Helsinki Rat Microsurgical Sidewall aneurisme Model

1Neurosurgery Research Group, University of Helsinki, Helsinki, Finland
Published 10/12/2014
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Summary

Cite this Article

Copy Citation

Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemelä, M., Frösen, J. The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model. J. Vis. Exp. (92), e51071, doi:10.3791/51071 (2014).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Eksperimentelle saccular aneurisme modeller er nødvendige for at teste nye kirurgisk og endovaskulær behandlingsmuligheder og enheder, før de indføres i klinisk praksis. Endvidere er der behov for eksperimentelle modeller til at belyse den komplekse aneurisme biologi fører til brud på saccular aneurismer.

Flere forskellige typer af eksperimentelle modeller for saccular aneurismer er blevet oprettet i forskellige arter. Mange af dem kræver dog særlige færdigheder, dyrt udstyr eller særlige miljøer, hvilket begrænser deres udbredte anvendelse. En enkel, robust og billig forsøgsmodel er nødvendig som et standardiseret værktøj, der kan bruges på en standardiseret måde i forskellige institutioner.

Den mikrokirurgisk rotte abdominale aorta sidevæg aneurisme model kombinerer muligheden for at studere både nye endovaskulær behandling strategier og det molekylære grundlag for aneurisme biologi på en standardiseret og billigmåde. Standardiserede transplantater ved hjælp af form, størrelse og geometri er høstet fra en donor rottens nedadgående thorakalaorta og derefter transplanteres til en syngene modtager rotte. De aneurismer er syet ende-til-side med kontinuert eller afbrudt 9-0 nylonsuturer til den infrarenale abdominale aorta.

Vi præsenterer trin-for-trin procedurer, information om det nødvendige udstyr, og diskutere vigtige anatomiske og kirurgiske detaljer for en vellykket mikrokirurgisk oprettelse af en abdominal aorta aneurisme dæksiden i rotten.

Introduction

Brud på en saccular cerebral arterie aneurisme forårsager livstruende blødning fører til slagtilfælde, permanent neurologisk skade eller død. Brud kan forhindres ved enten mikrokirurgiske klipning eller endovaskulær aneurisme okklusion. Er endnu ikke etableret en medicinsk behandling for at forhindre aneurismevækst og brud.

Eksperimentelle modeller for saccular aneurismer er nødvendig for at studere biologi arterielle aneurismer og til afprøvning af nye terapeutiske enheder og strategier. Til disse formål har flere forskellige modeller i forskellige arter er blevet udviklet og offentliggjort 1. Større aneurisme modeller i grise, hunde og kaniner fortrinsvis bruges til at teste endovaskulære innovationer i komplekse aneurisme arkitektur 1,2. Murine aneurisme modeller, på den anden side tillade teste forskningsspørgsmål i genetisk modificerede arter 3,4 og lette afklaring af aneurisme biologi på cellulære og molekylæreniveau langt bedre end større arter 1. Selv om endovaskulær trans-carotis og trans-iliaca enhed indsættelse er begrænset til større rotter (> 400-500 g), og stents mindre end 2,0 mm og 1,5 mm i diameter 5,6, kan stents også placeres ved direkte indsættelse i den abdominale aorta segment, der huser de eksperimentelle aneurismer. Tidligere arbejde med rotten mikrokirurgisk abdominale aorta sidevæg aneurisme model viste sin gennemførlighed i afprøvning af nye emboliske enheder, og dens anvendelse i at studere det molekylære grundlag for aneurisme biologi 3,7.

Mange af de aktuelt offentliggjorte eksperimentelle saccular aneurisme modeller kræver dyrt udstyr, særlige miljøer (f.eks sterile operationsrum med fluoroskopi formåen), interventionel radiologi kompetence, eller brug af dyre arter. Disse krav begrænser den udbredte anvendelse af disse modeller, og føre til anvendelse af forskellige modeller i forskellige laboratorier, hvor Makes sammenligningen af ​​data og meta-analyse vanskeligt, hvis ikke umuligt. En enkel, robust og billig forsøgsmodel er nødvendig som et standardiseret værktøj, der kan bruges på en standardiseret måde i forskellige laboratorier for at få sammenlignelige resultater fra forskellige institutioner. Til dette formål, skabte vi rotteaorta sidevæg saccular arteriel aneurisme model.

