Name: Una procedura per studiare la ricaduta indotta dallo stress della ricerca di eroina dopo lastinenza imposta dalla punizione (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: Scopri un metodo per studiare la ricaduta da eroina indotta dallo stress dopo astinenza imposta dalla punizione nei ratti. Questo modello migliora la validità ecologica per comprendere i meccanismi neuronali della ricaduta.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Questo lavoro è stato supportato dal Natural Sciences & Engineering Council Discovery Program (US: RGPIN-2016-06694).

Tutti i ratti sono trattati secondo le linee guida del Canadian Council on Animal Care. L'approvazione per tutte le procedure sperimentali è stata concessa dal Comitato Etico per la Ricerca Animale della Concordia University.
1. Animali
<ol><li>Acquisire ratti Long Evans del peso di 275-300 g (maschi) o 225-250 g (femmine). Topi domestici doppi in gabbie di plastica standard con lettiera di pannocchie e carta triturata fino all'intervento chirurgico.</li>
	<li>Tenere i ratti su un ciclo chiaro-buio invertito (luci spente alle 9:30, luce accesa alle 21:30).</li>
	<li>Consentire l'accesso illimitato a cibo e acqua, tranne durante il test di privazione alimentare. Utilizzare rat chow normale (20,9% di proteine, 67,2% di carboidrati e 11,8% di grassi).</li>
</ol>2. Interventi chirurgici per via endovenosa
<ol><li>Costruire cateteri ed eseguire interventi chirurgici per via endovenosa come descritto in Sedki et al. 201317 con le seguenti differenze: 1) Utilizzare isofluorano 2-2,5% per l'anestesia, 2) Modificare la dose di penicillina somministrata durante l'intervento chirurgico a 60 000 UI / ratto, tramite iniezione sottocutanea, e 3) Aumentare la dose di gentamicina nella miscela di eparina e gentamicina utilizzata per lavare i cateteri a 7,5 UI + 800 μg; 0,2- 0,3 ml.</li>
	<li>Iniettare ketoprofene o carprofene, un analgesico antinfiammatorio, per via intraperitoneale o sottocutanea (5 mg/kg) immediatamente dopo l'intervento chirurgico (prima del recupero dall'anestesia) e nei 3 giorni successivi. Durante il periodo di recupero di 2 giorni, somministrare purè di cibo e calore (se necessario) per aiutare con il recupero. Pesare e sorvegliare quotidianamente gli animali per verificare eventuali perdite improvvise di peso o altri segni di problemi di salute.</li>
</ol>3. Procedura comportamentale
<ol><li>Camere di condizionamento operanti:<ol><li>Impostare le camere di condizionamento operante come descritto in Sedki et al. 201317.</li>
	</ol></li>
	<li>Giorno di assuefazione:<ol><li>Ospitare i ratti nelle camere di addestramento operanti dopo il recupero dall'intervento chirurgico e consentire agli animali di abituarsi alla camera per 24 ore prima di iniziare qualsiasi protocollo. Tenere gli animali alloggiati nelle camere operatorie durante l'intero esperimento.</li>
		<li>Non attaccare i ratti alla molla metallica e non avviare alcun protocollo sperimentale (la cue-light, il tono e le leve non sono disponibili durante il giorno di assuefazione).</li>
	</ol></li>
	<li>Autosomministrazione di eroina:<ol><li>Collegare il connettore 5-up al tubo Tygon e alla molla metallica.</li>
		<li>Impostare sessioni di allenamento giornaliere di 6 ore di autosomministrazione di eroina (0,1 mg/kg/infusione) secondo la procedura descritta di seguito.</li>
		<li>Iniziare sessioni di allenamento giornaliere all'inizio della fase oscura del ciclo di luce inversa (intorno alle 9:30 nei risultati rappresentativi) con l'estensione della leva di ricerca (o prendere la leva nei primi 2 giorni; vedi sotto), oltre a spegnere la luce domestica.</li>
		<li>Autosomministrazione con la sola leva di presa disponibile a rapporto fisso 1 (FR1; 2 giorni)<ol><li>Programma ogni prova per iniziare con l'inserimento della leva di presa.</li>
			<li>Una volta che il topo preme una volta la leva di presa (FR1), ritrarre la leva di presa, accendere la spia di cue sopra la leva e il tono per un periodo di timeout di 20 s, spegnere la luce domestica e consentire l'erogazione di un'infusione di eroina (0,1 mg / kg in 0,13 ml)</li>
			<li>Programma un intervallo inter-prova di 30 s in cui non vengono presentati segnali, la luce domestica viene spenta e la leva viene retratta. Per l'inizio della prova successiva, inserire la leva di presa e accendere la luce di casa.</li>
		</ol></li>
		<li>Autosomministrazione con catena di ricerca-cattura sotto FR1 (5 giorni)<ol><li>Programmare il sistema di allenamento operante per inserire solo la leva di ricerca e accendere la luce domestica per segnalare l'inizio della sessione. La leva di presa è in uno stato retratto.</li>
