Name: Mesure continue à long terme du débit sanguin rénal chez les rats conscients (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 9 s
Description: Apprenez à mesurer le débit sanguin rénal chez des rats conscients sur le long terme. Cette méthode chronique permet d'étudier la relation entre hypertension et flux rénal en environnement naturel.

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Cette étude a été financée par des subventions pour la recherche scientifique (P01 HL116264, RO1 HL137748). Les auteurs tiennent à remercier Theresa Kurth pour ses conseils et son aide dans le maintien de l’environnement expérimental en tant que gestionnaire du laboratoire.

Le protocole est approuvé par le Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Des rats sensibles au sel Dahl (mâles et femelles), âgés de ~8 semaines, 200-350 g, ont été utilisés pour les expériences.
1. Préparation des animaux
<ol><li>Installez un système de cage de réponse au mouvement pour le rat, un module de flux périvasculaire, une pompe à seringue, un appareil d’enregistrement et un logiciel (voir le tableau des matériaux) dans la salle animalière.</li>
	<li>Placez les rats dans la cage pour se familiariser avec l’environnement, la nourriture et le système d’eau au moins la semaine précédant la chirurgie. Jeûnez les rats de la veille de la chirurgie, car une teneur élevée de l’estomac peut interférer avec le placement de la sonde d’écoulement dans l’artère rénale gauche et peut provoquer une aspiration trachéale.</li>
	<li>Connectez un tube en polyuréthane de 5 cm (diamètre intérieur 0,30 mm et diamètre extérieur 0,64 mm) à l’extrémité du tube en polyuréthane de 90 cm (diamètre intérieur 0,64 mm et diamètre extérieur 1,02 mm) avec du ciment PVC pour fabriquer un cathéter artériel fémoral (voir le tableau des matériaux).<ol><li>Stérilisez les cathéters avec un stérilisateur à l’oxyde d’éthylène, la sonde de débit avec 2,5% de glutaraldéhyde et les instruments chirurgicaux dans un autoclave à vapeur. Essuyez les tables chirurgicales, la microscopie et les lumières avec de l’hypochlorite de sodium à 1%.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Chirurgie
<ol><li>Placez la sonde RBF en suivant les étapes ci-dessous.<ol><li>Anesthésiez les rats avec 2,0% -2,5% d’isoflurane dans la mesure où les rats ne répondent pas au stimulus de la douleur. Placez-le sur la table chirurgicale réglée à 37 °C et injectez 0,09 mg/kg de buprénorphine SR et 15 mg/kg de céfazoline (voir tableau des matières) avant la chirurgie.</li>
		<li>Rasez tout l’abdomen avec une tondeuse électrique et une région sur la nuque autour de la 7ème vertèbre cervicale où le cathéter et le flux prouvent que les fils sortiront.</li>
		<li>Après le rasage, essuyez la zone avec 70% d’éthanol, 10% de povidone-iode, et à nouveau avec 70% d’éthanol.</li>
		<li>Placez le rat en position couchée. Faites une coupe de 1 cm à l’aide d’un scalpel sur la nuque et le flanc gauche. Ensuite, effectuez une dissection contondante avec une pince hémostatique et dégagez un espace sous-cutané de l’incision du flanc à l’arrière du cou.</li>
		<li>Faites passer la sonde d’écoulement à travers ce tunnel sous-cutané du cou à l’incision du flanc avec une pince hémostatique.</li>
		<li>Placez le rat en décubitus dorsal. Faites une incision abdominale médiane de 4-5 cm.</li>
		<li>Disséquez la zone autour de l’artère rénale à l’aide d’une pince à épiler incurvée pour exposer un espace suffisant pour placer la sonde d’écoulement (voir le tableau des matériaux). Ensuite, percez carrément le muscle quadratus lumborum gauche avec la pince hémostatique et tirez la tête de la sonde d’écoulement dans la cavité abdominale.</li>
		<li>Accrochez l’extrémité de la sonde d’écoulement à l’artère rénale gauche et connectez-la au débitmètre (voir le tableau des matériaux). Ajoutez un peu de gel autour de la pointe de la sonde et la valeur du débit apparaîtra sur le débitmètre. REMARQUE : Bien que cela dépende de la taille du rat, un débit d’environ 3 à 5 mL/min sera observé chez un rat de 230 g.</li>
		<li>Collez le treillis de fibres de polyester attaché à la sonde avec de l’adhésif tissulaire sur la paroi abdominale et maintenez-le jusqu’à ce qu’il soit sec et collé (~1-2 min). Une fois le flux en place, débranchez la sonde de débit du débitmètre et couvrez l’abdomen avec de la gaze imbibée de solution saline et passez à l’étape d’insertion du cathéter.</li>
	</ol></li>
	<li>Insérez le cathéter fémoral en suivant les étapes ci-dessous. REMARQUE: La méthode d’insertion d’un cathéter rempli de liquide est la même que les installations de télémétrie régulières. Bien que la télémétrie soit préférée, le cathéter artériel permet de surveiller la pression et le prélèvement sanguin menstruel du rat conscient.<ol><li>Tout d’abord, remplissez le cathéter avec une solution saline et serrez-le avec une pince vasculaire avant de faire une incision cutanée de 1 cm à l’aide d’un scalpel sur la cuisse gauche pour disséquer et exposer l’artère fémorale. Tout en bloquant l’écoulement du côté proximal de l’artère fémorale avec un fil, insérez le cathéter.</li>
		<li>Rincer avec une petite quantité de solution saline, boucher avec un fil en acier inoxydable de taille appropriée et attacher le cathéter avec un fil pour le fixer.</li>
		<li>Une fois la ligature attachée autour du cathéter, créez un tunnel sous-cutané en utilisant un trocart en acier inoxydable de la cuisse à l’arrière du cou pour amener le cathéter dans la région du cou. Fixez-le avec des sutures de soie 3-0 placées dans le muscle trapèze.</li>
	</ol></li>
	<li>Suturer la sonde.<ol><li>Tournez le rat en position couchée et cousez la boucle circulaire de la sonde d’écoulement par voie sous-cutanée sur le flanc. Suturer l’incision au niveau du flanc et du cou avec suture chirurgicale 4-0 (voir Tableau des matériaux).</li>
		<li>Attachez un bouton de peau à la sonde d’écoulement et suturez-la avec de la soie 3-0 à l’arrière du cou.</li>
		<li>Reconnectez la sonde de débit au débitmètre, retournez le rat en position dorsale pour vérifier le FBR et effectuez les derniers ajustements de la sonde de débit pour optimiser sa position sur l’artère rénale.</li>
		<li>Enfin, suturez le muscle avec de la soie 3-0 et la peau avec une suture chirurgicale 4-0.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Récupération de l’animal
<ol><li>Après une observation attentive, jusqu’à ce que les rats soient complètement rétablis de l’anesthésie, ramener les rats dans un système de cage de réponse au mouvement, connecter la sonde de débit au débitmètre sanguin et prévoir une période de récupération d’environ une semaine pour stabiliser la sonde et la mesure du débit. REMARQUE: L’enregistrement n’a pas besoin d’être effectué pendant cette période.</li>
	<li>Injecter une solution saline héparinée à 3 % en continu tout au long de l’étude à partir du cathéter artériel à raison de 100 μL/h pour prévenir la coagulation.</li>
	<li>Lorsque le débit se stabilise après 5-6 jours, réglez l’étalonnage du débitmètre pour mesurer le débit sanguin à 0-20 mL/min et commencez l’enregistrement continu du FBR.</li>
</ol>

