Name: Bioluminescent Orthotope Model van pancreaskanker Progression (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 25 s
Description: Leer een orthotopisch muismodel van pancreaskanker met bioluminescentiebeeldvorming voor niet-invasieve monitoring van tumorprogressie. Deze methode ondersteunt onderzoek naar nieuwe therapeutische strategieën.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd ondersteund door de National Health en Medical Research Council, Australië (1008865), de Australische Research Council (LE110100125), het National Cancer Institute (CA138687-01), Erica Sloan wordt ondersteund door een Early Career Fellowship van de National Breast Cancer stichting, Australië. Corina Kim-Fuchs wordt ondersteund door een beurs van de Zwitserse Liga tegen Kanker en een HDR-beurs van Monash Instituut voor Farmaceutische Wetenschappen. Eliane Angst wordt ondersteund door een subsidie ​​van de Bern Liga tegen Kanker.

Het protocol wordt gedemonstreerd wordt uitgevoerd onder de leiding en goedkeuring van de auteur instelling dierlijke zorg en gebruik commissie. Alle experimenten worden uitgevoerd in overeenstemming met alle relevante richtlijnen, verordeningen en regelgevende instanties. 1. Transducing pancreaskankercellijnen <ol><li> Transduceren pancreaskanker cellen luciferase expressie zoals eerder beschreven. 12,13 Panc-1 en Capan-1 pancreaskankercellijnen getransduceerd met vuurvlieg luciferase worden hier gebruikt. </li></ol> Opmerking: Renilla luciferase of bacteriële luciferase kunnen ook worden gebruikt. 2. Pancreaskankercellijnen Voorbereiding <ol><li> Cultuur getransduceerde alvleesklierkankercellen tot 70% samenvloeiing. </li><li> Til de alvleesklier cellen en zorgen voor levensvatbaarheid is groter dan 90%. </li><li> Resuspendeer in 2 x 10 7 cellen / ml in een 3:2 mengsel van gekoeld Matrigel: Fosfaat gebufferde saline (PBS). </li><li> Houd de Matrigel-celsuspensie op ijs voorafgaand aan injectie in de alvleesklier. </li></ol> Opmerkingen: Om snelle stolling van Matrigel waarborgen, verminderen de volume PBS met het volume van de celpellet. Handvat Matrigel met ijskoude instrumenten en spuiten te allen tijde stollen vóór injectie te voorkomen. De voorgestelde aantal cellen is een leidraad en moet empirisch worden bepaald voor elke cellijn. 3. Muis Voorbereiding <ol><li> Verdoven van de muis met behulp van geïnhaleerd 2-3% isofluraan. Bepaal de diepte van de anesthesie door een gebrek aan pedaal reflex een zachte teen knijpen. </li><li> Breng smeermiddel aan op de ogen om uitdroging te voorkomen. </li><li> Plaats de muis op zijn rug op een 37 ° C verwarming pad en zet de muis voorzichtig naar de linkerkant van de buik te verhogen. </li><li> Bereid de buik met een 10% povidonjood-oplossing. </li></ol> Opmerkingen: Injectable anesthesie worden gebruikt in plaats van geïnhaleerde anesthesie. Pre-operatieve vasten niet noodzakelijk. 4. Laparotomie <ol><li> Met behulp van steriele chirurgische instrumenten maken een 1,5 cm incisie in de huid ongeveer 1 cm links lateraal van de middellijn. </li><li> Voeg een 1,5 cm incisie in de onderliggende buikspier. </li><li> Zoek de milt met behulp van de tang en verwijder voorzichtig de milt uit de buikholte. Beveilig de milt langs een steriel wattenstaafje om de onderliggende alvleesklier bloot. </li><li> Zoek de staart van de pancreas naast de milt. </li><li> Met behulp van een 29 G 0,3 ml insulinespuit Injecteer 20 ul van het Matrigel-celsuspensie in de pancreas. </li><li> Na injectie, houd de injectiespuit in de alvleesklier voor 30-60 seconden totdat de Matrigel is gestold. Deze belangrijke stap minimaliseert cel lekkage. </li><li> Inspecteer de injectieplaats te verzekeren geen lekkage optrad. </li><li> Stuur de milt en pancreas de buikholte. </li></ol> Opmerking: Let er op dat aanprikken van de dorsale zijde van de alvleesklier, die dun kan zijn. 5. Buikwand Sluiting <ol><li> Sluit de buikspieren van de muis met een absorbeerbare gevlochten 4-0 hechtdraad met een ronde naald met behulp van een continue steek. </li><li> Sluit de externe huid met een niet-absorbeerbare monofilament 6-0 hechtdraad met een cutting naald met behulp van een continue steek. </li><li> Verwijder de muis uit de ingeademde verdoving ingespoten 0.05-0.1 mg / kg subcutaan buprenorfine. </li><li> Laat de muis om te herstellen in zijn kooi geplaatst op een 37 ° C verwarmen pad met vrije toegang tot voedsel en water. Als muizen tonen tekenen van pijn, zoals hunching of beperkte mobiliteit, kan buprenorfine worden gegeven om de 12 uur over een 36 uurs periode. </li><li> Na wondgenezing (7-10 dagen), verdoven de muis en verwijder de externe hechtingen. </li></ol> 6. Bioluminescent Tracking van Pancreatic CancER Progression <ol><li> Verdoven van de muis met behulp van geïnhaleerd isofluraan. </li><li> Injecteren 150 mg / kg D-luciferine via staartader. </li><li> Plaats de muis in de bioluminescentie imaging systeem en vastleggen wit-licht-en bioluminescentie beelden zoals eerder beschreven. 14,15 </li><li> Verwijder de muis uit de geïnhaleerde verdoving en laten herstellen in zijn kooi. </li></ol> Opmerking: Bioluminescent beeldvorming is niet-invasief en kan periodiek worden uitgevoerd om tumorgroei kinetiek onderzoeken. Om afbeelding tumor in de pancreas staart is het belangrijk om de muis te zetten aan de linkerkant, zodat de tumor wijst naar de camera. We afgebeeld eenmaal per week met de frequentie verhoogd tot drie keer per week voor de experimentele eindpunt met een Lumina II beeldvormingssysteem (Perkin-Elmer, voorheen Caliper Life Sciences) actief Living Imaging 4.3.1 software met binning 4, FOV 12,5, F-stop 1, blootstelling 1-60 sec (bepaald door de hoogste expComposure zonder pixel verzadiging).

