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बड़े पैमाने पर संवेदनशील कण ट्रैकिंग झिल्ली-संबद्ध Macromolecule Dynamics को चिह्नित करने के लिए
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Mass-Sensitive Particle Tracking to Characterize Membrane-Associated Macromolecule Dynamics
DOI:

13:30 min

February 18, 2022

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43Cleaning of Microscope Slides
  • 01:48Assembly of Flow Chambers
  • 02:41Supported Lipid Bilayer (SLB) Formation
  • 03:31Imaging
  • 04:31Data Analysis
  • 10:25Results: Native and Ratiometric View of Exemplary Surfaces
  • 11:01Results: Calibration of the Mass-to-Contrast Relation for MSPT Measurements
  • 12:15Results: Deciphering Oligomer States of Membrane-Associated Proteins
  • 12:57Conclusion

Summary

Automatic Translation

यह प्रोटोकॉल एक iSCAT-आधारित छवि प्रसंस्करण और एकल-कण ट्रैकिंग दृष्टिकोण का वर्णन करता है जो आणविक द्रव्यमान की एक साथ जांच और लिपिड झिल्ली के साथ बातचीत करने वाले मैक्रोमोलेक्यूल्स के विसर्पण व्यवहार को सक्षम बनाता है। नमूना तैयारी, मास-टू-कंट्रास्ट रूपांतरण, फिल्म अधिग्रहण और पोस्ट-प्रोसेसिंग के लिए चरण-दर-चरण निर्देश संभावित नुकसान को रोकने के लिए दिशाओं के साथ प्रदान किए जाते हैं।

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