Preparazione di doppi strati artificiali per esperimenti Elettrofisiologia

Biology
 

Summary

Doppi strati lipidici planari, detti anche doppi strati lipidici artificiali, consentono di studiare ioni conduttore canali in un ambiente ben definito. In questo studio dimostriamo i singoli passi necessari per preparare la camera di doppio strato, gli elettrodi e come prova che il doppio strato è adatto per singolo canale misurazioni.

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Kapoor, R., H. Kim, J., Ingolfson, H., Sparre Andersen, O. Preparation of Artificial Bilayers for Electrophysiology Experiments. J. Vis. Exp. (20), e1033, doi:10.3791/1033 (2008).

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Abstract

Doppi strati lipidici planari, detti anche doppi strati lipidici artificiali, consentono di studiare ioni conduttore canali in un ambiente ben definito. Questi doppi strati possono essere utilizzati per molti diversi studi, come ad esempio la caratterizzazione di membrana attiva peptidi, la ricostituzione dei canali ionici o indagini su come i cambiamenti nelle proprietà doppio strato lipidico alterare la funzione del doppio strato-spanning canali. Qui, ci mostrano come a formare un doppio strato planare e come isolare piccole macchie dal doppio strato, e in un secondo video dimostri anche una procedura per l'utilizzo di canali gramicidina per determinare le variazioni delle proprietà elastiche doppio strato lipidico. Abbiamo anche dimostrare i singoli passi necessari per preparare la camera di doppio strato, gli elettrodi e come prova che il doppio strato è adatto per singolo canale misurazioni.

Protocol

Si prega di visitare Protocolli Springer per ulteriori informazioni sulla preparazione bilayers artificiale e utilizzando i canali gramicidina per sondare l'elasticità della membrana.

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