<ol><li>American Cancer Society. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Facts+and+Figures%22">Facts and Figures</a>. , American Cancer Society. Atlanta. (2013).</li>
<li>Hariharan, D., Saied, A., Kocher, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+mortality+rates+for+pancreatic+cancer+across+the+world%5BTitle%5D)+AND+%22HPB+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Analysis of mortality rates for pancreatic cancer across the world.</a> HPB (Oxford). 10, 58-62 (2008).</li>
<li>Li, D., Xie, K., Wolff, R., Abbruzzese, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Pancreatic cancer.</a> Lancet. 363, 1049-1057 (2004).</li>
<li>Oettle, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adjuvant+chemotherapy+with+gemcitabine+vs+observation+in+patients+undergoing+curative-intent+resection+of+pancreatic+cancer%3A+a+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Adjuvant chemotherapy with gemcitabine vs observation in patients undergoing curative-intent resection of pancreatic cancer: a randomized controlled trial.</a> JAMA. 297, 267-277 (2007).</li>
<li>Andersson, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gemcitabine+chemoresistance+in+pancreatic+cancer%3A+molecular+mechanisms+and+potential+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Scand.+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Gemcitabine chemoresistance in pancreatic cancer: molecular mechanisms and potential solutions.</a> Scand. J. Gastroenterol. 44, 782-786 (2009).</li>
<li>Angst, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescence+imaging+of+angiogenesis+in+a+murine+orthotopic+pancreatic+cancer+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Imaging+Biol%22%5BJournal%5D)">Bioluminescence imaging of angiogenesis in a murine orthotopic pancreatic cancer model.</a> Mol. Imaging Biol. 12, 570-575 (2010).</li>
<li>Angst, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-myc+downstream+regulated+gene-1+expression+correlates+with+reduced+pancreatic+cancer+growth+and+increased+apoptosis+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">N-myc downstream regulated gene-1 expression correlates with reduced pancreatic cancer growth and increased apoptosis in vitro and in vivo.</a> Surgery. 149, 614-624 (2011).</li>
<li>Hotz, H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+orthotopic+nude+mouse+model+for+evaluating+pathophysiology+and+therapy+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">An orthotopic nude mouse model for evaluating pathophysiology and therapy of pancreatic cancer.</a> Pancreas. 26, 89-98 (2003).</li>
<li>Partecke, L. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+syngeneic+orthotopic+murine+model+of+pancreatic+adenocarcinoma+in+the+C57%2FBL6+mouse+using+the+Panc02+and+6606PDA+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">A syngeneic orthotopic murine model of pancreatic adenocarcinoma in the C57/BL6 mouse using the Panc02 and 6606PDA cell lines.</a> Eur. Surg. Res. 47, 98-107 (2011).</li>
<li>Hingorani, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preinvasive+and+invasive+ductal+pancreatic+cancer+and+its+early+detection+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Preinvasive and invasive ductal pancreatic cancer and its early detection in the mouse.</a> Cancer Cell. 4, 437-450 (2003).</li>
<li>Sloan, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sympathetic+nervous+system+induces+a+metastatic+switch+in+primary+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The sympathetic nervous system induces a metastatic switch in primary breast cancer.</a> Cancer Res. 70, 7042-7052 (2010).</li>
<li>Wang, X., McManus, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentivirus+production%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Lentivirus production.</a> J. Vis. Exp. (32), e1499(2009).</li>
<li>Morizono, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentiviral+vector+retargeting+to+P-glycoprotein+on+metastatic+melanoma+through+intravenous+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Lentiviral vector retargeting to P-glycoprotein on metastatic melanoma through intravenous injection.</a> Nat. Med. 11, 346-352 (2005).</li>