			<li>Una volta che il ratto preme una volta (FR1) sulla leva di ricerca, il programma ritrae la leva di ricerca e inserisce la leva di presa.</li>
			<li>Una pressione sulla leva di presa (FR1) ritrae la leva di presa e avvia la stessa procedura del punto 3.3.4.2 e un intervallo interprova di 30 s.</li>
			<li>Programmare il sistema di addestramento operante per inserire la leva di ricerca al termine dell'intervallo tra le prove e accendere la luce domestica per segnalare l'inizio della prova successiva.</li>
			<li>Programmare il sistema di addestramento operante per avviare l'intervallo inter-trial se un ratto non riesce a completare la catena di ricerca-presa durante 10 minuti (senza premere la leva di ricerca o presa) per rappresentare la fine di una sperimentazione e la perdita dell'opportunità di somministrare il farmaco.</li>
		</ol></li>
		<li>Autosomministrazione con catena di ricerca-acquisizione a intervalli variabili (VI5, VI30 e VI60)<ol><li>Programmare tutti i passaggi nella sezione 3.3.5, ma introdurre un intervallo variabile di 5 (VI5) come nuovo schema di rinforzo sulla leva di ricerca, anziché FR1. Consentire l'allenamento di autosomministrazione secondo il programma VI5 per 3 giorni.</li>
			<li>Impostare il software per consentire alla prima pressione sulla leva di ricerca di attivare il programma VI5. Per la pianificazione VI5, lasciare che il software selezioni casualmente un intervallo da un elenco di 0,1 s, 5 s e 10 s, il che si traduce in un intervallo medio di 5 s. La prima pressione della leva di ricerca dopo che è trascorso l'intervallo selezionato, ritrae la leva di ricerca ed estende la leva di presa.</li>
			<li>Seguire i passaggi 3.3.4.2, 3.3.5.4., 3.3.5.5. per prendere la leva e le istruzioni di fine prova.</li>
			<li>Successivamente, addestra i ratti per 5 giorni sotto il programma VI30 per il link di ricerca, seguito da 3 giorni sotto il programma VI60.</li>
			<li>Per la pianificazione VI30, consentire al software di selezionare casualmente un orario da un elenco di 15 s, 30 s e 45 s, per una media di 30 s, mentre per il programma VI60, il software seleziona casualmente un tempo da un elenco di 45 s, 60 s e 75 s.</li>
			<li>Variare gli intervalli tra i processi lungo i diversi programmi di rinforzo. Iniziare l'intervallo tra le prove a 30 s durante FR1 e VI5, ma aumentare gradualmente a 7 minuti durante VI30 e VI60.</li>
		</ol></li>
	</ol></li>
	<li>Astinenza imposta dalla punizione<ol><li>Inizia le sessioni di punizione con l'inserimento della leva di ricerca e l'accensione della luce di casa. Consentire sessioni di punizione per 8 giorni, con una supervisione regolare per garantire che gli animali non mostrino segni di dolore anormale o problemi di salute.</li>
		<li>Programmare il sistema di addestramento operante in modo che, dopo aver completato il collegamento di ricerca sotto VI60, la leva di ricerca si ritragga, la luce domestica venga spenta e venga somministrato un leggero footshock sul 30% dei collegamenti di ricerca completati invece dell'inserimento della leva di presa. La leva di presa si estende sull'altro 70% dei collegamenti di ricerca completati, come in un normale studio di auto-somministrazione.</li>
		<li>Programmare un intervallo inter-prova di 7 minuti con tutti i segnali e la luce domestica spenta prima di inserire la leva di ricerca e accendere la luce domestica per segnalare l'inizio della prova successiva.</li>
		<li>Impostare l'intensità del footshock a 0,2 mA e aumentare di 0,1 mA per giorno di punizione fino a 1,0 mA.</li>
		<li>Dopo che i ratti hanno premuto la leva di presa (nelle prove quando è disponibile), ripetere il punto 3.3.4.2 per la retrazione della leva, l'erogazione dell'infusione di eroina e la presentazione dei segnali, seguita da un intervallo interprocesso di 7 minuti.</li>
		<li>Inizia la prova successiva con l'inserimento della leva di ricerca e l'accensione della luce di casa.</li>
		<li>Se il ratto non preme alcuna leva per 10 minuti, seguire il punto 3.3.5.5.</li>
	</ol></li>
	<li>Deprivazione alimentare acuta (24 h)<ol><li>Il giorno successivo all'ultimo giorno di astinenza imposta dalla punizione, dividere i ratti in due gruppi abbinati (in base al peso corporeo e al numero medio di leve e infusi negli ultimi 3 giorni di allenamento di auto-somministrazione): Food Deprived (FD) e Sazia.</li>
		<li>Rimuovere le tramogge di cibo dalle camere (intorno alle 9:30) per i ratti sottoposti a test di recidiva indotta dalla privazione del cibo e mantenere tramogge di cibo per il gruppo sazio che ha accesso illimitato al cibo. Fornire accesso illimitato all'acqua in entrambi i gruppi e sorvegliare gli animali per garantire che non mostrino problemi di salute durante il periodo di privazione del cibo.</li>
