3D Whole-hjärta Myocardial Tissue Analys

* These authors contributed equally
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 1 hour trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

Detta protokoll beskriver ett nytt förfarande för 3D-jämförelse av hel-hjärta myokardial vävnad med MRI. Detta är utformad för korrekt bedömning av intramyokardpluggar injektioner i infarkt gränszon av en kronisk grismodell av hjärtinfarkt.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Van den Broek, H. T., De Jong, L., Doevendans, P. A., Chamuleau, S. A., Van Slochteren, F. J., Van Es, R. 3D Whole-heart Myocardial Tissue Analysis. J. Vis. Exp. (122), e54974, doi:10.3791/54974 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Hjärt regenerativa terapier syftar till att skydda och reparera skadade hjärtat hos patienter med ischemisk hjärtsjukdom. Genom att injicera stamceller eller andra biologiska ämnen som förstärker angioödem eller vaskulogenes in i infarktgränszonen (IBZ) är vävnadsperfusion förbättras och myokardium kan skyddas från ytterligare skador. För maximal terapeutisk effekt är det en hypotes att den regenerativa substansen är bäst levereras till IBZ. Detta kräver noggranna injektioner och har lett till utvecklingen av nya injektionsteknik. För att validera dessa nya tekniker, har vi utformat en valideringsprotokoll baserat på hjärtvävnadsanalys. Detta protokoll omfattar hel-hjärta myokardiell vävnadsbehandling som möjliggör detaljerad tvådimensionell (2D) och tredimensionella (3D) analys av hjärt anatomi och intramyokardpluggar injektioner. I en gris, var hjärtinfarkt skapats av en 90-min ocklusion av den vänstra främre nedåtgående kransartären. Fyra veckor senare, en Mixture av en hydrogel med superparamagnetiska järnoxidpartiklar (SPIOs) och fluorescerande pärlor injicerades i IBZ med användning av ett minimalt invasivt endokardiell tillvägagångssätt. 1 h efter injektionsproceduren, var gris avlivades, och hjärtat skars ut och inbäddades i agaros (agar). Efter stelning av ägarn, var magnetisk resonanstomografi (MRI), skivning av hjärtat, och fluorescensavbildning utfördes. Efter bild efterbearbetning, var 3D analys för att bedöma IBZ inriktning noggrannhet. Detta protokoll erbjuder ett strukturerat och reproducerbar metod för bedömning av den målsökande noggrannheten hos intramyokardpluggar injektioner i IBZ. Protokollet kan enkelt användas när behandlingen av ärrvävnad och / eller validering av insprutnings noggrannheten hos hela hjärtat önskas.

Introduction

Ischemisk hjärtsjukdom har varit världens ledande dödsorsaken för de senaste decennierna 1. Akut behandling efter hjärtinfarkt syftar till att återställa blodflödet till myokardiet via perkutan koronar intervention eller kranskärlsbypasstransplantering. I svåra infarkter är en stor del av hjärtmuskeln ärrade och dessa fall resulterar ofta i ischemisk hjärtsvikt (HF) 2. Nuvarande behandlingsalternativ för HF fokus på förebyggande och bevarande av hjärtfunktion för HF patienterna, men inte på förnyelse.

Under det senaste decenniet har hjärt regenerativa terapier undersökts som ett behandlingsalternativ för HF 3. Denna terapi syftar till att leverera biologiska, såsom stamceller eller tillväxtfaktorer, direkt till den skadade myokardiet att inducera revaskularisering, cardiomyocyte skydd, differentiering och tillväxt 4. för optimalterapeutisk effekt, är det en hypotes att det biologiska måste injiceras i infarktgränszonen (IBZ) för att underlätta god vävnadsperfusion för överlevnaden av den biologiska och för optimal effekt till målzonen 5, 6. Flera tekniker har utvecklats för att utföra identifiering och visualisering av IBZ att vägleda intramyokardpluggar injektioner 7, 8, 9, 10, 11. Förutom identifiering och visualisering av IBZ, leveransen förlitar också på biomaterial och injektionskatetrar används. Att validera injektionsnoggrannheten av de tillförseltekniker, är en exakt och reproducerbar kvantifiering metod krävs.