<li>Saha, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescence+imaging+of+tumor+hypoxia+dynamics+of+breast+cancer+brain+metastasis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescence imaging of tumor hypoxia dynamics of breast cancer brain metastasis in a mouse model.</a> J. Vis. Exp. (56), e3175(2011).</li>
<li>Lim, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+tumor+metastases+and+osteolytic+lesions+with+bioluminescence+and+micro+CT+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Monitoring tumor metastases and osteolytic lesions with bioluminescence and micro CT imaging.</a> J. Vis. Exp. (52), e2775(2011).</li>
<li>Burton, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenovirus-mediated+gene+expression+imaging+to+directly+detect+sentinel+lymph+node+metastasis+of+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Adenovirus-mediated gene expression imaging to directly detect sentinel lymph node metastasis of prostate cancer.</a> Nat Med. 14, 882-888 (2008).</li>
<li>Vezeridis, M. P., Doremus, C. M., Tibbetts, L. M., Tzanakakis, G., Jackson, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+and+metastasis+following+orthotopic+transplantation+of+human+pancreatic+cancer+in+the+nude+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Invasion and metastasis following orthotopic transplantation of human pancreatic cancer in the nude mouse.</a> J. Surg. Oncol. 40, 261-265 (1989).</li>
<li>Fu, X., Guadagni, F., Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+metastatic+nude-mouse+model+of+human+pancreatic+cancer+constructed+orthotopically+with+histologically+intact+patient+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">A metastatic nude-mouse model of human pancreatic cancer constructed orthotopically with histologically intact patient specimens.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89, 5645-5649 (1992).</li>
<li>Reyes, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+xenografts+of+human+pancreatic+carcinomas+acquire+genetic+aberrations+during+dissemination+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Orthotopic xenografts of human pancreatic carcinomas acquire genetic aberrations during dissemination in nude mice.</a> Cancer Res. 56, 5713-5719 (1996).</li>
<li>Kim, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+orthotopic+and+heterotopic+human+pancreatic+cancer+xenografts+in+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Generation of orthotopic and heterotopic human pancreatic cancer xenografts in immunodeficient mice.</a> Nat Protoc. 4, 1670-1680 (2009).</li>
<li>Furukawa, T., Kubota, T., Watanabe, M., Kitajima, M., Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+%22patient-like%22+treatment+model+of+human+pancreatic+cancer+constructed+using+orthotopic+transplantation+of+histologically+intact+human+tumor+tissue+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A novel "patient-like" treatment model of human pancreatic cancer constructed using orthotopic transplantation of histologically intact human tumor tissue in nude mice.</a> Cancer Res. 53, 3070-3072 (1993).</li>
<li>Lewis, C. E., Pollard, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+role+of+macrophages+in+different+tumor+microenvironments%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Distinct role of macrophages in different tumor microenvironments.</a> Cancer Res. 66, 605-612 (2006).</li>
<li>Brembeck, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mutant+K-ras+oncogene+causes+pancreatic+periductal+lymphocytic+infiltration+and+gastric+mucous+neck+cell+hyperplasia+in+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The mutant K-ras oncogene causes pancreatic periductal lymphocytic infiltration and gastric mucous neck cell hyperplasia in transgenic mice.</a> Cancer Res. 63, 2005-2009 (2003).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen.