	</ol></li>
	<li>Test di ricerca dell'eroina indotta dalla privazione alimentare<ol><li>La mattina dopo le 24 ore di privazione del cibo, eseguire un test di ricerca di eroina di 3 ore, sotto un programma VI60 con un intervallo inter-prova di 7 minuti senza shock o infusioni di eroina in esecuzione. Restituire le tramogge di cibo ai ratti privi di cibo dopo la sessione di 3 ore.</li>
		<li>La mattina dopo il primo test di ricerca dell'eroina, rimuovere le tramogge di cibo dalle camere dei ratti che sono stati sazi al primo test di ricaduta. Consentire ai ratti che in precedenza erano privi di cibo accesso illimitato al cibo (condizione sazia) prima e durante il test.</li>
		<li>Eseguire un altro test di ricerca dell'eroina di 3 ore il giorno successivo (dopo 24 ore di privazione del cibo), come al punto 3.6.1.</li>
		<li>Il giorno dopo il test eutanasia i ratti usando una camera di anidride carbonica (100% CO2 a velocità di riempimento del 30-70% del volume della camera al minuto).</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJaffe%2C+JH+%22Goodman+%26+Gilman%27s+the+Pharmacological+Basis+of+Therapeutics%22">Goodman & Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics</a>. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. , Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).</li>
<li>O'Brien, C. P., McLellan, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myths+about+the+treatment+of+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Myths about the treatment of addiction.</a> Lancet. 347, 237-240 (1996).</li>
<li>Miczek, K. A., de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+for+translational+psychopharmacology+research--some+basic+principles%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Challenges for translational psychopharmacology research--some basic principles.</a> Psychopharmacology (Berl). 199 (3), 291-301 (2008).</li>
<li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+does+stress+increase+risk+of+drug+abuse+and+relapse%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">How does stress increase risk of drug abuse and relapse.</a> Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).</li>
<li>Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calorie+restriction+increases+cigarette+use+in+adult+smokers%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers.</a> Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).</li>
<li>Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+of+dieting+severity+and+bulimic+behaviors+to+alcohol+and+other+drug+use+in+young+women%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Substance+Abuse%22%5BJournal%5D)">The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women.</a> Journal of Substance Abuse. 4, 341-353 (1992).</li>
<li>Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+and+relapse+to+drug+seeking+in+rats%3A+studies+on+the+generality+of+the+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect.</a> Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).</li>
<li>Peck, J. A., Ranaldi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+abstinence%3A+exploring+animal+models+and+behavioral+treatment+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Drug abstinence: exploring animal models and behavioral treatment strategies.</a> Psychopharmacology (Berl). 231 (10), 2045-2058 (2014).</li>
<li>Cooper, A., Barnea-Ygael, N., Levy, D., Shaham, Y., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+conflict+rat+model+of+cue-induced+relapse+to+cocaine+seeking%29%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">A conflict rat model of cue-induced relapse to cocaine seeking).</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 117-125 (2007).</li>
<li>Barnea-Ygael, N., Yadid, G., Yaka, R., Ben-Shahar, O., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cue-induced+reinstatement+of+cocaine+seeking+in+the+rat+%26%2334%3Bconflict+model%26%2334%3B%3A+effect+of+prolonged+home-cage+confinement%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Cue-induced reinstatement of cocaine seeking in the rat &#34;conflict model&#34;: effect of prolonged home-cage confinement.</a> Psychopharmacology (Berl). 219 (3), 875-883 (2012).</li>
<li>Fredriksson, I., Applebey, S. V., Minier-Toribio, A., Shekara, A., Bossert, J. M., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+the+dopamine+stabilizer+%28-%29-OSU6162+on+potentiated+incubation+of+opioid+craving+after+electric+barrier-induced+voluntary+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Effect of the dopamine stabilizer (-)-OSU6162 on potentiated incubation of opioid craving after electric barrier-induced voluntary abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 45 (5), 770-779 (2020).</li>