Formålet med denne rapport er at præsentere trin-for-trin procedurer, information om det nødvendige udstyr, og for at diskutere vigtige anatomiske og kirurgiske karakteristika for en vellykket mikrokirurgisk skabelse af abdominale aorta sidevæggen aneurismer hos rotter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

BEMÆRK: Mand Wistarrotter (gennemsnitlig kropsvægt: 356 ± 44 g 10-14 uger gamle) blev anbragt i dyret værelse på 22-24 ° C og tolv timers lys / mørke-cyklus med fri adgang til pellet kost, regelmæssig postevand og også modtaget human måde i overensstemmelse med de institutionelle retningslinjer. Forsøgene blev gennemgået og godkendt af Udvalget for dyrevelfærd ved universitetet i Helsinki, Finland.

BEMÆRK: I det følgende demonstration vores kirurgisk metode er som følger: Bedøver rotte vægt tilpasset subkutan injektion medetomidinhydrochlorid (0,5 mg / kg) og intraperitoneal injektion af ketamin-hydrochlorid (50 mg / kg). Test for manglen på en tå-knivspids refleks at bekræfte, at rotten er fuldt bedøvet. Anvend øjet salve, klip den kirurgiske sted, og rengør huden med et egnet desinfektionsmiddel, for eksempel chlorhexidin, enten alkohol eller vand. Vask hænder, sat på beskyttelsesbeklædning, et hoved cover og ansigtmaske, og sterile kirurgiske handsker. Har en kirurgisk assistent støtte i at bevare aseptiske kirurgi forhold og for at dokumentere de kirurgiske egenskaber (som anført i tabel 1). Overvåg dybden af ​​anæstesi hver 15 min under operation ved at følge respirationsfrekvens, hjertefrekvens og reaktion på skadelig stimulering (toe pinch test). Subkutan injektion af buprenorphin (0,03 mg / kg) blev givet for postoperativ analgesi og om nødvendigt gentages hver 12 timer.

1. Hardware, hjælpematerialer, og Positionering

  1. Hold små dyr kirurgi værelse rolige, aseptisk, og holde rumtemperaturen på 23 +/- 3 ° C. For at udføre den eksperimentelle aneurisme kirurgi følgende minimal udstyr er nødvendigt:
    1. Brug en bordplade kirurgisk mikroskop ideelt udstyret med en assistent rækkevidde og digital mikroskop kamera. Brug porøs genanvendelige drift overflade og rengøringsvenlig instrument overflade for at beskytte laboratoriet bænken.
    2. Brug følgende almindelige kirurgiske instrumenter: kirurgiske sakse, væv pincet, blødt væv sprederen eller selvstændige fastholde retractoren og to Mosquito kirurgiske klemmer.
    3. Brug en grundlæggende mikrokirurgisk instrument sæt, der omfatter: Curved mikronålen indehaver, en buet og to lige microforceps, og et lige eller buede microscissor.
    4. Hold mikrokirurgiske instrumenter i en nyre fad fyldt med sterilt saltvand for at holde instrumentet ikke-klæbrig og ren under operationen. Den nyre fad er polstret med gummimåtte eller en kirurgisk handske at forhindre skader på spidserne af mikro-instrumenter. Sørg for, at alle leverancer er sterile og proceduren er udført med aseptisk teknik i henhold til de gældende anbefalinger for overlevelse kirurgi på forsøgsdyr
    5. Desuden kan du bruge en vaskulær klip applikator og tre atraumatisk midlertidige vaskulære klemmer. Det er vigtigt, at klemmerne anvendes, har en afsluttende effekt lav til at forhindre skade på den meget tynde væg af rotte-aorta. Også forberede en lineal med en halv millimeter skala barer, en lille farvet gummipude, og en kort stump nål.
    6. Placer rotterne i en liggende stilling, immobilisere både foran og bagpoterne med kirurgisk tape uden at strække eller kompression til huden, og bøje ryggen med en tyk markør eller cautery pen ved at placere den under tømmer region af ryggen. Det er vigtigt at få så meget lumbal lordose som muligt med henblik på at forbedre retroperitoneal eksponering og adgang til den infrarenale aorta, hvilket letter mikrokirurgisk anastomose. Denne placering anbefales til abdominale aorta aneurisme skabelse, men ikke nødvendig for thorax graft høst.