Hier beschrijven we een orthotopic model voor longitudinale beoordeling van pancreastumor ontwikkeling en progressie. Primaire tumorgroei kinetiek reproduceerbaar zijn (figuur 3) en kan niet-invasief bewaakt worden gebruikt bioluminescentie van luciferase-gemerkte cellen, bijvoorbeeld voor de analyse van tumorrespons om nieuwe anti-alvleesklierkanker therapeutica. In overeenstemming met de menselijke ziekte, het model toont lokale alvleesklier invasie (figuur 4A), die onderzoek...

Alvleesklierkanker is de vierde belangrijkste oorzaak van kanker-gerelateerde sterfte, met een 5-jaarsoverleving van 4-6%. 1,2 Slechts 15% van de patiënten wordt de diagnose vroeg genoeg in de ziekte in aanmerking te komen voor een operatie, en tumoren terugkeren in&gt; 80% van die patiënten. 3,4 Gemcitabine wordt gebruikt voor de behandeling van pancreatische adenocarcinomen, echter chemoresistance is gebruikelijk en vaak de drug heeft weinig invloed op de totale overleving. 5 nieuwe farmacologische strategieën van alvleesklierkanker te behandelen zijn kritisch nodig. Hun ontwikkeling hangt af van aanzienlijk verbeterd begrip van de belangrijkste stappen van de progressie van de ziekte die gevoelig zijn voor therapeutische interventie kan zijn. Orthotopische modellen van pancreaskanker emuleren belangrijke aspecten van de menselijke ziekte, waardoor ze ideaal tools om de biologie van alvleesklierkanker. 6-9 In tegenstelling tot in vitro cel-gebaseerde testen van pancreaskanker celgedrag eend subcutaan in vivo modellen van pancreaskanker, orthotopische modellen laten onderzoeken van tumorcel interacties met de alvleesklier micro-omgeving. De kinetiek van de progressie van de ziekte zijn zeer reproduceerbaar in orthotopic modellen en voordoen over een korte tijd (weken), waardoor ze zeer geschikt voor pre-klinische testen van nieuwe therapieën. Dit in tegenstelling tot transgene modellen waarbij ziektebegin optreedt over een langere en variabele tijd (maanden tot 1 jaar). 10 Bij gebruik met meer agressieve cellijnen orthotopische modellen van alvleesklierkanker patronen van spontane metastase gelijk aan die in patiënten. 8 Expressie van bioluminescentie reporter genen zoals vuurvliegluciferase vergemakkelijkt longitudinale controle van de tumorgroei, metastatische verspreiding, herhaling en de respons op therapie. 6,11 Hier beschrijven we een orthotopic model van pancreaskanker die Matr gebruikigel cellen voor gelokaliseerde aflevering en in vivo bioluminescentie voor niet-invasieve monitoring van tumorprogressie. Dit orthotopic model van pancreaskanker maakt niet-invasieve analyses van progressie van de ziekte en de reactie op therapeutische interventies in syngene of xenograftmodellen.

<table><tbody><tr><td>Clean Bench coat</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Verwarmingskussen</td><td></td><td></td><td>Instellen op 37 &deg;C </td></tr><tr><td>Ivis Lumina ll Bioluminescent imager</td><td>Caliper</td><td></td><td>Alternatieve bioluminescente beeldvormingssystemen omvatten In vivo F PRO (Carestream) en Photon Imager (Biospace Lab)</td></tr><tr><td>Dissectie schaar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Iris forceps (gekarteld)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Naaldhouder</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>27 G 0,3 ml insulinesyringe</td><td>Terumo</td><td>T35525M2913</td><td></td></tr></tbody></table>