<li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment%3A+effects+of+drug+taking+history%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li>
<li>Marchant, N. J., Campbell, E. J., Kaganovsky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Punishment+of+alcohol-reinforced+responding+in+alcohol+preferring+P+rats+reveals+a+bimodal+population%3A+Implications+for+models+of+compulsive+drug+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+%26+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Punishment of alcohol-reinforced responding in alcohol preferring P rats reveals a bimodal population: Implications for models of compulsive drug seeking.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry. 87, Pt A 68-77 (2018).</li>
<li>Krasnova, I. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incubation+of+methamphetamine+and+palatable+food+craving+after+punishment-induced+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Incubation of methamphetamine and palatable food craving after punishment-induced abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 39 (8), 2008-2016 (2014).</li>
<li>Panlilio, L. V., Thorndike, E. B., Schindler, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinstatement+of+punishment-suppressed+opioid+self-administration+in+rats%3A+an+alternative+model+of+relapse+to+drug+abuse%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Reinstatement of punishment-suppressed opioid self-administration in rats: an alternative model of relapse to drug abuse.</a> Psychopharmacology (Berl). 168 (1-2), 229-235 (2003).</li>
<li>Economidou, D., Pelloux, Y., Robbins, T. W., Dalley, J. W., Everitt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+impulsivity+predicts+relapse+to+cocaine-seeking+after+punishment-induced+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">High impulsivity predicts relapse to cocaine-seeking after punishment-induced abstinence.</a> Biological Psychiatry. 65 (10), 851-856 (2009).</li>
<li>Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+procedure+to+study+the+effect+of+prolonged+food+restriction+on+heroin+seeking+in+abstinent+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">A procedure to study the effect of prolonged food restriction on heroin seeking in abstinent rats.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50751(2013).</li>
<li>Venniro, M., Caprioli, D., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+drug+relapse+and+craving%3A+From+drug+priming-induced+reinstatement+to+incubation+of+craving+after+voluntary+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models of drug relapse and craving: From drug priming-induced reinstatement to incubation of craving after voluntary abstinence.</a> Progress in Brain Research. 224, 25-52 (2016).</li>
<li>Deroche-Gamonet, V., Piazza, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychobiology+of+cocaine+addiction%3A+Contribution+of+a+multi-symptomatic+animal+model+of+loss+of+control%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Psychobiology of cocaine addiction: Contribution of a multi-symptomatic animal model of loss of control.</a> Neuropharmacology. 76, 437-449 (2014).</li>
<li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment%3A+effects+of+drug+taking+history%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li>
<li>Epstein, D. H., Kowalczyk, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compulsive+seekers%3A+Our+take.+Two+clinicians%27+perspective+on+a+new+animal+model+of+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Compulsive seekers: Our take. Two clinicians' perspective on a new animal model of addiction.</a> Neuropsychopharmacology. 43 (4), 677-679 (2018).</li>
<li>Hser, Y. I., Hoffman, V., Grella, C. E., Anglin, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+33-year+follow-up+of+narcotics+addicts%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+General+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">A 33-year follow-up of narcotics addicts.</a> Archives of General Psychiatry. 58 (5), 503-508 (2001).</li>
<li>Chen, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rescuing+cocaine-induced+prefrontal+cortex+hypoactivity+prevents+compulsive+cocaine+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Rescuing cocaine-induced prefrontal cortex hypoactivity prevents compulsive cocaine seeking.</a> Nature. 496 (7445), 359-362 (2013).</li>
</ol>

