונים, לרבות בריאות הנפש האימהית ומחקרים שליליים הקשורים להתפתחות התינוק, ובאופן רחב יותר, להבנת המקורות ההתפתחותיים של מחלות מבוגרים באמצעות אירועים תוך רחמיים שליליים. לפני שתתחיל כל מגן לחץ בפרדיגמת CGS, הביאו את העכברים הקבוצתיים של CGS מחדר הדיור לחדר המיועד ל- CGS.
לחשוף את העכברים ללחצים שונים בעקבות משטר לחץ של 11 ימים פועל מיום ההריון 6.5 עד 17.5. כדי לחשוף את העכברים לחפצים זרים, חלקו באופן אקראי שש גולות או שש לגו של צורות שונות לכלוב סטטי נקי עם מצעים עכבר ללא קינון העכבר. מניחים את כל העכברים מכלוב ביתי אחד בכלוב הסטטי עם חפצים זרים במשך שעתיים, ואז מחזירים את העכברים לכלוב הביתי שלהם.
כדי לחשוף את העכברים לריח טורף, הניחו מצעים מלוכלכים בעובי סנטימטר אחד מחולדות נקבות לכלוב סטטי נקי ללא מצעים או קנטנים של עכברים. מניחים את כל העכברים מכלוב ביתי אחד בכלוב הסטטי עם מצעים מלוכלכים במשך שעתיים, ואז מחזירים את העכברים לכלוב הביתי שלהם. כדי לחשוף את העכברים להטיית כלוב, הנח את כל העכברים מכלוב ביתי אחד לכלוב סטטי ונקי עם מצעים לעכברים ללא קנקנים של העכברים.
שמור את הכלוב מוטה בזווית של 30 מעלות על הקיר במשך שעתיים, ואז להחזיר את העכברים לכלוב הבית שלהם. כדי לחשוף את העכברים לשינויי מצעים תכופים, הנח את כל העכברים מכלוב ביתי אחד לכלוב סטטי ונקי עם מצעים לעכברים ללא קנקנים של העכברים. כל 10 דקות, בעדינות להעביר את העכברים לכלוב נקי אחר ולהחליף את מצעים העכבר.
אחרי שעתיים, החזירו את העכברים לכלוב הביתי שלהם. כדי לחשוף את העכברים להסרת מצעים, הניחו את כל העכברים מכלוב ביתי אחד לכלוב ריק ונקי ללא מצעים או קננים של עכברים במשך שעתיים, ואז החזירו את העכברים לכלוב הביתי שלהם. כדי לחשוף את העכברים לתנועה על שייקר, מניחים את כל העכברים מכלוב ביתי אחד לכלוב סטטי ונקי עם מצעים לעכברים ללא קנקנים של העכברים.
מניחים את הכלוב הסטטי על גבי שייקר מעבדה הדדי להגדיר 140 משיכות לדקה במשך שעתיים, ולאחר מכן להחזיר את העכברים לכלוב הבית שלהם. כדי לחשוף את העכברים לאורות לילה, הניחו את כל העכברים מכלוב ביתי אחד לכלוב סטטי ונקי עם מצעים לעכברים ללא קנקנים של העכברים. שמור את האורות דולקים בלילה כדי להפריע למחזור הכהה.
למחרת, החזירו את העכברים לכלוב הביתי שלהם. כדי לחשוף עכבר לחברים חדשים בכלוב, העבר את העכבר לכלוב סטטי ונקי עם מצעים לעכבר המכילים שני עכברים נקבות לא מוכרות. השאר את העכבר בכלוב הסטטי עם החברים הכלוב הלא מוכרים בן לילה.
למחרת, החזיר את העכבר לכלוב הביתי שלו עם חברים מוכרים לכלוב. כדי לחשוף את העכברים למצעים רטובים, הרווה את מצעים העכבר בכלוב סטטי עם מים נקיים נשמר ב 24 מעלות צלזיוס. מניחים את כל העכברים מכלוב ביתי אחד לתוך הכלוב הסטטי עם מצעים רטובים למשך הלילה.