Vi har utvecklat ett protokoll för hel-hjärta hjärtvävnadsbehandling som ger tvådimensionell (2D) och tredimensionellanal (3D) avbildning, som kan användas för kvalitativ och kvantitativ studie syftar. Protokollet omfattar inbäddning processen och digital bildanalys. I detta dokument, visar vi ett protokoll för bedömning av den målsökande noggrannheten hos intramyokardpluggar injektioner i IBZ i en stor grismodell av kronisk myokardinfarkt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Den in vivo experiment utfördes i enlighet med Guide för skötsel och användning av försöksdjur som utarbetats av Institute of Laboratory Animal Research. Experimentet godkändes av den lokala djurförsökskommitté.

1. Framställning av injicerbar and Embedding Lösning

  1. Framställa den injicerbara gelén.
    1. Förbereda 1 ml av ureido-pyrimidinon (UPy) gel i enlighet med tidigare beskrivna protokoll 12, 13.
    2. Add superparamagnetiska järnoxidpartiklar (SPIOs) och lösningen för att få en koncentration av 15 mikrogram / ml och rör om blandningen under 5 min för jämn fördelning.
    3. Lägga de fluorescerande mikropärlor till lösningen för att få en koncentration av 10.000 pärlor / ml och rör om blandningen under 5 min för jämn fördelning.
    4. Lagra den resulterande blandningen vid rumstemperatur i en mörk miljö. Varm och vortexa eller stir than lösning strax före injektionsproceduren.
  2. Förbered inbäddning lösningen.
    1. Börja med kranvatten vid rumstemperatur och till agaros (agar) till en koncentration av 4 vikt-%.
    2. Långsamt värma upp lösningen till kokpunkten under användning av en mikrovågsugn och rör ofta under upphettning. Vid uppnående av kokpunkten, lagra och hålla agarlösning ovan 70 ° C under 2 h för att tillåta instängd luft till ytan.
    3. Tillåta agar svalna i rumstemperatur till en temperatur mellan 50 och 60 ° C tills tiden för inbäddning.

2. injektionsproceduren

  1. Utföra premedicinering (antiarytmika, antiblodplättsterapi, och smärta medicinering), anestesi, venös åtkomst, och intubation, såsom tidigare beskrivits 14.
  2. Utföra injektioner med användning av en intramyokardpluggar injektionskateter (Table of Materials). Vid varje injektion, 0.2 ml av blandningen injiceras i en bolus vid en konstant hastighet av ungefär 0,3 ml / min med användning av en injektionsanordning. Placera injektioner vid olika positioner längs IBZ 12.
  3. Administrera 0,2 ml / kg (1,0 mmol / ml) av en gadolinium-baserade kontrastmedel 15 min före euthanizing djuret.
  4. Administrera 20 ml av 7,5% kaliumklorid intravenöst för att avliva djuret.
  5. Säkra mediastinal tillgång följande protokoll steg 8,2-8,3, såsom beskrivits av Koudstaal et al. 14. Skär den nedre caval venen 5 cm från det högra förmaket och ta bort utströmmande blod med en suganordning. Skära ut hjärta och skölj den med 0,9% saltlösning vid rumstemperatur.

3. Bädda Procedure

  1. Förbered hjärtat.
    1. Ta hjärtsäcken från hjärtat samtidigt som förmak och kammare intakt. Dissekera aorta ascendens ± 1 cm ovanför aortaklaffen användning Klinkenbergsax. Skär den nedre caval venen ± 1 cm från förmaket, och göra detsamma för lungvenerna.
    2. Sutur spetsen av hjärtat till botten av en plast inbäddning behållare (17 x 15 x 15 cm, B x D x H) med användning av en 2-0 sutur för att förhindra flotation av hjärtat under inbäddning (Figur 1A).
    3. Suturera den återstående delen av aorta till kanterna av behållaren med användning av 2-0, att se till att hjärtat är centrerad och inte vidröra väggarna hos behållaren (Figur 1B).