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.

Ci sono due importanti dimostrazioni in questo documento. In primo luogo, la convalida dell'astinenza imposta dalla punizione usando la catena cerca e prendi con l'eroina. In secondo luogo, è stato dimostrato che la ricaduta indotta dallo stress potrebbe essere osservata in una procedura di astinenza imposta dalla punizione. Queste sono dimostrazioni importanti perché (i) la procedura di astinenza indotta dalla punizione imita più da vicino la condizione umana in quanto si traduce in astinenza volontaria, cioè non dovuta...

La recidiva è il problema più impegnativo nel trattamento del consumo di droga 1,2. Tuttavia, solo una manciata di trattamenti farmacologici sono approvati per aiutare a evitare la ricaduta negli esseri umani3. L'epidemia di oppioidi che il Nord America sta attualmente affrontando ne è un esempio lampante e richiede di considerare diversi approcci su modelli animali di ricaduta agli oppioidi.
Lo stress acuto ha dimostrato di essere un fattore scatenante chiave per la ricaduta negli esseri umani4. Un fattore di stress ambientale che è spesso associato alla tossicodipendenza è la privazione del cibo. I tossicodipendenti spesso scelgono di destinare risorse all'approvvigionamento di droghe anziché di cibo. È stato dimostrato che il deficit calorico è correlato a una maggiore ricaduta alle sigarette5 e all'uso di alcol6. A causa di questioni etiche e pratiche, negli ultimi decenni sono stati sviluppati modelli animali per facilitare la ricerca sul campo. Nei modelli animali, è stato dimostrato che la privazione acuta del cibo ripristina in modo robusto l'eroina estinguente che cerca7. Attualmente, la maggior parte dei modelli animali di recidiva si basa su procedure di astinenza che non sono rappresentative dell'astinenza umana (ad esempio, modelli basati sull'estinzione) o comprendono solo la piccola percentuale di consumatori di droghe che sono costretti ad astenersi a causa della detenzione o del trattamento ospedaliero (ad esempio, modelli di astinenza forzata). Il motivo principale per cui i consumatori di droga scelgono di astenersi sono le conseguenze negative associate alla ricerca e all'assunzione distupefacenti 8. L'astinenza imposta dalla punizione è un modello animale che imita le conseguenze negative associate alla ricerca di droghe sull'astinenza autoimposta negli esseri umani. Questo modello introduce uno stimolo avversivo, ad esempio un lieve colpo di piede, con ricerca o assunzione di droghe, che porta l'animale a interrompere l'assunzione volontaria del farmaco. Un'altra procedura che incorpora conseguenze negative per la ricerca di droga è il modello di conflitto di barriera elettrica per l'astinenza e la recidiva9. Il ratto deve attraversare una barriera elettrica per eseguire il comportamento operante legato all'auto-somministrazione del farmaco. Il modello è stato utilizzato con successo per dimostrare l'astinenza volontaria e la ricaduta a farmaci psicostimolanti e oppioidi10,11. Tuttavia, sotto la procedura di barriera elettrica, gli sforzi di ricerca di droga sono sempre associati a un evento avversivo, a differenza della condizione umana. Inoltre, l'assunzione di droghe stessa potrebbe sovrapporsi alla scossa elettrica mentre l'animale ritorna nell'area sicura dopo l'infusione attraversando nuovamente la barriera.
L'astinenza imposta dalla punizione è stata usata con altre droghe d'abuso come la cocaina12, l'alcol 13, la metanfetamina 14, il remifentanil15, ma non è mai stata applicata agli animali addestrati all'eroina. Il modello è stato utilizzato per studiare la recidiva indotta dal priming14 e i segnali associati al farmaco16, ma non è stato integrato in una procedura di recidiva indotta dallo stress. La procedura qui descritta viene utilizzata per dimostrare la ricaduta acuta indotta dalla privazione alimentare alla ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione nei ratti maschi.

