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Geração de Organoides da Retina a partir de Células-Tronco Pluripotentes Induzidas por Humanos Saudáveis e Específicas de Doenças da Retina
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JoVE Journal Developmental Biology
Generation of Retinal Organoids from Healthy and Retinal Disease-Specific Human-Induced Pluripotent Stem Cells

Geração de Organoides da Retina a partir de Células-Tronco Pluripotentes Induzidas por Humanos Saudáveis e Específicas de Doenças da Retina

DOI:
10.3791/64509-v

•

09:47 min

•

December 09, 2022

•

, , , , ,
1Centre for Ocular Regeneration, Prof. Brien Holden Eye Research Centre,LV Prasad Eye Institute, 2Manipal Academy of Higher Education, 3Schepens Eye Research Institute, Massachusetts Eye and Ear, Harvard Medical School

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 01:19Passaging and Plating of hiPSCs to Initiate Retinal Lineage Differentiation
  • 02:40Differentiation of hiPSCs into Eye Fields and Retinal Lineage
  • 04:38Harvesting of Retinal Organoids
  • 06:41Results: Characterization of Retinal Organoids and RPE Cells Derived From Normal and RB1-/- Mutant iPSCs
  • 09:06Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Este protocolo descreve um método eficiente de diferenciar hiPSCs em clusters de campos oculares e gerar organoides neuro-retinianos usando condições de cultura simplificadas envolvendo sistemas de cultura aderentes e de suspensão. Outros tipos de células oculares, como o EPR e o epitélio corneano, também podem ser isolados de campos oculares maduros em culturas de retina.

Tags

Keywords: Retinal OrganoidsHuman Induced Pluripotent Stem CellsRetinal DegenerationRetinal Pigment EpitheliumIn Vitro ModelsCell-based TherapiesEye DevelopmentInherited Retinal DiseasesDifferentiationAdherent CultureSuspension CultureRetinal CupsSpatial PositioningMorphological FeaturesCell DissociationIPSC CultureDifferentiation Induction MediumBFGFNoggin

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