2. Graft Høst

  1. Under generel anæstesi, skal du åbne brysthulen (start graft iskæmi tid). Påfør en skadelig tå knivspids for at bekræfte, at rotten ikke reagerer, før du fortsætter med følgende trin. Skær igennem midventral bugvæggen, identificere membranen lige over leveren, og skære bindevæv i bunden af ​​membranen for at give adgang til brystkassen. Med store saks, stump nedad, skære igennem ribben bare en centimeter til venstre og højre side af brystkassen midterlinjen og åbne brysthulen. Lungerne mobiliseres til højre side af hjertet. Sacrifice rotterne ved overdosering med intrakardial injektion af ketamin hydrochloride.Pulmonary kuffert, venstre subclavia vene, venstre kraniel hulvene og azygous vene forstyrre høsten af ​​den proximale thorakalaorta.
  2. Caudale til de fremtrædende blodårer der er en god indgang til at starte dissektion af nedadgående thorakalaorta hjælp af mikro-saks og microforceps.
  3. Spore thorakalaorta Back fra den dorsale væg af brystkassen opad til aortabuen ved forsigtig stump tilbagetrækning og dissektion med Mosquito kirurgisk klemme.
  4. Clamp og derefter skære vener med en saks. Vedligehold klemmerne på venerne og bruge som en retraktor at eksponere den underliggende aortabuen.
  5. Placer en ikke-absorberbar 6-0 silkeligatur lige over den første interkostale arterie forlader aorta.
  6. Skær aorta descendens lige under den venstre arteria subclavia og derefter under ligatur. Trimning kan gøres for at få en vinkelret standardiseret aneurisme geometri, eller hvis det er nødvendigt, for at få en bestemt vinkel mellem aksen af ​​aneurismen og aorta. Mål transplantatet i dens bredde og længde.
    BEMÆRK: Høstet podninger kan enten straks transplanteret ind modtagende rotter eller videreforarbejdes til at opnå decellularization af implantatet væg. Decellulariseret transplantater kan opbevares ved -4 grader Celsius, indtil re-implantation på et senere tidspunkt (figur 1). The decellularization aneurismens væg har vist sig at prædisponere aneurismet for at forstørre 11.

3. Graft Decellularization

  1. Frys donor grafts i phosphatpufret saltvand ved 4 ° C.
  2. Den næste dag, optø transplantaterne, skylles med renset og deioniseret vand ved stuetemperatur, og der inkuberes i 10 timer ved 37 ° C i 0,1% natriumdodecylsulfat.
  3. Endelig vaskes natriumdodecylsulfat-behandlede transplantater tre gange med forsigtig omrøring, genfryses i phosphatpufret saltvand, og holde ved -4 ° C indtil anvendelse.