למחרת, החזירו את העכברים לכלוב הביתי שלהם. לאחר משטר הלחץ הושלם ביום ההריון 17.5, בית יחיד כל העכברים הניסיוניים להתכונן parturition והערכות פונקציונליות במורד הזרם. חשיפת עכברים נשיים בהריון ל- CGS גורמת לשינויים בפרמטרים רלוונטיים ללחץ כרוני, כגון ירידה במשקל הגוף במהלך ההריון ומשקולות בלוטת יותרת הכליה מוגברת בתקופה המוקדמת שלאחר הלידה.
חשוב לציין, סכרי CGS מציגים חריגות לאחר הלידה ותפקוד נוירואנדוקריני אימהי כפי שמעידים רמות קורטיקוסטרון בסרום מוגברות בעקבות עלבון חריף חדשני. יתר על כן, סכרי CGS מציגים שינויים בטיפול האימהי כפי שהם משתקפים על ידי עלייה במידת הפיצול של אותות אימהיים שהתקבלו על ידי הגורים. משך הזמן הממוצע של התקפי ליקוק/טיפוח מצטמצם בעוד המספר הממוצע של התקפים גדל, מה שמצביע על פרקים קצרים רבים של התנהגות מטפחת.
העדפת סוכרוז מדוכאת גם בסכרי CGS בהשוואה לסכרי בקרה, דבר המצביע על נוכחות של אנהדוניה. לבסוף, סכרי CGS מציגים גם התנהגויות מוגברות הקשורות לחרדה כפי שנמדדו על ידי ירידה בזמן שהוקדש לרבעים הפתוחים של EZM בהשוואה לסכרי בקרה. אצל הצאצאים, חשיפה CGS ברחם גורמת לירידה במשקל במהלך התקופה שלאחר הלידה מיום לאחר הלידה 7 עד 21, אם כי אין הבדלים בלידה.
ירידה זו במשקל הגוף נוכחת בצאצאים של שני המינים. בעת ניסיון הליך זה, קביעת לוח זמנים להשגת הריונות מתוזמן ויישום עקבי של הסדרה כולה, גורמי לחץ פסיכו-סוציאליים משתנים ובלתי צפויים הם קריטיים. טכניקה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מעניינות כגון האם מתח פסיכו-סוציאלי אימהי יכול לגרום להשפעות ספציפיות למין על תפקוד השליה או התפתחות המוח של הצאצאים והתנהגות?
והאם ניתן להפוך או לשנות תופעות אלה על ידי התערבות פרמקולוגית או טיפול אימהי לאחר הלידה?
פרדיגמת הלחץ הפסיכו-סוציאלי הכרוני (CGS) מעסיקה גורמי לחץ רלוונטיים מבחינה קלינית במהלך ההריון בעכברים כדי לדגמן הפרעות פסיכיאטריות של אמהות ותינוקות. כאן, אנו מספקים הליך שלב אחר שלב של החלת פרדיגמת CGS והערכות במורד הזרם כדי לאמת מודל זה.
07:30
Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents
Related Videos
24677 Views
06:55
An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents
Related Videos
22357 Views
05:28
A Chronic Immobilization Stress Protocol for Inducing Depression-Like Behavior in Mice
Related Videos
21908 Views
07:13
Induction of Maternal Immune Activation in Mice at Mid-gestation Stage with Viral Mimic Poly(I:C)
Related Videos
18202 Views
06:44
Analysis of Electrocardiograms and Behavior in Mice from Pregnancy to Lactation Period
Related Videos
388 Views
07:06
Chronic Social Defeat Stress in Early Adolescent Male Mice
Related Videos
328 Views
09:49
Assessment of Perigenital Sensitivity and Prostatic Mast Cell Activation in a Mouse Model of Neonatal Maternal Separation
Related Videos
9237 Views
09:09
Generating a Reproducible Model of Mid-Gestational Maternal Immune Activation using Poly(I:C) to Study Susceptibility and Resilience in Offspring
Related Videos
1527 Views
04:20
Social Isolation Model: A Noninvasive Rodent Model of Stress and Anxiety
Related Videos
4078 Views
04:20
Limited Bedding and Nesting as a Model for Early-Life Adversity in Mice
Related Videos
1310 Views
Read Article
Cite this Article
Zoubovsky, S. P., Wilder, A., Muglia, L. Using a Murine Model of Psychosocial Stress in Pregnancy as a Translationally Relevant Paradigm for Psychiatric Disorders in Mothers and Infants. J. Vis. Exp. (172), e62464, doi:10.3791/62464 (2021).
Copy