<ol><li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChonchol%2C+M+%22Brenner+%26+Rector%27s+The+Kidney%22">Brenner & Rector's The Kidney</a>. 11, Elsevier Inc. Philadelphia, PA. (2019).</li>
<li>Chen, J. -K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li>
<li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li>
<li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li>
<li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li>
<li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states%5BTitle%5D)+AND+%22Urological+Research%22%5BJournal%5D)">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li>
<li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185(1994).</li>
<li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li>
<li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li>
<li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li>
<li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li>
<li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Antioxidants+%26+Redox+Signaling%22%5BJournal%5D)">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants & Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li>
<li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4D+flow+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Magnetic+Resonance+Imaging%22%5BJournal%5D)">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li>
<li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li>
<li>Juárez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li>
<li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li>
<li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li>
<li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li>
<li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li>
<li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li>
<li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li>
<li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthesia%2C+surgery+and+renal+function%3A+Immediate+and+delayed+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia+and+Intensive+Care%22%5BJournal%5D)">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li>
<li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthesia+and+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia+and+Intensive+Care%22%5BJournal%5D)">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li>
<li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728(2018).</li>
<li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li>
<li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Le présent protocole décrit une technique qui utilise des instruments disponibles dans le commerce pour enregistrer la FBR et la pression artérielle en continu pendant plusieurs semaines. De plus, l’urine peut être recueillie à l’aide du dispositif décrit à l’étape 1.1. Il peut également être utilisé pour évaluer les métabolites dans l’urine et, lorsqu’un cathéter artériel est implanté, le prélèvement de sang pour analyse.
Traditionnellement, les mesures de FBR ont été obtenues de manière aigu...