Figur 1
Figur 1: Schematisk översikt och Fotografera av inbäddning Container. (A) Schematisk översikt av inbäddningsprocessen. Hjärtat (röd) är fäst i behållaren (blå) med hjälp av suturer. Efter att ha fyllt hjärtat med agar lösningen är utrymmet runt hjärtat fylls. Till sist,två styva plaströr (gul) är placerade i behållaren, intill men inte vidrör hjärtat, för att tjäna som en referens vid bildregistrering. (B) Fotografi av ett hjärta fäst i inbäddning behållaren. Suturerna är fastklämda på fälgen av behållaren med hjälp av klämmor mygga. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

  1. Bädda hjärtat i en slutdiastoliska liknande geometri.
    OBS: Förebyggande av luftbubbla skapelsen är nödvändigt. Om stora luftbubblor föreligger i agarlösning, hålla agar vid 40 ° C, vilket gör att luftbubblorna till ytan.
    1. Kläm fast sämre cava ven använda klämmor mygga. Långsamt injicera den flytande agar med användning av en 50-ml spruta i höger atrium via överlägsen caval venen tills både den högra förmaket och kammaren är helt fyllda.
    2. Kläm lungvenerna som använder mosquito klämmor. Försiktigt passera en agar-fyllda 50-ml spruta tillbakagående genom de aortaklaffar. Långsamt injicera lösningen i den vänstra ventrikeln (LV) tills LV och vänster förmak är helt fyllda. Efter att ha fyllt LV, klämma aorta för att hålla agar i LV.
    3. Häll resterande agar in i behållaren tills hjärtat är helt täckt. Placera två stela plaströr inom inbäddning behållaren för att tjäna som referensstrukturer för senare bildregistrering (Figur 1A). Se till att rören inte vidrör väggarna i behållaren eller hjärtat.
    4. Låta ägarn stelna vid 2 - 7 ° C.