4. aneurisme Creation

  1. Dissektion af abdominal aorta
    1. Efter at dyret er blevet bedøvet, klippe pelsen fra operationsstedet og rense huden med et egnet desinfektionsmiddel. Test for manglen på en tå-knivspids respons inden incision i huden. Start snittet 1cm proksimalt til kønsorganerne jegn midventral position (start driftstid). Adskil forsigtigt huden fra de underliggende muskler. End dissektion 1-2 centimeter under brystbenet.
    2. Forsigtigt, men fast træk op de underliggende mavemuskler at undgå skader på de underliggende organer. Forlæng langsgående snit langs linea alba opad xiphoideus proces og ender i haleretningen på niveauet af blæren.
    3. Gælder forsigtigt pres på blæren at tømme det for at lette adgangen til retroperitoneal rum.
    4. Flyt de små tarmene og den fremtrædende coecum til højre eller venstre. Identificer tyktarmen nemlig faldende kolon til venstre nederst i bughulen.
    5. Skær ledbånd mellem tyndtarmen og nedstigende tyktarm i craniale retning for at tillade større eksponering af den dorsale kropsvæggen. Placer en selvstændig fastholde retraktor at holde tarme fra hinanden.
    6. Den ideelle placering af ende-til-side aneurisme anastomose Is findes på niveau mellem nyre og iliolumbar årer. Den abdominale aorta ligger retroperitoneal indlejret i fedtvæv. Under dissektion være særlig opmærksom på de parrede næsten gennemsigtige urinlederne og testikel fartøjer.
    7. Hvis yderligere tilbagetrækning af tarmene er nødvendig, bruger større gaze swaps. Lumbal lordose induceret under positionering ved at placere en kautering kuglepen eller lignende genstand under den nederste bagsiden af ​​rotte, reducerer behovet for tarm tilbagetrækning.
    8. Den ventrale overflade af den dorsale kroppens væg er dækket med en tynd parietale peritoneum. Når denne åbnes, visualisere aorta lige under. Under forsigtig skarp og stump dissektion af den abdominale aorta fra tilstødende store vener fatte kun adventitia at undgå skader på karvæggen.
    9. Sjældent opstår små lænde arterier som segmentær fartøj fra den dorsale overflade af den abdominale aorta og interferere med forberedelse. Ligering og opskæring af fartøjet er NeeDED at undgå tilbageskridt siver under aneurisme suturering. Anvendelse af buede mikro-pincet kan lette ligatur placering i dybden.
  2. Ende-til-side anastomose
    1. Sæt en farvet gummipude under den abdominale aorta og polstre den med en lille gaze. Fjern løst bindevæv og adventitia på niveau med den planlagte anastomose stedet.
    2. Klem abdominale aorta distalt for anastomosen, derefter proksimale (start aorta fastspænding tid). Dette sikrer en fast fyldning af beholderen og letter efterfølgende arteriotomi.
    3. Udfør arteriotomien hjælp af enten lige eller buede mikrosakse. En mikro-pincet holder en meget lille stykke af karvæggen at skære en elliptisk form.
    4. Skyl arterie grundigt med saltvand i begge retninger ved hjælp af en stump spids nål.
    5. Placer de første to suturer i denne ende-til-side anastomose på den proximale og distale ende af arteriotomien (start anastomose tid). Undgå at gribe fat i karvæggen med mikro-pincet når det er muligt. Sørg for, at hver sutur er placeret gennem alle lag af karvæggen.
    6. Udfør suturering enten som kontinuerlige eller afbrudte suturer. Hvis afbrudt suturering vælges derefter placere bagsiden ni o `clock sutur først. Efterfølgende suturer kan indbyrdes afstand startende støder op til den første sutur. Tag fat adventitia omhyggeligt. Undgå klemme / gribning af intima.
    7. Når bagvæggen er færdig, skal du kontrollere endoluminale del af anastomosen for fejlplacerede suturer. Udfør de samme procedurer i samme rækkefølge på forsiden. Sørg for, at den første af i alt tre knob pr sutur er fast, men ikke for stramt.
  3. Hæmostase og lukning
    1. Efter afslutningen på anastomose er afsluttet (ultimo anastomosis tid), skyl stedet med saltvand og fjern den distale klemme første til at give mulighed for tilbageløb (slutningen aorta fastspænding tid og ende graft iskæmi timig).
    2. Hvis der opstår indlysende blødning fra tilbageløb en ekstra søm kan være nødvendig (starttidspunkt for hæmostase). I tilfælde af mindre siver, opnå hæmostase med blide tryk over blødningen websted ved hjælp af et lille stykke af en gaze.
    3. Tag den proksimale vaskulær klemme, skyl anastomosen websted én gang mere, og afbrød de resterende ender af ligatur på aneurisme kuppel.
    4. Bekræft åbenheden af ​​aneurismet ved observation af øget volumen på aneurismet under spidsbelastning arteriel puls bølge. Vurdere distale abdominale arterie åbenhed gennem det direkte "malkning test".
    5. Fjern plastik ark og den lille gaze nedenunder. Den pulserende blod hvirvel i den oprettede aneurisme er klart synlig.
    6. Dæk syningslinjerne omkring anastomosen med små stykker af fedtvæv eller Spongostan for ekstra hæmostase hvis små oser stadig er til stede (sluttidspunktet for hæmostase).
    7. Fjern bløddelene sprederen og gaze podninger de.Placer de små tarme, coecum, og fedtmasse tilbage i deres korrekte position.
    8. Luk midterlinjen mavemuskler ved hjælp af 5-0, 4-0 eller 3-0 resorberbare eller ikke-absorberbare suturer efterfulgt af hud sårlukning med kontinuerlig sutur teknik med 3-0 resorberbar polyfilament sutur (ultimo drift tid). Bemærk: I tolereres vores erfaring rotter resorberbare hud suturer bedre end ikke-absorberbare monofilamenter suturer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