bioluminescent orthotope model van pancreaskanker progression

Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression

<p class="jove_content"&gt; Alvleesklierkanker heeft een extreem slechte vijf-jaars overlevingskans van 4-6%. Nieuwe therapeutische opties worden kritisch nodig en afhankelijk van verbeterde begrip van alvleesklierkanker biologie. Om beter inzicht in de interactie van kankercellen met de alvleesklier micromilieu, demonstreren we een orthotopic model van pancreaskanker die niet-invasieve monitoring van de progressie van kanker toelaat. Luciferase-tagged alvleesklierkanker cellen worden geresuspendeerd in Matrigel en afgeleverd in de pancreas staart tijdens laparotomie. Matrigel stolt bij lichaamstemperatuur om lekkage van kankercellen tijdens injectie te voorkomen. Primaire tumorgroei en metastase naar verre organen worden na een injectie van het luciferase substraat luciferine, met<em&gt; In vivo</em&gt; Beeldvorming van bioluminescentie emissie van de kankercellen.<em&gt; In vivo</em&gt; Beeldvorming kan ook worden gebruikt om primaire tumor recidief na resectie te volgen. Dit orthotope model is geschikt voor zowel syngene en xenograft modellen worden gebruikt in pre-klinische studies om het effect van nieuwe anti-kanker geneesmiddelen op de groei van de primaire pancreas tumor en metastase te onderzoeken.</p&gt;

Deze methode beschrijft een orthotopic model van pancreaskanker behulp van chirurgische procedures, inclusief inductie van anesthesie, laparotomie, injectie van kankercellen in Matrigel en abdominale sluiting (Figuur 1A). De geïnjecteerde cellen vormen een luchtbel in het oppervlak van de alvleesklier (Figuur 1B). Alvleesklier kanker progressie kan niet-invasief bewaakt met in vivo bioluminescentie van kankercel proliferatie en verspreiding (Figuur 2) te vinden...

Beter begrip van alvleesklierkanker biologie is kritisch nodig om de ontwikkeling van betere therapeutische opties om pancreaskanker te behandelen mogelijk te maken. Om aan deze behoefte te pakken, zien we een orthotopic model van pancreaskanker die niet-invasieve monitoring van de progressie van kanker maakt gebruik van<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminescentie beeldvorming.

Bioluminescent Orthotope Model van pancreaskanker Progression

Pancreatic cancer has an extremely poor five-year survival rate of 4-6%.  New therapeutic options are critically needed and depend on improved ...

Het algemene doel van deze procedure is het prepareren van een orthotoop muismodel voor pancreaskanker, waarbij in vivo bioluminescentie-beeldvorming wordt gebruikt om de tumorontwikkeling niet-invasief te monitoren. Dit wordt bereikt door eerst luciferase-gelabelde kankercellen in Matrigel te resuspenderen. De tweede stap is het uitvoeren van een laparotomie om de buikholte te openen en de pancreas te lokaliseren en te fixeren.Vervolgens wordt een suspensie van tumorcellen in matrigel in de pancreas geïnjecteerd. De laatste stap is het terugplaatsen van de pancreas en het sluiten van de buikholte met hechtingen. Uiteindelijk wordt bioluminescentie-imaging gebruikt om de tumorprogressie te monitoren en de respons op therapeutische interventies te volgen.Het belangrijkste voordeel van dit model ten opzichte van in vitro-gebaseerde celassays of subcutane modellen voor pancreaskanker is dat het ons in staat stelt om de interacties tussen de pancreastumorcellen en de pancreasmicro-omgeving echt te onderzoeken. De kinetiek van de ziekteprogressie in dit model zijn zeer reproduceerbaar en vinden plaats binnen een kort tijdsbestek, waardoor dit model nuttig is voor het onderzoeken van nie

bioluminescent-orthotopic-model-of-pancreatic-cancer-progression

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Een methode voor het betrouwbaar enten van luciferase-gemerkte menselijke maligne perifere zenuwschede tumorcellen in de heupzenuw van immunodeficiënte muizen wordt beschreven. Het gebruik van bioluminescentie imaging om een ​​goede invoering van de tumor enten en criteria voor willekeurige scheiding van dieren in studiegroepen aan te tonen worden ook besproken.

Orthotope Xenografting van de Mens Luciferase-label maligne perifere zenuwschede tumorcellen voor In vivo Het testen van de kandidaat-therapeutische middelen

Bioluminescentie beeldvorming van hypoxie induceerbare factor-1α-activiteit wordt toegepast op intracraniale tumor hypoxie ontwikkeling in een borstkanker hersenmetastasen muismodel te controleren.

