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Cultura de Longo Prazo de Caenorhabditis elegans Individuais em Meio Sólido para Monitoramento Longitudinal de Fluorescência e Intervenções Aversivas
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Long-Term Culture of Individual Caenorhabditis elegans on Solid Media for Longitudinal Fluorescence Monitoring and Aversive Interventions
DOI:

07:25 min

December 02, 2022

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Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:49Prepare Palmitic Acid Working Solution
  • 01:27Applying Palmitic Acid Coating to Microtray
  • 02:53Loading the Microtray with Low‐Melt Nematode Growth Media (lmNGM) and Seeding the Microtray Wells with Bacterial Food
  • 03:47Enclosing Each Microtray Inside a Single‐Well Plate
  • 04:25Adding Worms to the Microtray and Preparing the Culture Environment for Long‐Term Use
  • 05:01Imaging Individual Worms in Microtray Wells
  • 05:27Results: Correlation of Phenotypes in Individual Animals Across Populations
  • 06:53Conclusion

Summary

Automatic Translation

Aqui, apresentamos um protocolo para cultura de isolados de nematoides individuais em meio sólido para rastreamento de parâmetros fisiológicos ao longo da vida e quantificação de fluorescência. Este sistema de cultura inclui uma barreira de ácido palmítico ao redor de poços de verme único para evitar a fuga de animais, permitindo o uso de intervenções aversivas, incluindo bactérias patogênicas e estressores químicos.

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