En pilot serie bestod af 14 rotter. Efterfølgende alt 84 dyr blev drives i henhold til den præsenterede protokol for adskillige forskningsprojekter mellem marts og september 2012 Yderligere 29 dyr tjente som donorer til arterielle saccular podninger. De resterende eksperimenter blev udført under anvendelse forbehandlede transplantater høstet og lagret fra tidligere forsøg med rotter af samme køn, stamme, vægt og alder.

Kropsvægt, samlede drift tid, aorta fastspænding tid, tid til anastomose skabelse, tid til hæmostase efter anastomose skabelse, graft iskæmi tid, og aneurisme dimensioner på tidspunktet for oprettelse (aneurisme bredde og længde) blev registreret og ekstraheret fra skriftlige Case Report Forms . Alle egenskaber er opsummeret og visualiseret i tabel 1 og figur 1.

Med undtagelse af et dyr, der undergik en anden operation på grund af trombose af abdominal aorta distalt for anastomosen webstedet der var ingen periprocedural dødelighed eller sygelighed. Mean driftstid var mindre end 52 minutter (52 ± 12 min). Hos dyr med transplantation af syngene aneurismer (n = 21) betyde transplantat iskæmi tid var 29 ± 7 min. Samlede gennemsnit aorta fastspænding tid var 25 ± 7 min. Aneurisme dimensioner viser sig at være konstant med ringe afvigelse af størrelse (gennemsnitlig bredde 2,5 ± 0,2 mm, og betyde længde 3,8 ± 0,2 mm).

De indsamlede data undergik beskrivende analyse og visualisering ved hjælp af statistisk software. Værdier er udtrykt som middelværdi ± standardafvigelse (SD) og 95% konfidensinterval (CI).

Figur 1
Figur 1:. Ikke-decellulariserede eller decellulariserede Grafts Ubehandlet indfødte donor podninger fra den torakale aorta straks re-implanteret i modtagerlandene rotter (1). Podninger at væredecellulariseret behandles med natriumdodecylsulfat (SDS) og opbevaret ved -4 grader Celsius, indtil re-implantation (2). Den histologiske panel viser længdesnit gennem en ubehandlet (venstre) og decellulariserede (højre) graftvæggen. Hematoxylin-eosinfarvning.

Figur 2
Figur 2: Kirurgiske karakteristika. Graferne visualisere fordelingen af enkelte dataværdier (små sorte prikker), data middelværdi (fed lang bar), og standardafvigelsen (fejlsøjler). Klik her for at se en større version af dette tal.

Karakteristisk Mean ± SD 95% CI øvre - nedre
Middellegemsvægt (gram) 363 47 350-373
Mean drift tid (minutter) 50 11 48-53
Mean aorta fastspænding tid (minutter) 25 7 23. - 27.
Mean anastomose tid (minutter) 18 6 16-19
Mean tid af hæmostase (minutter) 2 2 2 - 3
Mean graft iskæmi tid (minutter) 29 7 26-32
Mean aneurisme bredde (millimeter) 2.5 0.2 2,4-2,5
Mean aneurisme længde (mm) 3.7 0,5 3,5-3,8

Tabel 1: Kirurgiske kendetegn. SD = standardafvigelse; CI = konfidensinterval

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Fremskridt i vores forståelse af den komplekse biologi saccular cerebral arterie aneurisme afhænger af analyse af epidemiologiske og kliniske data, suppleret med laboratorieundersøgelser på patientprøver og eksperimentelt arbejde i dyremodeller 3,12,13.

