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Biochemistry

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Un test cellulare basato su reporter per il monitoraggio dell'efficienza di giunzione
 
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Un test cellulare basato su reporter per il monitoraggio dell'efficienza di giunzione

Article DOI: 10.3791/63014-v 08:53 min September 15th, 2021
September 15th, 2021

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Questo protocollo descrive un minigene reporter assay per monitorare l'impatto delle mutazioni del sito di giunzione 5'-splicing sullo splicing e sviluppa snRNA U1 soppressore per il salvataggio dell'inibizione dello splicing indotta da mutazioni. I costrutti di snRNA U1 reporter e soppressore sono espressi in cellule HeLa e lo splicing viene analizzato mediante estensione di primer o RT-PCR.

Tags

Biochimica Interazione RNA-proteina splicing pre-mRNA spliceosoma U1 snRNP introne esone sito di giunzione Dup51p reporter eson skipping
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