<table><tbody><tr><td>Anafen Iniezione 100 mg/mL Flaconcino/50 mL</td><td>MERIAL Canada, Inc.</td><td>1938126</td><td>farmaco antinfiammatorio</td></tr><tr><td>Braccio di bilanciamento</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H29-01</td><td></td></tr><tr><td>Cannule (22 G, 5-up)</td><td>Plastiche One</td><td>C313G-5up</td><td></td></tr><tr><td>Scheda di connessione ambientale e Cavo Linc</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H03-04</td><td></td></tr><tr><td>Pompa di infusione a velocità fissa (3,3 giri/min)</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>A73-01-3.3</td><td></td></tr><tr><td>GE Marine Silicon</td><td>GE</td><td>SE-1134</td><td></td></tr><tr><td>Notazione grafica dello stato 3</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>GS3</td><td>Software</td></tr><tr><td>Habitest universale Linc</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H02-08</td><td></td></tr><tr><td>Eroina HCl</td><td>Istituto Nazionale per l'Abuso di Droghe, Ricerca Triangolo Park, NC, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Casa Rosso-Rat</td><td>Coulbourn Strumenti</td><td>H11-01R</td><td></td></tr><tr><td>Isofluorano USP 99,9% Fiala/250 mL</td><td>Fresenius Kabi Canada Ltd</td><td>2237518</td><td></td></tr><tr><td>Girelle liquide, Plastica, 22 G</td><td>Lomir Biomedical, Inc.</td><td>RSP1</td><td></td></tr><tr><td>Gabbia per test per ratti</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H10-11R-TC</td><td>Camere di condizionamento operanti</td></tr><tr><td>Leva retrattile-Rat</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H23-17RA</td><td></td></tr><tr><td>Tubi Silastic (ID 0.02, OD 0.037)</td><td>Fisher Scientific (Canada)</td><td>1118915A</td><td></td></tr><tr><td>Singolo stecca ad alta luminosità-Rat</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H11-03R</td><td></td></tr><tr><td>Suono scatole di attenuazione</td><td>Concordia University</td><td>Pavimento</td> a griglia in acciaio inox fatto in casa <td></td></tr><tr><td></td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H10-11R-TC-SF</td><td></td></tr><tr><td>Controllore di sistema 2</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>SYS CTRL 2</td><td></td></tr><tr><td>Base di alimentazione del sistema</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H01-01</td><td></td></tr><tr><td>Modulo di tono 2,9 KHz</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H12-02R-2.9</td><td></td></tr><tr><td>Tubo Tygon (ID 0.02, OD 0.060)</td><td>VWR</td><td>63018-044</td><td></td></tr></tbody></table>

una procedura per studiare la ricaduta indotta dallo stress della ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione

A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

La procedura di astinenza imposta dalla punizione modella l'astinenza autoimposta che gli esseri umani iniziano a causa delle conseguenze negative associate all'assunzione di droghe. Questo modello è stato implementato in esperimenti che utilizzano diversi tipi di sostanze di abuso come metanfetamine, cocaina e alcol. Tuttavia, l'astinenza indotta dalla punizione negli animali addestrati all'eroina non è stata dimostrata. Inoltre, lo stress acuto è un fattore scatenante chiave per la ricaduta negli esseri umani e nei modelli animali. In precedenza era stato dimostrato che la privazione acuta del cibo induceva in modo robusto il ripristino della ricerca di cocaina ed eroina estinte. La procedura qui descritta può essere utilizzata per valutare gli effetti dell'esposizione acuta allo stress sulla ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione. Un totale di 8 ratti sono stati impiantati con cateteri cronici per via endovenosa (e.v.) e addestrati ad auto-somministrarsi eroina (0,1 mg / kg / infusione) per 18 giorni secondo un programma di concatenamento di ricerca-prelievo. Il completamento del link di ricerca ha dato accesso alla leva di presa, che è stata abbinata a un'infusione di eroina. La leva di ricerca è stata programmata con un intervallo variabile 60 di schema di rinforzo (VI60), e la leva di presa è stata programmata con un programma di rinforzo a rapporto fisso 1 (FR1). Dopo l'allenamento di auto-somministrazione, è stato erogato un lieve shock al piede sul 30% dei collegamenti di ricerca completati invece dell'estensione della leva di presa. L'intensità del footshock è stata aumentata di 0,1 mA per sessione giornaliera da 0,2 mA a 1,0 mA. I test per la ricerca di eroina sono stati eseguiti dopo 24 ore di privazione alimentare (FD) o condizioni sazie. I ratti in condizioni di deprivazione alimentare acuta hanno aumentato notevolmente la ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione.

I ratti maschi hanno dimostrato un aumento delle pressioni a leva di ricerca man mano che il programma di rinforzo aumentava durante i giorni di addestramento e un numero affidabile e costante di infusioni di eroina durante i giorni di allenamento (Figura 1). Durante la punizione, i ratti hanno diminuito il numero di presse e infusioni della leva di ricerca con l'aumento dell'intensità della scossa di piede in 8 giorni di punizione (Figura 2). La condizione di p...

Viene descritta una procedura che dimostra una robusta ricaduta acuta indotta dalla privazione alimentare alla ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione. Un modello di astinenza imposta dalla punizione è stato implementato con successo utilizzando il programma di catena cerca e prendi per l'autosomministrazione di eroina. I test per la ricerca di eroina vengono quindi eseguiti dopo 24 ore di stress da privazione alimentare.

Una procedura per studiare la ricaduta indotta dallo stress della ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

È la prima volta che la ricaduta indotta dallo stress all'eroina viene mostrata dopo l'astinenza imposta dalla punizione. Questi metodi potrebbero aiutarci a capire il meccanismo neuronale alla base della ricaduta indotta dallo stress negli esseri umani dopo l'astinenza volontaria. Usando la privazione del cibo e l'astinenza imposta dalla punizione, stiamo imitando più da vicino la condizione umana e portando validità ecologica ai modelli animali di ricaduta.Inizia impostando le camere di condizionamento operante come descritto nel manoscritto. Dopo il recupero dall'intervento chirurgico, abituare il ratto nella camera di allenamento operante per 24 ore prima di iniziare il protocollo senza attaccare il ratto alla molla metallica. Posizionare il ratto alloggiato nelle camere operanti durante l'esperimento.Quindi, collegare il connettore 5up al tubo Tygon e alla molla metallica. Iniziare la sessione di allenamento all'inizio della fase oscura del ciclo di luce inversa. Per l'autosomministrazione di eroina, la leva di presa dovrebbe essere disponibile sotto rapporto fisso uno, o FR uno.Programma ogni prova per iniziare con l'inserimento della leva di presa e l'accensione della luce d

a-procedure-to-study-stress-induced-relapse-heroin-seeking-after

Research

Ricerca

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

Operante farmaco di auto-somministrazione e la preferenza luogo condizionato (CPP), le procedure sono espansivo utilizzati nella ricerca per modellare i vari componenti di rinforzo della droga, consumo e dipendenza nell'uomo. In questo rapporto, abbiamo unito i metodi tradizionali di CPP e di auto-somministrazione di un nuovo approccio allo studio di rinforzo della droga e la dipendenza nei ratti.

Nuovo Apparato e metodo per il rinforzo della droga

Modelli animali di ricaduta, noto come le procedure di ripristino, sono stati ampiamente utilizzati per studiare il ruolo dello stress nella ricaduta alla ricerca di droga. Qui, segnaliamo su un metodo per indurre il ripristino della cocaina ricerca nei ratti di laboratorio attraverso l'esposizione acuta a mite, footshock elettrico intermittente.

Una procedura per lo studio della Footshock indotta Ripristino di cocaina Cerco nei ratti di laboratorio

Rispondere per spunti cibo o droga abbinato aumenta nel corso di un periodo di astinenza e questo può riguardare una maggiore suscettibilità a comportamenti ricaduta. Qui dettaglio una procedura per valutare questa "incubazione di craving" nei ratti che si sono auto-somministrato saccarosio.

Un metodo generale per la valutazione di incubazione della brama di saccarosio in ratti

Una procedura che consente una dimostrazione di forte aumento della ricerca di droga nei ratti alimentare ristretto è descritto. Dopo la formazione di auto-somministrazione di eroina, i ratti passare attraverso un periodo di astinenza, in un ambiente privo di droga, durante il quale sono leggermente alimentare ristretto. Ricerca di droga viene poi testato in ambiente farmaco associato.

Una procedura per studiare l&#39;effetto della prolungata restrizione alimentare sulla Cerco eroina nei ratti in astinenza

Cue la reattività è concettualizzata come sensibilità ai segnali collegati con esperienze di assunzione di droghe che contribuiscono alla brama e ricadono in esseri umani astinenti. Reattività di Cue viene modellata in ratti dalla misurazione orientamento attenzionale verso spunti droga-collegato che si traduce in un comportamento Appetitivo approccio in un test di reattività cue dopo il self-administration e costretto l'astinenza.

Un protocollo per la misurazione Cue reattività in un modello del ratto di disturbo da uso di cocaina

Questo protocollo descrive la preferenza di posto condizionata (CPP) come modello di ricaduta. Questa procedura permette di misurare di ricaduta in animali da laboratorio, considerando l'impatto della droga-collegato di stimoli ambientali come desiderio e ricaduta nelle persone dedite di astensione è attualmente al centro dei programmi di trattamento di abuso di droga.

Reintegrazione di droga in Cerca nei topi utilizzando il paradigma di Conditioned Place Preference

Qui, un protocollo di preferenza (CPP) di morfina condizionata posto è descritto per misurare l'incubazione di desiderio in ratti.

Un protocollo di Conditioned Place Preference per l'incubazione di Craving nei ratti di misura

Questo modello di conflitto viene utilizzato per misurare il danno di controllo inibitorio dopo l'esposizione a sostanze d'abuso, o altri fattori che possono influenzare il controllo inibitorio. Uno stimolo sessuale e un ostacolo che ha avversione sono presentati simultaneamente, così ratti maschii hanno conquistare l'ostacolo per approcciare la ricompensa sessuale.

Un modello di conflitto di ricompensa in cerca di comportamento in ratti maschii

Il NICU Network neurocomportamentali Scale (NNNS) è stato sviluppato come una valutazione per il bambino a rischio. Lo scopo di questo articolo è quello di descrivere il NNNS, fornire esempi video delle procedure NNNS e discutere i modi in cui è stato utilizzato l'esame.

Valutazione e valutazione del neonato ad alto rischio: La scala NICU Network neurocomportamentali

L'attuale studio valuta una nuova procedura per la valutazione degli effetti di rinforzo delle soluzioni appetibili in topi di laboratorio: intraorale auto-amministrazione. A tal fine, rispondendo operante (cioè leva pressione) per gli infusi endorali di soluzioni dolci a diverse concentrazioni è stata misurata sui rapporti continui e progressivi orari di rinforzo.

Una nuova procedura per valutare le proprietà di rinforzo di Tastants nei ratti di laboratorio: operante intraorale autosomministrazione

Scopri un metodo per studiare la ricaduta da eroina indotta dallo stress dopo astinenza imposta dalla punizione nei ratti. Questo modello migliora la validità ecologica per comprendere i meccanismi neuronali della ricaduta.

Una procedura per studiare la ricaduta indotta dallo stress della ricerca di eroina dopo l'astinenza imposta dalla punizione

Esplora altri video