Små dyr såsom rotter er i sagens natur forbundet med lavere omkostninger til eksperimenter og boliger, og reduceret behov for specialiseret udstyr. En gennemsnitlig samlede drift på mindre end 60 minutter for mikrokirurgisk oprettelse af en sidevæg aneurisme hos rotter er meget kortere end den tid, der anvendes til oprettelse af mere komplekse mikrokirurgisk venøs pose arteriel tvedeling aneurisme på kaniner og hunde 2,14,15. Fordelene ved lave omkostninger og hurtigere metoder til aneurisme skabelse kan lette ledning af studier med større antal eksperimenter og efterfølgende øget statistisk styrke. Desuden har de nuværende murine modeller blevet gennemført med succes at besvare researchfirmaerne h spørgsmål har brug for mere avancerede laboratoriemetoder, herunder transgene dyr 3,4. Ved brug af mus til skabelse af dæksiden aneurismer, man behøver at huske på, at de nødvendige afbrudt 11-0 suturer kræver yderligere mikrokirurgiske færdigheder. Udførelse af præsenterede aneurisme model i mus er også forbundet med højere dødelighed (30%, primært på grund af komplikationer i væskebalancen og anæstesi og mindre diameter (0,5-1 mm) af muse aorta) 3.

Grundlæggende principper for den rotte aneurisme modellen kan beherskes i en kort periode. Et indledende kursus i gnaver mikrokirurgi anbefales til de forskere uerfarne i at udføre dissektioner og sutur teknikker under et operativsystem mikroskop. Fremhævet vigtige skridt i den præsenterede protokol vil yderligere forenkle proceduren. Særlig forsigtighed bør udvises under dissektion af den abdominale aorta fra tilstødende store vener.

ntent "> Den lille perifere karsystem diameter af et mellemstort rotte gør trans-carotis og trans-iliaca endovaskulær anordning indsættelse vanskelig 5,6. Dog kan enhederne også placeres ved direkte abdominal aorta indsættelse eller direkte placering i den eksperimentelle aneurisme inden udgangen -til- stedet anastomosis 7,16. Volumetriske ændringer i hals rester og aneurisme geometri kan følge op med seriel og ikke-invasiv højfrekvente ultralyd, mikro-CT eller høj opløsning magnetisk resonans angiografi 16. Tidligere forsøg viste høj samlet åbentstående kar på 92,5% ved en median opfølgning på seks uger efter skabelse uden peri- eller intra-proceduremæssig antikoagulation og antiaggregation 3,7,16. Med undtagelse af et enkelt tilfælde betydelig vækst eller udvidelse af de eksperimentelle aneurismer blev ikke observeret og ingen af dem bristede 3.

Men hvis de høstede grafts decellulariserede de aneurismer DEMonstrate en heterogen mønster af trombose, rekanalisering, vækst og i sidste ende brud 11. Dyrkning aneurismer i den sidste undersøgelse viste markant adventitiale fibrose og inflammation, komplet væg forstyrrelser og øget neutrofil ophobning i uorganiseret intraluminal trombe. På denne måde tillader modellen at studere aneurismevækst og brud og kan potentielt anvendes til at vurdere biologiske responser induceret af embolisering enheder i voksende og ruptur-tilbøjelige aneurismer. Ingen af ​​de tilgængelige aneurisme modeller, der kan emboliserede ideelt udgør en menneskelig saccular cerebral arterie aneurisme eller gengive den nøjagtige patobiologi bag aneurismedannelse eller brud.

Det er fortsat et spørgsmål om forhandling, i hvilket omfang valget af transplantat (venøs eller arteriel pose) og valg af angioarchitecture (sidevæg eller tvedeling konstruktion) indflydelse på oversættelse af resultater til klinisk praksis. Bestemt forskellige modeller er optimale for forskelligeformål, og kan optimeres til et meget højt niveau i visse institutioner. Den præsenterede model vil ikke gøre andre modeller forældet. Det vil fortsat være nødvendigt, at en efterforsker til at vælge fra en bred vifte af forskellige tekniske modeller og dyr den, der passer bedst de eksperimentelle mål, praktiske overvejelser, og laboratoriemiljø.

Dog bør nogle eksperimenter ideelt udføres i en samme standardmodellen i forskellige institutioner og laboratorier, med henblik på at muliggøre en bedre sammenligning af data og enheder eller behandlinger. Til dato er der ingen retningslinjer for standardiserede test af intravaskulært udstyr forud for klinisk anvendelse, og dyremodeller forbliver underudnyttede 1. Standardiserede modeller vil få betydning, når multicenter randomiserede prækliniske forsøg også dukke op i dette forskningsfelt.

Mikrokirurgisk aneurisme skabelse tillader standardisering af graft oprindelse, volumen-til-åbning ratio, og forælder fartøjat aneurismet lang akse vinkel. Den præsenterede teknik har til formål at generere standardiserede aneurismer med minimal variation i aneurisme dimension, placering og relation til den forælder arterie. Denne høje grad af standardisering og de relativt lave omkostninger gør modellen et godt værktøj til at teste embolisering materialer og enheder, der testes derefter i andre mere komplicerede og dyre modeller.

Afslutningsvis præsenterede mikrokirurgisk dæksiden rotte aneurisme model er en hurtig, billig og konsekvent metode til at skabe eksperimentelle aneurismer, der er standardiseret ved hjælp af størrelse, form og geometriske konfiguration af aneurismet i forhold til moderselskabet arterie.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har ingen økonomisk eller forretningsmæssig interesse i nogen af ​​de stoffer, materialer eller udstyr, der anvendes.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medetomidine Any genericon
Ketamin Any genericon
Buprenorphine Any genericon
Phosphate buffered saline
Sodium dodecyl sulfate (0.1%)
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP824G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
6-0 non absorbable silk suture B. Braun, Germany C0761060
9-0 nylon micro suture B. Braun, Germany G1118471
Spongostan Ethicon Inc., USA MS0002
Operation microscope Leica , Germany M651
Digital microscope camera Sony, Japan SSC-DC58AP
Standard surgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.4
Microsurgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.5
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Temporary vascular clamps B. Braun, Germany FT250T
Graph Pad Prism statistical software  GraphPad Software, San Diego, California, USA V 6.02 for Windows

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).
  2. Marbacher, S., et al. Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. AJNR. American journal of neuroradiology. 32, 772-777 (2011).
  3. Frosen, J., et al. Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model. Neurosurgery. 58, 936-944 (2006).
  4. Marjamaa, J., et al. Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: high-resolution magnetic resonance imaging. at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries. Magn Reson Med. 55, 592-597 (2006).
  5. Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. The Journal of surgical research. 166-191 (2011).
  6. Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91, 393-395 (2005).
  7. Marjamaa, J., et al. Occlusion of neck remnant in experimental rat aneurysms after treatment with platinum- or polyglycolic-polylactic acid-coated coils. Surg Neurol. 71, 458-465 (2009).
  8. with the support of the NC3Rs. Aseptic Technique in Rodent Surgery. Newcastle University. cited 2014 Oct 3] Available from: http://www.procedureswithcare.org.uk/aseptic-technique-in-rodent-surgery (2014).
  9. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. Journal of investigative surgery : the official journal of the Academy of Surgical Research. 22, 445-451 (2009).
  10. Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new. (2011).
  11. Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45, 248-254 (2014).
  12. Frosen, J., et al. Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases. Stroke. 35, 2287-2293 (2004).
  13. Frosen, J., et al. Saccular intracranial aneurysm: pathology and mechanisms. Acta neuropathologica. 123-773 (2012).
  14. Ysuda, R., Strother, C. M., Aagaard-Kienitz, B., Pulfer, K., Consigny, D. A large and giant bifurcation aneurysm model in canines: proof of feasibility. AJNR Am J Neuroradiol. 33, 507-512 (2012).
  15. Sherif, C., et al. Microsurgical venous pouch arterial-bifurcation aneurysms in the rabbit model: technical aspects. Journal of visualized experiments : JoVE. (2011).
  16. Marjamaa, J., et al. High-resolution TOF MR angiography at 4.7 Tesla for volumetric and morphologic evaluation of coiled aneurysm neck remnants in a rat model. Acta Radiol. 52, 340-348 (2011).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats