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Chapters
- 00:04Introduction
- 00:58Preparation of CRISPR Gene Editing and Guide RNA Design to Generate miRNA Cluster Knockout Cell Lines
- 02:06Generation of Stable Lentiviral Cell Lines Carrying the DOX-Inducible Cas9 Expression Cassette
- 03:20Performing CRISPR Reactions by Cas9 Induction and Synthetic Guide RNA Transfection of Cells Using a High-Throughput Format
- 07:22PCR Genotyping of CRISPR Cell Lines Using Crude Cell Lysates
- 08:37Results: High-Throughput CRISPR Experimental Design to Generate Multiple miR-888 Cluster Deletion Combinations
- 09:51Conclusion
यह प्रोटोकॉल माइक्रोआरएनए क्लस्टर नेटवर्क विश्लेषण के लिए एक उच्च-थ्रूपुट क्लस्टर नियमित रूप से इंटरस्पेस्ड शॉर्ट पैलिंड्रोमिक रिपीट (सीआरआईएसपीआर) जीन संपादन वर्कफ़्लो का वर्णन करता है जो आनुवंशिक रूप से संशोधित सेल लाइनों के एक पैनल की तेजी से पीढ़ी की अनुमति देता है जो अद्वितीय एमआईआरएनए क्लस्टर सदस्य विलोपन संयोजनों को एक प्रयोग के भीतर 35 केबी जितना बड़ा होता है।