In vivo bioluminescentie van Tumor Hypoxie Dynamiek van Borstkanker hersenmetastasen in een muismodel

This video demonstrates the protocol for implanting green fluorescent protein-expressing pancreatic cancer cells orthotopically into the pancreas of the mouse. The orthotopic mouse model helps in investigating the efficacy of novel therapeutics on primary and metastatic tumors.

Fluorescent Orthotopic Mouse Model: Implanting GFP Expressing Cancer Cells into Mouse for Assessing Tumor Progression In Vivo

This video demonstrates an orthotopic model of pancreatic cancer that utilizes Matrigel for localized cell delivery and in vivo bioluminescence imaging for non-invasive monitoring of tumor progression. The orthotopic model is suited to both syngeneic and xenograft models and could be used in pre-clinical trials to investigate the impact of novel anti-cancer therapeutics on the growth of the primary pancreatic tumor and metastasis.

Bioluminescent Orthotopic Pancreatic Cancer Mouse Model: A Non-invasive Technique to Monitor Cancer Progression in Mice

Source: Marina Arantes Radicchi1, Victor Carlos Mello1, Victória Paz Machado1, Márcia Cristina Oliveira da Rocha1, Jaqueline Vaz de Oliveira1, Luana Cristina Camargo1,2, Luís Alexandre Muehlmann1, Ricardo Bentes Azevedo1, Sônia Nair Bao1, João Paulo Figueiró Longo11Institute of Biological Sciences, University of Brasília, 2Department of Basic Psychological Processes, Institute of Psychology, University of BrasíliaThis video demonstrates the procedure for tracking tumor progression in vivo by...

Bioluminescent Imaging of Breast Tumor Progression in a Female Mouse Model

Het doel van dit protocol is om dynamisch contrastversterkte magnetische resonantie beeldvorming (DCE-MRI) toe te passen voor ortotopische pancreatische tumor xenografts bij muizen. DCE-MRI is een niet-invasieve methode om de microvaten in een doelweefsel te analyseren en is nuttig om de vasculaire respons in een tumor na een nieuwe therapie te beoordelen.

Dynamisch contrast versterkte MRI van een orthotope pancreaskanker Muis Model

Een procedure om groen fluorescerende eiwit-expresserende pancreaskankercellen (PANC-1 GFP) orthotopisch in de pancreas van Balb-c Ola Hsd-Fox1nu muizen te implanteren om tumorprogressie en metastase te beoordelen, wordt hier gepresenteerd.

Fluorescerende orthotope Muis Model van pancreaskanker

Dit protocol beschrijft de oprichting van een tumor-lager muismodel om te controleren van de progressie van de tumor en angiogenese in real-time door dubbele bioluminescentie beeldvorming.

Dubbele bioluminescentie beeldvorming van tumor progressie en angiogenese

In vivo beeldvorming met hoge resolutie van de alvleesklier werd vergemakkelijkt met het pancreas intravital imaging venster.

Gestabiliseerde longitudinale in vivo cellulaire visualisatie van de alvleesklier in een murien model met een pancreas intravital imaging venster

We presenteren een protocol om een minimaal invasief orthotopisch pancreaskankermodel te genereren door echogeleide injectie van menselijke pancreaskankercellen en de daaropvolgende monitoring van tumorgroei in vivo door echografie.

Generatie van een orthotopisch xenotransplantaat van pancreaskankercellen door echogeleide injectie

Dit protocol gebruikt een meerkamerbed voor parallelle magnetische resonantiebeeldvorming (MRI) van maximaal vier dieren om pancreasadenocarcinoomtumoren te detecteren in genetisch gemodificeerde muismodellen. Dit multianimal MRI-protocol is snel en kosteneffectief voor het opsporen en meten van tumoren, wat de dierselectie voor preklinische studies en longitudinale monitoring van tumorgroei vergemakkelijkt.

Multianimal Magnetic Resonance Imaging voor tumormetingen in alvleesklierkanker muismodellen

Leer een orthotopisch muismodel van pancreaskanker met bioluminescentiebeeldvorming voor niet-invasieve monitoring van tumorprogressie. Deze methode ondersteunt onderzoek naar nieuwe therapeutische strategieën.

Bioluminescent Orthotope Model van pancreaskanker Progression

Meer video's verkennen