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June 09, 2023
DOI:
10.3791/65638-v
水晶体は眼の前房にある透明な楕円体器官で、網膜に光を細かく合わせて鮮明な画像を作り出す役割を担っています。レンズの機能は、その生体力学的特性に依存しており、レンズファイバーセル間の複雑なインターディジテーションが、レンズの剛性にとって重要であることが最近示されています。水晶体線維細胞の特殊な形態は、これまで電子顕微鏡法によって説明されてきましたが、これらのインターロッキングメンブレンに必要なタンパク質についてはほとんどわかっていません。
これまでの研究は、複雑な細胞構造を明確に可視化することができない水晶体組織切片に依存していました。私たちは、特定のタンパク質の染色および共焦点顕微鏡イメージングのために、水晶体線維細胞間の複雑な膜間指を忠実に保存するための新しい技術を開発し、完成させました。このプロトコルでは、水晶体核としても知られる水晶体の中心から繊維細胞を染色する新しい方法もあります。
この方法は、膜間指の形成と変化のメカニズムを研究することにより、線維細胞の分化と成熟を理解するための扉を開きます。
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Vu, M. P., Cheng, C. Preparation and Immunofluorescence Staining of Bundles and Single Fiber Cells from the Cortex and Nucleus of the Eye Lens. J. Vis. Exp. (196), e65638, doi:10.3791/65638 (2023).
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