4. Image Acquisition

  1. Utför övergripande ex vivo MRI skannar av hjärtat som är inbäddad i behållaren.
    1. Placera behållaren med det inbäddade hjärta inuti en huvudspole (tabell of Materials).
    2. Angulate skivorna parallellt med botten av behållaren. Använda sig avsamma orientering och vinkling i varje ex vivo MR-sekvens.
    3. Att visualisera myokardium, utföra en fluid dämpas invers återhämtning (FLAIR) -sekvens med följande parametrar: repetitionstid [TR] / ekotiden [TE] = 10 s / 140 ms, flip-vinkel = 90 °, pixelstorlek = 0,5 x 0,5 mm, synfält [FOV] = 169 x 169 mm, 320 x 320 matris, och 3-mm snittjocklek.
    4. Att visualisera myokardinfarkt, utföra en late-gadolinium förstärkt (LGE) -sekvens med följande parametrar: [TR] / [TE] = 5,53 ms / 1,69 ms, flip-vinkel = 25 °, storlek pixel = 1,0 x 1,0 mm, [ FOV] = 169 x 169 mm, 176 x 176 matris, och 3-mm snittjocklek.
    5. Att visualisera SPIOs, utföra en T2 * viktade gradient ekosekvens med följande parametrar: [TR] / [TE] = 88,7 ms / 15 lika fördelade TE med ett intervall av 1,9 - 24,6 ms, flip-vinkel = 15 °, pixel size = 0,5 x 0,5 mm, [FOV] = 169 x 169 mm, 320 x 320 matris, och 3-mm snittjocklek.
  2. vävnads~~POS=TRUNC processjunga
    1. Vända behållaren upp och ned och tillåta luft mellan ägarn och sidorna på behållaren för att avlägsna det fasta agarlösning, inklusive hjärta, från behållaren. Avlägsna de plaststänger från fast agar.
    2. Sektionen agar blocket innehållande hjärtat i 5-mm skivor från apex till basen hos hjärtat med användning av en köttskärare. Hålla vinklingen av de skurna skivorna på samma sätt som i de förvärvade MR-bilder genom att skära parallellt med botten av agar blocket.
    3. Färga agar skivor (inklusive hjärtat) för 15 minuter i en vikt-% av 2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride (TTC) upplöst i 0,9% saltlösning vid 37 ° C, och fotografera de skivor på båda sidor från en vinkelrät vy (figur 2A). Därefter försiktigt skölja skivorna i 0,9% koksaltlösning.
      OBS: I denna studie använde vi en DSLR installation med en lämplig lins / mål ett stativ, och enhetlig belysning. Men fotografierna serveras endast som en kontroll för bedömning av ärr-regionen,så vi kunde ha använt en annan inställning.
  3. fluorescensavbildning
    OBS! Beroende på excitations- och emissionsvåglängder av de fluorescerande mikropärlor, välja lämpliga filterblock och excitation lasrar (t.ex., de röda mikropärlor som används här har excitations- och emissionsvåglängder av 580 nm och 605 nm, respektive, och därför den valda exciteringslaser och bandpassfilter sattes till 532 nm, 580/30 nm och 610/30 nm, respektive).
    1. Välj fluorescens-mode avbildning på variabel mode scanner. Ställa fotomultiplikatorröret till 430 V eller motsvarande och pixelstorleken till 100 x 100 ^ m. Välja en exciteringslaser (532 nm) närmast den excitationsvåglängden av de fluorescerande mikropärlor.
    2. För den första filterblocket, väljer ett bandpassfilter (580/30 nm) som överlappar med emissionsvåglängden för de injicerade fluorescens pärlor (kanal 1). Välja ett bandpassfilter för det andra filterblocket (610/30) utanför emissionsvåglängd (kanal 2).
      OBS: Den andra filterblocket tjänar som en negativ kontroll och för att ta bort auto fluorescens samtidigt hålla injektionsställena intakt.
    3. Skanna båda sidor av de agar skivor i fluorescensläge på variabeln modslaserskanner med användning av de två kanalerna. Se till att varje skiva är helt skannas, inklusive referenshålen.

5. Efterbehandling

OBS: Det första steget i bild efterbearbetning är den manuella segmenteringen av hjärtmuskeln med hjälp av egenutvecklade skript för att spåra endo- och epikardiella gränser, liksom injektionsstället. Detta är samma för både MRI och fluorescens skanningar.

  1. Segment hjärtmuskeln i MRT.
    1. Segmentera endokardiella och epikardiella LV gränsar Flair MRI sekvensbilder.
    2. Kopiera LV segmente från steg 5.1.1 till LGE-MRI dataset och segmentet ärret på LGE MRI-sekvensen.
    3. Kopiera myokardiet segmente från steg 5.1.1 till T2 * viktade datamängds och segment de SPIO nedfall i LV myokardiet.
  2. Behandla fluorescens bilder och utför segmente.
    1. Ladda filer som erhållits från den variabla mods scanner och göra en separat bild av varje tvärsnitts hjärta slice.
    2. Flip skivorna som skannades i basen till spetsen orientering och sortera fluorescens bilder till en stapel för båda kanaler som är orienterade från apex till bas.
    3. Segmentera endokardiella och epikardiella LV borders på fluorescensbilder.
    4. Segment ärret manuellt på fluorescens bilder och använda LGE-MRI och fotografierna för att bekräfta ärr morfologi.
    5. Subtrahera bildstapel för kanal 2 från bildstapeln för kanal 1 för att utesluta auto-fluorescens. Manuellt segment de fluorescerande mikrokorn nedfall och använda T2 * bilder för bekräftelse.
  3. Att skapaen anatomiskt korrekt 3D geometri, utföra en styv registrering av skivorna i bildstapeln baserat på referens strukturer (hålen som skapats av de stela rören). Beräkna och lagra tillämpas translation och rotation av varje bild.
  4. Tillämpa lagrade omvandlingar till bild stackar och segmente. Linjärt interpolera de segmenteringar av båda sidor av skivorna för att rekonstruera den ursprungliga skivtjockleken och för att skapa en 3D-modell av data.

6. Analys

  1. Utföra 2D och / eller 3D-mätningar av avståndet mellan centrumen hos injektionsställen och IBZ att bedöma injektionsnoggrannheten. Mät avståndet längs endokardiell gränsen LV segmentering. I figur 2C och 2F, är ett exempel på 2D- och 3D-mätningar indikeras av den röda linjen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

vävnads~~POS=TRUNC inbäddning

Genom inbäddning processen gjordes en slutdiastoliska liknande geometri etablerad. Ägarn framgångsrikt vidhäftade till hjärtvävnad, vilket möjliggör den vävnad som skall skivas vid den önskade vinklingen med lika slice tjocklekar (fig 2A och 2C).

Bedömning Scar- och injektionsstället

För varje bild modalitet ades infarkt och injektionsplatsbedömningar genomförts framgångsrikt. I både 2D fluorescensavbildning och MRI-avbildning, de ärr och injektionsställena var klart distinkta (Figur 2C, 2D och 2E, respektive). Fotografier av TTC-färgade vävnads och LGE-MRI-bilder ger en kontroll för ärr bedömningen i fluorescensavbildning (Figur2A och 2C).

3D återuppbyggnad

Referensmarkeringarna ge en noggrann och tillförlitlig metod för bildregistrering. Bildefterbearbetnings möjliggör rekonstruktion av 3D-geometrin för den ex vivo hjärtat baserad på de segmente och de fluorescerande bilder av hjärtat (Figur 2F). 3D geometri segmente tillåter en noggrann 3D injektion noggrannhetsbedömning (Figur 2F).

mätningar

I denna studie var injektions nedfall och IBZ projiceras på endokardiella väggen. Efteråt var avstånden mellan utsprången på den endokardiala ytan, mätt (figur 2C och 2F). Den högupplösta (0,1 x 0,1 mm) fluorescerande bildertillåts noggranna mätningar. I 3D-rekonstruktion, var upplösningen i z-riktningen på grund av att skivtjockleken 2,5 mm.

figur 2
Figur 2: Typisk Ex vivo Imaging Data och 3D rekonstruktion. De resulterande bilderna som förvärvats av de olika formerna som används i detta protokoll. Alla bilder visar samma tvär del av den inbäddade hjärta. (A) Fotografi av TTC-färgade skiva i vilken ärret är synlig. (B) Schematisk översikt av de anatomiska strukturerna. (C) Fluorescens bild med båda kanalerna kombineras. Kanalen som täcker spektrum vulsten emissions visas i rött och den negativa kontrollen visas i grönt. Den röda cirkeln visar injektionsstället. Den avståndsmätning från injektion till IBZ är indikerade with den röda linjen. (D) Kort-axeln LGE-MRI; infarktområdet visas som en hyper-intensivt vitt område. (E) T2 * -viktade MR; de SPIO partiklar inom den injicerade substansen kan kännas igen som den lokala signalen void indikeras av den röda cirkeln. (F) 3D visualisering av injektionsställen (röda), ärrvävnad (vitt), och myokardium (grön) som segmenterad i de fluorescerande bilderna. Pilen indikerar samma injektion plats som i C och E. I denna bild, är samma mätning avstånd som anges med den röda linjen. LV = vänster kammares, RV = höger kammare. Skalstrecket representerar 10 mm. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Hela-heart 3D myokardiell vävnadsbehandling enligt detta protokoll erbjuder en strukturerad metod som möjliggör 3D-analys av infarkt, den IBZ, och de utförda injektioner med avseende på den hjärtanatomi. Fyllnadsvolymen av hjärtat beror på den önskade analysen. I denna studie för att utvärdera injektions noggrannhet, som syftar vi fylla hjärtat att likna slutdiastoliska geometri så nära som möjligt. För att verkställa detta är LV spetsen fäst vid botten av behållaren och LV är fylld med agar medan lungvenerna kläms. När LV är fylld, aortan kläms fast också, förhindrar ägarn från att strömma ut från LV och imiterar slutdiastoliska geometri så nära som möjligt. Sektionering inbäddade hjärtat ger fördelen av enhetlig skiva tjocklek och tillåter skivorna att vara i samma vinkling som i ex vivo imaging. Efter skivning, det inbäddningsmaterial förhindrar vävnad från deformation orsakad avhantering av skivorna under bildtagning. Helst bör TTC färgning utföras så snart som möjligt efter avlägsnande från kroppen, eftersom färgningen är beroende av enzymer för att skilja mellan metaboliskt aktiva och -inactive vävnader. I våra protokoll, men det finns flera viktiga steg som måste utföras innan TTC färgning kan ske, inklusive inbäddning process, där den inbäddade hjärtat kyls för att stelna agar. Eftersom vi har observerat tydliga färgning av infarktvävnaden i alla segment, tror vi att denna effekt var minimal.