Les reins ne représentent que 0,5% du poids corporel mais sont riches en flux sanguin, recevant 20% à 25% du débit cardiaque total1. La régulation du débit sanguin rénal (FBR) est essentielle à la fonction rénale, aux fluides corporels et à l’homéostasie électrolytique. L’importance de la régulation du flux sanguin vers le rein est bien illustrée par l’augmentation substantielle de la FBR dans le rein restant après néphrectomie unilatérale 2,3,4 et par les réductions de FBR qui se produisent dans l’insuffisance rénale 5,6,7. Il a été difficile de déterminer si de tels changements dans le FBR se produisent en réponse à des altérations de la fonction rénale ou à une diminution de la fonction due à une réduction de la FBR chez des animaux ou des sujets humains anesthésiés préparés chirurgicalement. Des études temporelles sont nécessaires dans lesquelles les événements peuvent être déterminés avant et après un changement défini et observés chez le même animal au cours de la progression des événements. Dans les études animales et humaines, la FBR a été estimée indirectement par la clairance de l’acide para-amino hippurique (HAP)8,9,10 et, plus récemment, par des techniques d’imagerie telles que l’échographie9,11,12, l’IRM4,13 et la TEP-TDM 14,15 qui donnent des images instantanées utiles de chaque rein et qui peuvent suivre la progression de la maladie. Il est difficile d’évaluer la FBR chez les petits animaux par échographie ou IRM sans anesthésie. Il a été impossible de mesurer en continu la FBR dans des conditions conscientes chez le même rat sur des périodes prolongées.
Le présent protocole a donc mis au point des techniques permettant des mesures simultanées en continu 24 heures sur 24 de la FBR, qui ont été combinées à des méthodes de mesure continue de la pression artérielle pour les rats en mouvement libre, comme décrit précédemment 16,17,18,19,20,21 . Cette technologie permet l’évaluation temporelle de la FBR dans divers modèles de rats afin d’étudier les relations de cause à effet dans divers troubles rénaux à l’avenir.

<table><tbody><tr><td>Sonde 1RB Sonde</td><td>à ultrasons</td><td>Transsonique</td><td>1RB</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Avrio Health</td><td></td><td>povidone-iode</td></tr><tr><td>Buprénorphine SR-LAB</td><td>ZooPharm</td><td></td><td>Buprénorphine</td></tr><tr><td>Cefazolin</td><td>APOTEX</td><td>NDC 60505</td><td>Cefazolin</td></tr><tr><td>Crile Hemostats</td><td>Instruments chirurgicaux fins</td><td>13004-14</td><td>Hémostatiques pour dissection contondante</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal</td><td>NDC 66794</td><td>Isoflurane</td></tr><tr><td>Medium Ciment PVC transparent</td><td>Oatey</td><td></td><td>Ciment PVC</td></tr><tr><td>Mersilene Maille en fibre de polyester Ethicon</td><td></td><td></td><td>Maille en fibre de polyester</td></tr><tr><td>MetriCide28</td><td>Metrex</td><td>SKU 10-2805</td><td>2.5 % glutaraldéhyde</td></tr><tr><td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td><td>Braintree Scientific</td><td>MRE 025</td><td>à utiliser pour cathéter</td></tr><tr><td>MINI HYPE-WIPE</td><td>Current Technologies</td><td>#9803</td><td>Hypochlorite de sodium à 1 %</td></tr><tr><td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td><td>Oatey</td><td>#31018</td><td>Ciment PVC</td></tr><tr><td>PHD2000 pousse-seringue</td><td>Appareil Harvard</td><td>71-2000</td><td></td></tr><tr><td>Logiciel Ponemah</td><td>Logiciel d’enregistrement</td><td>DSI</td><td></td></tr><tr><td>Precision 3630 Tower</td><td>Dell</td><td></td><td>Ordinateur pour l’enregistrement</td></tr><tr><td>Raturn Stand-Alone System</td><td>BASi</td><td>MD-1407</td><td>un système de mise en cage à réponse de mouvement</td></tr><tr><td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td><td>Braintree Scientific</td><td>RPT 040</td><td>utilisation pour cathéter</td></tr><tr><td>Ballon en silicone</td><td>Transonic</td><td>AAPC102</td><td>bouton de peau</td></tr><tr><td>Lubrifiant chirurgical bactériostatique stérile</td><td>Fougera</td><td>0168-0205-36</td><td>gell pour sonde de débit</td></tr><tr><td>Tergazyme</td><td>Alconox</td><td></td><td>protéase contenue détergent anionique</td></tr><tr><td>TS420 Module de débit périvasculaire Transonic</td><td></td><td>TS420</td><td>Module de flux périvasculaire</td></tr><tr><td>Vetbond</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td>adhésif tissulaire</td></tr><tr><td>Logiciel WinDaq Logiciel</td><td>DATAQ</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

mesure continue à long terme du débit sanguin rénal chez les rats conscients

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

Les reins jouent un rôle crucial dans le maintien de l’homéostasie des fluides corporels. La régulation du débit sanguin rénal (FBR) est essentielle aux fonctions vitales de filtration et de métabolisme de la fonction rénale. De nombreuses études aiguës ont été réalisées chez des animaux anesthésiés pour mesurer le FBR dans diverses conditions afin de déterminer les mécanismes responsables de la régulation de la perfusion rénale. Cependant, pour des raisons techniques, il n’a pas été possible de mesurer la FBR en continu (24 h/jour) chez des rats non anesthésiés non retenus sur des périodes prolongées. Ces méthodes permettent la détermination continue de la FBR pendant plusieurs semaines tout en enregistrant simultanément la pression artérielle (PA) avec des cathéters implantés (remplis de liquide ou par télémétrie). La surveillance du FBR est effectuée avec des rats placés dans une cage à rats circulaire servo-contrôlée qui permet le mouvement sans retenue du rat tout au long de l’étude. Dans le même temps, l’emmêlement des câbles de la sonde d’écoulement et des cathéters artériels est empêché. Les rats sont d’abord instrumentés avec un placement de sonde d’écoulement ultrasonique sur l’artère rénale gauche et un cathéter artériel implanté dans l’artère fémorale droite. Ceux-ci sont acheminés par voie sous-cutanée vers la nuque et connectés au débitmètre et au transducteur de pression, respectivement, pour mesurer le FBR et la PA. Après l’implantation chirurgicale, les rats sont immédiatement placés dans la cage pour récupérer pendant au moins une semaine et stabiliser les enregistrements de la sonde à ultrasons. La collecte d’urine est également réalisable dans ce système. Les procédures chirurgicales et post-chirurgicales pour la surveillance continue sont démontrées dans ce protocole.

Les données sur la pression artérielle moyenne (figure 1A) et les données sur le débit sanguin (figure 1B) d’un rat mâle Dahl sensible au sel sont présentées. Les rats sensibles au sel Dahl sont maintenus dans une colonie et élevés au Medical College of Wisconsin. La chirurgie a été effectuée à l’âge de 8 semaines et le poids corporel était de 249 g au moment de la chirurgie. Les rats ont été nourris avec un régime NaCl à 0,4%, et le régime a été changé pour un ...

Le présent protocole décrit une mesure continue à long terme du débit sanguin rénal chez des rats conscients et l’enregistrement simultané de la pression artérielle avec des cathéters implantés (remplis de liquide ou par télémétrie).

Mesure continue à long terme du débit sanguin rénal chez les rats conscients

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

L’enregistrement continu du flux sanguin rénal chez les rats instrumentés nous permet de déterminer temporairement la séquence des événements qui mènent au processus pathologique que nous étudions. Dans notre cas, c’est l’hypertension et nous essayons de déterminer si une réduction du débit sanguin rénal, qui se produit dans l’hypertension, précède ou est une conséquence de l’hypertension artérielle. Le système que nous allons démontrer aujourd’hui et la préparation de l’animal est vraiment conçu pour permettre une détermination continue 24 heures sur 24 du débit sanguin rénal pendant plusieurs semaines à la fois pour étudier les événements chroniques et étudier le rat dans son environnement domestique, les cages.Comme pour toutes les techniques chirurgicales, la pratique, la patience et le souci du détail, nous devrons maîtriser ces procédures jusqu’à ce que l’outil puisse être effectué à temps. Pour commencer à raser tout l’abdomen dans une région de la sieste autour de la septième vertèbre cervicale d’un rat anesthésié avec une tondeuse électrique. Après le rasage, essuyez la zone trois fois en alternant avec 10% de povidone iode et 70% d’éthanol.Placez le rat en position couché

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Cathétérisme chronique des vaisseaux sanguins chez le rat est souvent nécessaire pour l'administration de substances, d'obtenir un échantillon de sang sur une période de temps ou pour directement conscients de la pression artérielle. Cathétérisme artériel fémoral du rat et les mesures correspondantes de la pression artérielle chez l'animal éveillé sera démontrée.

Fémorale cathétérisme artériel et veineux pour le prélèvement sanguin, Drug Administration et la pression artérielle Conscient et Mesures du rythme cardiaque

Mesure du débit de filtration glomérulaire (GFR) est la norme d'or pour l'évaluation de la fonction rénale. Nous décrivons ici une méthode à haut débit qui permet la détermination du DFG chez des souris conscientes en utilisant une seule injection en bolus, la détermination de l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC)-inuline dans le plasma et le calcul du taux de filtration glomérulaire par un modèle de décroissance exponentielle en deux phases.

Une méthode à haut débit pour la mesure de débit de filtration glomérulaire chez des souris conscientes

Une méthode est présentée pour mesurer la vitesse du flux sanguin microcirculatoire dans les métastases du cancer pulmonaire de la surface pleurale chez le rat de manière automatisée, en utilisant la microscopie intravitale pulmonaire à poitrine fermée. Ce modèle a le potentiel d’être utilisé comme outil généralisé pour effectuer des recherches physiologiques sur les métastases pulmonaires chez les rongeurs.

Mesure automatisée du flux sanguin Microcirculatory vitesse dans métastases pulmonaire des rats

Un dysfonctionnement hémodynamique précoce est essentiel au développement de la maladie rénale. Pourtant, les méthodologies de détection sont limitées. Les progrès récents de l’échographie offrent une option non invasive et précise pour la détection précoce des lésions rénales. Cette étude décrit une méthodologie échographique étape par étape pour détecter le dysfonctionnement rénal à l’aide d’un modèle de néphrotoxicité induite par un médicament chez le rat.

Détection précoce du médicament-Induced rénale hémodynamique Dysfonction Utilisation de échographique Technology chez le rat

Le but de ce protocole est de démontrer les principes et les techniques de mesure et de calcul du débit de filtration glomérulaire, du débit urinaire et de l’excrétion de sodium et de potassium chez un rat. Cette démonstration peut être utilisée pour fournir aux étudiants une compréhension conceptuelle globale de la façon de mesurer la fonction rénale.

Laboratoire de Physiologie et de démonstration: taux de filtration glomérulaire dans un Rat

La détermination du débit de filtration glomérulaire (DFG) est l’étalon-or pour évaluer la fonction rénale globale. Cependant, les procédures traditionnelles de mesure de ce paramètre sont lourdes et nécessitent un investissement en temps important. Nous décrivons ici une méthode plus rapide et peu invasive pour déterminer le DFG par voie transcutanée.

Évaluation transcutanée de la fonction rénale dans Rongeurs Conscious

Anesthésiés souris présentent artérielle systémique non physiologiques, qui s’oppose à une évaluation pertinente de tonus autonome étant donné la relation intime entre la pression artérielle et le système nerveux autonome. Ainsi, une nouvelle méthode pour l’activité nerveuse sympathique rénale en même temps record et la pression artérielle avec une perfusion intraveineuse chez des souris conscientes est exposée.

Nouvelle approche pour l’enregistrement simultané de l’activité nerveuse sympathique rénale et de la pression artérielle avec une perfusion intraveineuse, conscients, souris sans retenue.

Nous décrivons ici un protocole permettant de mesurer le taux de filtration glomérulaire (GFR), conscients, se déplaçant librement de souris à l’aide d’un moniteur GFR transdermique.

Transdermique mesurage du débit de Filtration glomérulaire chez la souris

Nous décrivons ici une configuration pour l’enregistrement simultané de l’électrocardiographie et intra-artérielle pression artérielle (PA) chez les rats expérimentaux, qui peuvent être faits avec un équipement standard dans les animaleries et peuvent être appliquées à physiologique ou pharmacologique études pour étudier les mécanismes pathogènes ou thérapeutiques en médecine cardiovasculaire.

Enregistrement simultané de l’électrocardiographie et envahissantes sang pression mesure chez les Rats

Ici, un protocole pour l'échantillonnage continu de sang pendant la formation image de PET/CT des rats pour mesurer la fonction d'entrée artérielle (AIF) est décrit. Le cathétérisation, l'étalonnage et la configuration du système et l'analyse des données de la radioactivité sanguine sont démontrés. Les données générées fournissent des paramètres d'entrée pour la modélisation biocinétique ultérieure.

L'échantillonnage continu de sang dans la tomographie d'émission de positron de petit animal/tomographie calculée permet la mesure de la fonction d'entrée artérielle

Apprenez à mesurer le débit sanguin rénal chez des rats conscients sur le long terme. Cette méthode chronique permet d'étudier la relation entre hypertension et flux rénal en environnement naturel.

Mesure continue à long terme du débit sanguin rénal chez les rats conscients

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