Den bildutrustning som används här kan ersättas med annan utrustning som ger samma funktionalitet. Högupplösande fluorescensavbildning på en variabel-mode laser scanner och möjlighet att ställa in flera filterblock för att effektivt och noggrant bearbeta vävnaden är väsentliga för detaljerad analys. För bild efterbearbetning, programpaket som tillåter full frihet att Perform bildanalys krävs. Enligt vår erfarenhet, var 3D analys för bedömning av injektions noggrannhet används, men analys på 2D-bilder är också möjligt.

hittills har vi utfört denna myokardvävnad behandlingsmetod i 10 grisar och har kunnat hitta 73% av injektionsställena av i totalt 118 utförda injektioner. Skillnaden mellan mängden injektioner utförda och mängden identifierade injektionsställen är möjligen orsakad av skillnaden mellan den 5-mm snittjocklek och 1,5-mmm inträngningsdjup fluorescensscanner. Teoretiskt, är 2 mm av vävnad inte mäts i varje skiva. Tunnare skivor skulle lösa detta problem.

begränsningar

Trots slutdiastoliska liknande geometri i början av inbäddning processen verkade några hjärtan ha minskat lite i agar. Eftersom vi observerade inga stora avvikelser från enddiastolisk volym, anser vi attDenna effekt var minimal och påverkade inte injektions noggrannhet bedömningen. Använda tunnare vävnadsskivor skulle förbättra noggrannheten av bedömningen och möjliggöra en mer detaljerad jämförelse med ex vivo MRI. Ett annat alternativ skulle vara att använda NIRF medel istället för fluorescerande mikropärlor för att förbättra penetreringsdjupet och möjligen-detekterad fraktionen. Vidare kan den låga temperaturen i den inbäddade hjärta och tidpunkten för TTC färgning orsaka en brist av de enzymer som är nödvändiga för denna typ av färgning. Trots att fotografier av de färgade skivorna visade vara en bra kontroll för ärr bedömning.

framtidsperspektiv

Även om denna metod utformades ursprungligen för noggrannhets bedömningar av intramyokardpluggar injektioner, kan studier med andra endpoints också dra nytta av denna metod (t.ex., infarktstorlek, morfologi bedömning, eller andra organ). I tillägg till MRI, andra 3D-avbildningsmetoder, såsom CT,PET, eller SPECT, kan användas på hjärtmuskelvävnaden efter den påvisade metodik. Dessutom skulle en integrering av dessa olika avbildningsmodaliteter möjligen ytterligare optimera 2D och 3D-analyser.

Slutsats

Avslutningsvis har vi tillhandahållit en ny, standardiserad och reproducerbar metod för att utföra 3D hel-hjärta hjärtvävnadsbehandling. Agar har visat sig vara ett lämpligt medium för hel-hjärta inbäddning, gör det möjligt för vävnaden som skall skivas vid den önskade vinklingen och med lika tjocklek. Dessutom, bildregistrering bevisade möjligt för 3D-rekonstruktion av myokardial avbildning, vilket möjliggör 3D bedömning vid en hög spatial upplösning, vilken kan användas för kvalitativ och kvantitativ studie syftar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har ingenting att lämna ut.

Acknowledgments

Författarna vill tacka Marlijn Jansen, Joyce Visser och Martijn van Nieuwburg för deras hjälp med djurförsök. Vi erkänner kraftigt Martijn Froeling och Anke Wassink för deras hjälp med MRI imaging.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
0.9% Saline Braun
Agarose Roche Diagnostics Scientific grade multipurpose agar
Biomolecular fluorescence scanner Typhoon 9410  GE Healthcare
Embedding container Plastic, dimensions 17 x 14.5 x 14 cm
FluoSpheres Polystyrene Microspheres Invitrogen F8834 red, 10 µm
Gadolinium Gadovist 1.0 mmol/mL
dS 32 channel head coil Philips Or similar
Matlab Mathworks To insure compatability 2015a or newer
Meat slicer Berkel
Myostar injection catheter Biosense Webster
Super paramagnetic iron oxide particles Sinerem
Triphenyl-tetrazolium chloride Merck
UPy-PEG10k
Vicryl 2-0 Ethicon

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Nowbar, A. N., Howard, J. P., Ja Finegold,, Asaria, P., Francis, D. P. 2014 global geographic analysis of mortality from ischaemic heart disease by country, age and income: statistics from World Health Organisation and United Nations. Int J Cardiol. 174, (2), 293-298 (2014).
  2. Kannel, W. B., Belanger, A. J. Epidemiology of heart failure. Am Heart J. 121, (3), 951-957 (1991).
  3. Ibáñez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van De Werf, F. Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury. J Am Coll Cardiol. 65, (14), 1454-1471 (2015).
  4. Bartunek, J., Vanderheyden, M., Hill, J., Terzic, A. Cells as biologics for cardiac repair in ischaemic heart failure. Heart. 96, (10), 792-800 (2010).
  5. Orlic, D., Kajstura, J., et al. Bone marrow cells regenerate infarcted myocardium. Nature. 410, (6829), 701-705 (2001).
  6. Nguyen, P. K., Lan, F., Wang, Y., Wu, J. C. Imaging: Guiding the Clinical Translation of Cardiac Stem Cell Therapy. Circ Res. 109, (8), 962-979 (2011).
  7. Psaltis, P. J., Worthley, S. G. Endoventricular electromechanical mapping-the diagnostic and therapeutic utility of the NOGA XP Cardiac Navigation System. J Cardiovasc Transl Res. 2, (1), 48-62 (2009).
  8. Tomkowiak, M. T., Klein, A. J., et al. Targeted transendocardial therapeutic delivery guided by MRI-x-ray image fusion. Catheter Cardiovasc Interv. 78, (3), 468-478 (2011).
  9. Dauwe, D. F., Nuyens, D., et al. Three-dimensional rotational angiography fused with multimodal imaging modalities for targeted endomyocardial injections in the ischaemic heart. Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 15, (8), 900-907 (2014).
  10. van Slochteren, F. J., van Es, R., et al. Multimodality infarct identification for optimal image-guided intramyocardial cell injections. Neth Heart J. 22, (11), 493-500 (2014).
  11. van Slochteren, F. J., van Es, R., et al. Three dimensional fusion of electromechanical mapping and magnetic resonance imaging for real-time navigation of intramyocardial cell injections in a porcine model of chronic myocardial infarction. Int J Cardiovasc Imaging. 32, (5), 833-843 (2016).
  12. Pape, aC. H., Bakker, M. H., et al. An Injectable and Drug-loaded Supramolecular Hydrogel for Local Catheter Injection into the Pig Heart. J Vis Exp. (100), (2015).
  13. Bastings, M. M. C., Koudstaal, S., et al. A fast pH-switchable and self-healing supramolecular hydrogel carrier for guided, local catheter injection in the infarcted myocardium. Adv Healthc Mater. 3, (1), 70-78 (2014).
  14. Koudstaal, S., Jansen of Lorkeers, S. J., et al. Myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs. J. Vis. Exp. (86), (2014).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics